Reporte de Laboratorio de Parasitologia Compress

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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE SINALOA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICO BIOLÓGICAS


Lic. Químico Farmacéutico Biólogo

PARASITOLOGÍA
REPORTES DE PRÁCTICAS

EQUIPO.
Barraza González Macrina Yarely.
Bojórquez Ochoa Yusvi Estefanía.
Jiménez Soberanes Alejandra Daniela.
Meza Lizárraga Katia Melissa.
Valenzuela Enríquez Nilda Patricia.

GRADO: Séptimo semestre grupo 2.

PROFESOR: Dr. José Guadalupe Rendón Maldonado.

Culiacán, Sinaloa, México. 20 de Diciembre del 2017.


UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SINALOA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICO BIOLÓGICAS

PARA-02: REALIZACIÓN DEL EXAMEN DIRECTO EN FRESCO DE HECES, PARA LA


BÚSQUEDA DE TROFOZOITOS.

1.0 OBJETIVOS.
1.1 Diseñar un diagrama de flujo del examen directo en fresco y señalar los puntos críticos
que deben controlarse para obtener resultados confiables y oportunos.
1.2 Enlistar las recomendaciones para la obtención y manejo de muestras para realizar el
examen directo en fresco.
1.3 Explicar la utilidad del examen directo en fresco de una muestra de heces, en el
diagnostico parasitológico.
1.4 Realizar el método directo en fresco, de una muestra de heces diarreicas.
1.5 Aplicar los principios de Bioseguridad en el laboratorio durante la práctica y al finalizar
la sesión.
1.6 Identificar microscópicamente quistes de Estamoebba coli, Endolimax nana,
Iodamoeba buetschii y Giardia lamblia.

2.0 INTRODUCCIÓN.
Él examen directo en fresco tiene gran utilidad en la detección de trofozoitos de Entamoeba
histolytica, en heces diarreicas, con moco y sangre y en heces pastosas Blastocystis hominis. Los
trofozoitos de Giardia lamblia pueden encontrarse en heces diarreicas, sin moco y sangre. Las
muestras de heces, deben ser procesadas dentro de las dos primeras horas posteriores a su colección.
En el caso de lactantes, la muestra no debe ser recolectada directamente del pañal, a menos que
haya sido colocado con la zona absorbente hacia fuera, o mediante una bolsa colectora que se
adhiere a la región perianal donde se recoge la muestra.

Los trofozoitos de E. histolytica se identifican en la preparación con solución salina, por su


movilidad y la presencia de eritrocitos en el citoplasma; cuando esto no es posible, se recurre a la
tinción de Giomori para observar las características del núcleo. Actualmente la diferenciación de
algunos protozoos intestinales se logra mediante pruebas de inmunoensayo en las heces.

En la preparación con Lugol, se facilita identificación de quistes de protozzos, porque se tiñen de


amarillo o café claro el citoplasma y los núcleos. Durante la observación microscópica,
generalmente se observan artefactos que deben diferenciarse de las formas parasitarias. Es
importante hacer la observación con luz de poca intensidad. En el examen directo en fresco es
posible identificar además de protozoos, huevos y larvas de helmintos, eritrocitos y leucocitos. Es
un procedimiento fácil y muy efectivo en muestras de heces donde el número de parásitos es
elevado; sin embargo, cuando los parásitos son escasos, el examen directo en fresco puede ser
insuficiente para revelar su presencia, por la pequeña cantidad de heces (2mg) que se examina.

