Practicas de Laboratorio de Microbiologia
Practicas de Laboratorio de Microbiologia
Practicas de Laboratorio de Microbiologia
TLAXCALA
FACULTAD DE ODONTOLOGIA
DE BIOQUIMICA GENERAL
ELABORÓ:
M.en C. Gabriela Vargas Oliver NOMBRE DEL ALUMNO:
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GRUPO:
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EL ALUMNO:
INTRODUCCION:
Leeuwenhoek observó por primera vez las bacterias en el siglo XVII, y lo hizo con
suspensiones de microorganismos sin teñir y utilizando un microscopio simple. Hasta el
año de 1884 Christian Gram desarrolló un método de tinción que lleva su nombre y que es
de enorme utilidad en cualquier laboratorio de bacteriología. Ya que la técnica de tinción
revela detalles referentes a la forma y agrupación bacteriana como cualquier otra técnica de
tinción proporciona información sobre propiedades estructurales de las bacterias que
permiten separarlas en dos grandes grupos: gram positivas y gram negativas.
Estreptococos o
cadenas
diplococos
Estafilococos o
grupos
Otro grupo de bacterias son las helicoidales, hay dos tipos de estas y son: rígidas y
flexibles. Las especies helicoidales rígidas se presentan en varias familias de
esquizomicetos, y las especies helicoidales flexibles suelen denominarse espiroquetas.
OBJETIVO:
MATERIAL:
METODO:
DETERMINACIÓN DE CATALASA:
Bacterias gram positivas se tiñen de azul y las bacterias gram negativas se tiñen de rojo.
REPORTE:
Cada alumno entregará su práctica con los dibujos correspondientes: dibujará el color y la
forma de las bacterias (cocos, bacilos, espiroquetas, cocobacilos) y el resultado de la
catalasa de la bacteria correspondiente.
CUESTIONARIO:
5. Describe brevemente que diferencias encontraste entre las laminillas que observaste.
REFERENCIAS:
INTRODUCCION:
Exudado faríngeo
todo en encuestas epidemiológicas que nos ayudan a definir el canal endémico de los
aislamiento de estos microorganismos debe ser analizado en base a un estudio clínico muy
La presencia de estas bacterias dependerá del tipo de pacientes y edad del mismo
neumonía.
Cabe señalar que una tinción de gran en este sitio anatomico del cuerpo humano no
es de importancia clínica ya que es una zona muy rica en flora bacteriana normal, no
tenemos griteríos para determinar si una muestra es indicativa de infección como la que si
1.- El alumno aprenderá a tomar y sembrar, una muestra de exudado faríngeo, para el
MATERIAL:
1 propipeta
1 hisopo estéril.
1 abatelenguas estéril.
1 Haza bacteriológica
1 mechero
1 portaobjetos
Aceite de inmersión
peroxido de hidrogeno.
incubadora
Centrifuga
1 microscopio
TOMA DE MUESTRA
2. Colocar al paciente en una silla con la cabeza hacia arriba, e indicándole que abra la
boca y saque la lengua.
5. Se inoculan las placas de agar sangre de carnero, sal y manitol en zona estéril con
el hisopo del medio de transporte.
REPORTE:
REFERENCIAS
INTRODUCCION:
La caries dental es una de las infecciones más comunes en la cavidad oral de los
humanos, siendo las bacterias orales como el grupo mutans, el más implicado en la caries
dental, formado por siete especies: S. mutans, S. sobrinus, S. downei, S. rattus, S. cricetus,
S. ferus y S. macacae, siendo los dos primeros asociados a caries dental. El grupo mutans
posee los antígenos a, b, c, d, f y g, denominados cariotipos donde S. mutans es el cariotipo
“c” y S. sobrinus “e”, algunos cariotipos como el “d” no se ha aislado en humanos. En
Estados Unidos el cariotipo “c” es el mas aislado seguido por el “e”, mientras que en Brasil
el cariotipo “c” se presenta en el 65% y el “e” en el 35% de casos de caries dental, otros
países como en Europa se encuentra el 50% del “c” y del “e”. En México no existen datos
epidemiológicos de que cariotipos sean los mas prevalentes.
OBJETIVOS:
MATERIAL:
METODOS:
TOMA DE MUESTRA:
La toma de muestra será de un integrante del equipo, y este debe de presentarse con lavado
de dientes dos horas antes, sin haber ingerido alimento durante este tiempo.
CULTIVO DE S. mutans.
Tomar 100 l
Colocar 100 l
de esta
de saliva 2 3
1 muestra
Dilución 10-1
Dilución Dilución
10-3 10-2
CONTROL DE CALIDAD:
REPORTE:
CUESTIONARIO
REFERENCIAS
1.- Nogueira R.D., Alves A.C., Napimoga M.H., Smith D.J. y Mattos –Graner R.O.
