Clasificacion de Bacterias
Clasificacion de Bacterias
Clasificacion de Bacterias
CLASIFICACION DE BACTERIAS
Coloración Gram: Desarrollada en 1883 por CHRISTIAN GRAM en Dinamarca. Es uno de los
métodos más útiles empleados en microbiología ya que por medio de este es posible
dividir a las bacterias en dos grandes grupos: Gram positivas y Gram Negativas.
Fundamento de la coloración Gram:
Cristal Violeta: Colorante Primario
Solución de Yodo: Mordiente
Alcohol Acetona: Decolorante orgánico
Safranina: Colorante Secundario
Para explicar el mecanismo de la tinción de Gram se ha propuesto la siguiente hipótesis:
Hay un elevado contenido graso en las paredes de bacterias Gram negativas, cuyo
porcentaje asciende hasta un 20%. Se ha demostrado que, en el procedimiento de tinción,
el alcohol cetona, extrae la grasa aumentando la porosidad o permeabilidad de la pared
celular. El complejo cristal violeta yodo se extrae así por el alcohol acetona y el
microorganismo se decolora; al tratarlo con safranina vuelven a tomar el colorante. La
pared de bacterias Gram positivas, por su composición química, se deshidrata por el
alcohol, el tamaño de los poros disminuye, se reduce su permeabilidad y el complejo
cristal violeta - yodo no se extrae; La respuesta a la coloración de Gram es variable en
cultivos viejos de bacterias Gram positivas (azules), entretanto, las bacterias Gram
negativas (rosadas) no son variables.
De acuerdo con su morfología microscópica, se pueden diferenciar formas cocoides
(cocos), bacilares (bacilos), bacilares curvos (vibrios y demás bacilos curvos), espirilares
(espirilos), figura 16 (a). Así mismo, las bacterias pueden encontrarse de forma individual
o agrupados diplococos o diplobacilos, Estreptococos o bacilos (un plano de división),
tétradas, sarcinas, Estafilococos (dos o más planos de división).
Injuria bacteriana: Este fenómeno consiste en daños subletales a nivel de rRNA que
cambia la fisiología bacteriana causando la pérdida de la integridad de la membrana
celular y por consiguiente el desperdicio de una gran variedad de constituyentes
intracelulares. Este daño puede ser causado por radiaciones, deshidratación, congelación
o temperaturas cercanas al punto de ebullición. A nivel molecular la injuria bacteriana
consiste en fenómenos a nivel intracelular: la inducción de la síntesis de proteínas de
choque.
La injuria bacteriana conlleva a la degradación completa de la partícula ribosomal 30s y
una ligera alteración de la partícula 50s. Estas dos partículas conforman el ribosoma el
cual es responsable de la síntesis de proteínas en la célula. Durante un procedimiento de
choque térmico a microorganismos como Staphylococcus aureus y Salmonella
typhimurium se ha encontrado que el RNA 23s, asociado con la partícula ribosomal 50s,
permanece intacto mientras el 16s, asociado con la partícula ribosomal 30s es degradado
por completo (Witter, 1981). El medio de recuperación juega un papel fundamental ya
que las células injuriadas pueden repararse y crecer en un medio nutritivo, pero son
incapaces de desarrollarse en un medio selectivo debido al incremento en la sensibilidad a
reactivos químicos usados para aumentar la selectividad en los medios de cultivo.
Objetivos
Identificar características generales de la morfología y agrupación bacteriana. Con base en
el proceso de tinción Gram comprobar las principales diferencias en la pared celular
bacteriana. Reconocer y diferenciar procesos conducentes a injuria bacteriana.
1. Sobre un portaobjetos limpio y desengrasado se coloca con el asa una muestra pequeña de
material de estudio (caja de petri 1) (Figura 18).
3. Se extiende en forma circular para formar una película muy fina de 10 a 20 mm de diámetro.
Entre más fina sea la película el resultado es mejor.
4. Una vez hecho el frotis pase tres o cuatro veces el portaobjetos por la llama de un mechero
para fijar la preparación. Tenga cuidado de no quemar la muestra.