3.0 MATERIAL Y EQUIPO.


• Muestra de heces
• Guantes desechables y cubreboca
• Cubreobjetos 22x22 mm
• Portaobjetos 26x76 mm
• Aplicadores de madera
• Tubo de 12 x 100 mm con 3 mL de solución salina, a 37 C
• Marcador de tinta permanente
• Recipiente con cloro al 10% para desechar material sucio
• Hipoclorito de sodio comercial al 10%
• Solución de cloruro de sodio 0.85% (solución salina)
• Solución de Yodo (solución de lugol)
• Microscopio óptico
• Estufa bacteriológica
• Gradilla

4.0 TÉCNICA.
1. Con un marcador escribir el número de la muestra en el extremo de un portaobjetos. En el
extremo de un portaobjetos, colocar una gotita de solución salina a 37 C y otra de Lugol en
el extremo opuesto.
2. Seleccionar la porción de heces con mucosidad o sangre ycon un aplicador de madera,
tomar una pequeña porción (del tamaño de la cabeza de un cerillo) y hacer una mezcla
homogénea con la gota de solución salina y proceder de igual manera con la gota de
solución de Lugol.
3. Mezclar con la esquina de un cubreobjetos y dejarlo caer suavemente hasta cubrir la gota,
evitando la formación de burbujas.
4. Colocar la preparación en el microscopio, utilizar baja iluminación y hacer la revisión
sistémica de toda la preparación con el objetivo de 40X. es importante comentar que en el
reporte que se entrega a un paciente, se anota la fase de vida del parasito y el nombre
científico.
5. En la revisión microscópica, identifique artefactos.
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FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICO BIOLÓGICAS

PARA-02: REALIZACIÓN DEL EXAMEN DIRECTO EN FRESCO DE HECES, PARA


LA BÚSQUEDA DE TROFOZOITOS.

5.0 RESULTADOS.

Descripción de la muestra:

Aspecto: solido.

Color: café oscuro.

Moco y sangre: ausente.

Dibuje las estructuras parasitarias observadas y señale alguna de sus características


morfológicas.

No se observaron parásitos en la muestra.

Dibuje los artefactos observados.


5.0 CONCLUSIONES Y COMENTARIOS.
Aunque n la muestra emitida no se lograron apreciar estructuras parasitarias, no se debe afirmar que
la paciente no presenta infección por parásitos ya que aunque esta técnica es de alta utilidad para el
diagnóstico de protozoos intestinales y algunos helmintos, existen otras formas parasitarias que no
pueden ser observadas mediante esta y por lo tanto no podemos afirmas que no existe alguna
infección por esta.

Alcanzaron los objetivos? Sí No

Comentarios:

Nombre del Instructor:

Firma Sello
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FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICO BIOLOGICAS

PRACTICA 3. REALIZAR EL MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR FLOTACIÓN


CON SULFATO DE ZINC (TÉCNICA DE FAUST).

1.0 OBJETIVOS.
1.1. Diseñar un diagrama de flujo de la técnica de faust y señalar los puntos críticos que deben
controlarse para obtener resultados confiables.
1.2. Enlistar las recomendaciones para la obtención y manejo de la muestra de heces para
realizar exámenes de concentración.
1.3. Explicar la utilidad del método de concentración por flotación con sulfato de zinc de una
muestra de material fecal formada.
1.4. Realizar el método de concentración por flotación con sulfato de zinc de una muestra de
materia fecal formada.
1.5. Identificar microscópicamente quistes de protozoos patógenos y no patógenos.
1.6. Aplicar los principios de bioseguridad en el laboratorio durante la práctica y al finalizar la
sesión.

2.0 INTRODUCCIÓN.
El uso de técnicas de concentración para el estudio de las heces, aumenta la probabilidad de
detectar parásitos que son eliminados en pequeñas cantidades y que no pueden detectarse
mediante un examen directo. Los métodos de concentración se basan en los principios físicos de
centrifugación y sedimentación y no son útiles para recuperar trofozoitos.
En la realización de procedimientos de concentración por flotación, se utilizan: solución de
sulfato de zinc, solución saturada de cloruro de sodio (Método de Willis), saturada de sacarosa
(Método de Sheather) y sulfato de magnesio.
En el método de Faust, el principio básico se debe a la elevada gravedad específica de solución
de sulfato de zinc que, permite la flotación de los parásitos en la película superficial y los restos
de materia fecal permanezcan en el fondo del tubo.
Mediante esta técnica es poco probable detectar huevos pesados como los de fasciola hepática,
taenia spp y huevos infértiles de ascairis lumbricoides. Otras desventajas de esta técnica son 1)
la cubierta de unos huevos y quistes se colapsan por el contacto prolongado por el sulfato,
alterando su morfología, y, 2) en las heces con gran contenido de grasas, esta flota junto con las
estructuras parasitaria interfiriendo la observación microscópica. Es importante destacar que,
cuando se utiliza la técnica de Faust en un laboratorio clínico para detectar parásitos
intestinales, se recomienda hacer dos preparaciones: una de la película superficial y otra del
sedimento. En el diagnóstico de parásitos intestinales es recomendable realizar dos tipos de
exámenes de concentración: uno por flotación y otro por sedimentación.
El método de faust es uno de los procedimientos de concentración ampliamente utilizado en la
mayoría de laboratorios de análisis clínicos, porque es un método sencillo y económico.