2005. Characterization of Salivary Inmunoglobulin A Responses in Children Heavily
Exponed to the Oral Bacterium Streptococcus mutans: Influence of Specific Antigen
Recognition in Infection. Infec and Inm. 73: 5675-5684.
3.- Tanzer J.M., Livingston J., Thompson M.A. 2001. The Microbiology of Primary
Dental Caries in Humans.J dent Educ. 65: 1028-1036.
4.- Becker M.R., Paster B.J., Leys E.J., Moeschberger M.L., Kenyon S.G., Galvin J.,
Boches S.K., Dewhirst F. y Griffen A. 2002. Molecular Analysis of Bacterial Species
Associated with Childhood Caries. J. Clin Microbiol. 40: 1001-1009.
6.-Okada M., Soda Y., Hayashi F., Doi T., Suzuki J., Miura K. Y Kozai K.
2005.Longitudinal Study of dental caries incidente associated with Streptococcus
mutans and Streptococcus sobrinus in pre-school children. J Med Microbiol. 54:661-
665.
INTRODUCCION:
Anaerobias estrictas: Crecen en atmósferas con una tensión de oxígeno inferior a 0.5%.
FUENTES DE INFECCION
- El suelo, agua (Lagos, sedimento de ríos, océanos, aguas cloacales) Alimentos y Tracto
gastrointestinal de animales.
a) CAVIDAD ORAL: En la boca existe una flora polimicrobiana muy compleja ligada a la
variabilidad de las condiciones existentes en el interior de la misma como son:
1.-El potencial redox en los diferentes espacios como pliegues bucales, superficie de la
lengua, surcos gingivales, espacios periodontales.
2.- Presencia de placa bacteriana: Entre más antigua es la placa mejores son las condiciones
de anaerobiosis.
3.- Edad: A los pocos días del nacimiento hay temprana implantación de Lactobacilos y
Streptococcus, posteriormente Staphylococcus y Veillonelas. A los 6 meses de edad
encontramos Actinomyces, Nocardias, Fusobacterias. Podemos mencionar como
anaerobios componentes de la flora normal de cavidad oral y Tracto Respiratorio Superior
los siguientes géneros:
MATERIAL:
METODO:
1. Tomar la muestra con una jeringa estéril el exudado del absceso e inmediatamente
tapar la jeringa y colocar parte de la muestra en el medio tioglicolato.
2. La otra parte del exudado sembrarlo inmediatamente en gelosa sangre de carnero
con hemina menadiona en estría cruzada.
3. Incubar a 37 °C en anaerobiosis el tubo y la placa durante 24 hrs.
4. Revisar el cultivo y morfología colonial del crecimiento.
RESULTADOS
REFERENCIAS:
PRACTICA 1: Bioelementos
Práctica No.1
Los bioelementos son elementos químicos que constituyen a los seres vivos. Se clasifican
en:
Los bioelementos primarios son abundantes en los seres vivos y esto se debe a que
representan ciertas características que los hacen idóneos para formar las moléculas de los
seres vivos.
INORGÁNICAS ORGÁNICAS
o Carbohidratos
Agua
o Lípidos
CO2
o Proteínas
Sales minerales
o Ácidos nucleícos
OBJETIVO:
MATERIAL:
METODOS:
EXPERIMENTO 1
EXPERIMENTO 3
2.- Abanique los vapores para percibir el olor (no oler directamente).
Observe y conteste:
CONCLUSIONES:
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INTRODUCCIÓN:
OBJETIVOS:
Tubos de ensayo
Gradilla
Pinzas moss
Vaso de precipitado
Mechero o parrilla eléctrica
Tripie
Tela de asbesto
Parafilm
REACTIVOS
Glucosa
Galactosa
Maltosa
Manosa
Lactosa
Sacarosa
Almidon
Reactivos de fehling A y B
Lugol
HCl diluido al 10%
Bicarbonato
Papa y /o arroz
METODO:
2.- Medir 1 ml de solución de glucosa y colocar en el tubo 1 hacer lo mismo con los demás
carbohidratos y ponerlos en los tubos 2,3…..respectivamente, como se observa en la tabla I:
FACULTAD DE ODONTOLOGIA Pá gina 27
Tabla 1
No. de tubo 1 2 3 4 5 6 7
Glucosa al 1% 1 ml
Manosa al 1% 1ml
Galactosa al 1% 1ml
Maltosa al 1% 1 ml
Lactosa al 1% 1 ml
Sacarosa al 1% 1 ml
Almidon al 1% 1 ml
Reactivo de fehling A 3 gotas 3 gotas 3 gotas 3 gotas 3 gotas 3 gotas 3 gotas
Reactivode Fehling B 3 gotas 3 gotas 3 gotas 3 gotas 3 gotas 3 gotas 3 gotas
3.- Cuando se le agregan las gotas del reactivo de Fehling (A y B) el liquido del tubo de
ensayo adquirirá un fuerte color azul, agitar.