3.0 MATERIAL Y EQUIPO.


- muestra de heces
- guantes desechables y cubre bocas
- portaobjetos de 26 x 76mm
- cubreobjetos de 22x22 mm
- tubos de ensayo de 13x100mm
- embudo de plástico de 5 cm de diámetro y tallo corto
- malla de alambre de 8x8cm
- asa de alambre en ángulo de 90°
- abate lenguas de madera
- aplicadores de madera
- gradilla
- recipiente de vidrio de 200ml
- probeta de 500ml
- recipiente con solución de cloro 10% para deshecho de material
- densímetro para sales pesadas
- solución de sulfato de zinc con gravedad especifica de 1.18
- solución de lugol de trabajo
- microscopio óptico
- centrifuga clínica

4.0 TECNICA.

1. Identificar el tubo de ensayo con el número de equipo correspondiente.

2. Preparar una suspensión de materia fecal, depositando en el frasco con un abate lenguas una
pequeña porción de heces (1 o 2 gr) y añadir 10ml de agua de la llave, mezclar hasta asegurarse que
todas las partículas grandes queden deshechas y se tenga una suspensión homogénea.

3. Filtrar la suspensión a través de una malla de alambre colocada sobre un embudo y recibir el
filtrado en un tubo de ensayo colocado en una gradilla, llenar hasta 1cm del borde del tubo.

4. Centrifugar a 500xg durante un minuto, con cuidado decantar el sobrenadante y evitar el


escurrimiento del sedimento.
5. Agregar aproximadamente 3ml de agua de la lleve y homogenizar el sedimento con un aplicador
de madera, agregar más agua de la llave hasta llegar a 1cm del borde del tubo.

6. Repetir dos veces los pasos 4 y 5, para lograr que el sobrenadante quede claro

7. Agregar al último sedimento aproximadamente 3ml de solución de sulfato de zinc y homogenizar


con un aplicador de madera. Agregar más sulfato de zinc hasta 1cm del borde del tubo y centrifugar
a 500xg durante 1 minuto. La densidad del sulfato de zinc debe verificarse periódicamente o antes
de realizar la técnica.

8. Sacar el tubo de la centrifuga y con mucho cuidado colocarlo en la gradilla.


UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SINALOA

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICO BIOLOGICAS

PRACTICA 3. REALIZAR EL MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR FLOTACIÓN


CON SULFATO DE ZINC (TÉCNICA DE FAUST).

Equipo: Grupo: 4-02. QFB.


Barraza González Macrina Yarely.
Bojórquez Ochoa Yusvi Estefanía.
Jiménez Soberanes Alejandra Daniela.
Meza Lizarraga Katia Melissa.
Valenzuela Enríquez Nilda Patricia.

4.0 RESULTADOS
Dibuje los artefactos que observó en la revisión microscópica.

Dibuje los quistes observados microscópicamente y señale las estructuras morfológicas que los
identifican.
No se observaron quistes.
5.0 Conclusiones y comentarios.

En la muestra recolectada no se lograron apreciar estructuras parasitarias. No se debe


afirmar que la paciente no presenta parásitos ya que aunque esta técnica es de alta utilidad
para el diagnóstico de protozoos intestinales y algunos helmintos, existen otras formas
parasitarias que no pueden ser observadas mediante esta.

EVIDENCIAS.

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