6.- La reacción será negativa si la muestra queda azul o cambia a un tono azul-verdoso.
RESULTADOS:
Glucosa
Manosa
Galactosa
Maltosa
Lactosa
Sacarosa
Almidón
No. De tubo 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Glucosa al 1% 1ml
Manosa al 1% 1 ml
Galactosa al 1% 1 ml
Maltosa al 1% 1ml
Lactosa al 1% 1 ml
Sacarosa al 1% 1 ml
Almidon al 1% 1 ml
Solución de papa 1 ml
Solución de arroz 1 ml
Lugol 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas
RESULTADOS:
Es polisacárido
No. De tubo Presencia de color azul –violeta
Si o No
Glucosa al 1%
Manosa al 1%
Galactosa al 1%
Maltosa al 1%
Lactosa al 1%
Sacarosa al 1%
Almidon al 1%
Solución de papa
Solución de
arroz
REFERENCIAS:
INTRODUCCION:
Liquido pH
Plasma sanguíneo 7.4
Liquido intersticial 7.4
Liquido intracelular 5.5-6.9
Jugo gástrico 1.5-4
Leche humana 7.4
Saliva 6.4-7
Orina 5-8
La neutralidad del plasma y otros líquidos contribuyen al buen funcionamiento
celular. Debe de hacer un equilibrio entre la producción de iones H+ y OH-.
Causas de acidosis: diarrea, insuficiencia tubular renal, obstrucción del tracto urinario,
ayuno prolongado, ingestión de alcohol metílico, anestesia general, sobredosis de sedantes,
paro cardiaco, neumonía prolongada, etc.
OBJETIVOS:
MATERIAL:
Potenciómetro
Vasos de precipitado
Agitador de vidrio
Pizetas
Tiras reactivas de pH
METODO:
CUESTIONARIO
FACULTAD DE ODONTOLOGIA Pá gina 33
1. ¿Qué es el pH?
2. En todas las sustancias se puede medir el pH
3. ¿Cómo está relacionada la acidez y la alcalinidad con el pH?
4. ¿Cuál es el pH de la sangre
5. ¿Cuáles son los principales amortiguadores en el organismo para mantener el pH?
6. ¿Qué es acidosis metabolice y respiratoria
7. ¿Qué es alcalosis metabólica y respiratoria
8. ¿Cuáles son los mecanismos compensadores para la acidosis y alcalosis metabolica
y respiratoria?
REFERENCIAS:
Práctica No. 4
INTRODUCCION:
OBJETIVO:
Tubos de ensaye
REACTIVOS:
Lugol
Solución de almidón al 2%
METODO:
A) Recolección de la saliva
RESULTADO:
CUESTIONATIO:
Eliaz Kaufman and Ira B. Lamster. 2002. The diagnostic applications of saliva: a
Review. Crit. Rev. Oral Biol. 13: 197-212.
M. Lenander-Lumikari and V. Loimaranta. 2000. Saliva and Dental Caries. Adv.
Dent. Res. 14: 40-47.
W.M. Edgar and S.M. Higham 1995. Role of Saliva in Caries Models. Adv. Dent.
Res. 9: 235-238.
Práctica No. 5
LÍPIDOS
Los lípidos son un grupo heterogéneo de biomoléculas los cuales tienen las
siguientes propiedades:
Forman parte de los componentes celulares, también son parte del tejido adiposo
siendo amortiguadores y aislantes térmicos.
Proporcionan energía al cuerpo humano en un 40% de las calorías son aportados
por ellos.
Sirven para transportar sustancias liposolubles en sangre.
TABLA 1
1.- Lípidos 1.1 Acilgliceroles (están formados por glicerol y acidos grasos)
2.3 Sulfolípidos
2.4 Lipoproteínas
3.- Grupo 3.1Terpenos y terpenoides
miscelaneo 3.2Esteroles y esteroides
3.3Eicosanoides
Los ácidos grasos forman parte de los lípidos simples, estos pueden ser saturados e
insaturados. Los ácidos grasos esenciales son ácidos grasos poliinsaturados (linoleido y
linolénico), estos no pueden ser sintetizados por los organismos superiores y deben de ser
administrados en la dieta, la carencia de estos puede producir alteraciones fisiológicas que
pueden llegar a provocar la muerte.
OBJETIVOS:
MATERIAL:
Tubos de ensayo
gradilla
pinzas moss
Varillas de fidrio
Mechero o parrilla eléctrica
Tripie
FACULTAD DE ODONTOLOGIA Pá gina 39
Tela de asbesto
Vasos de precipitados
Pipetas
Parafilm
REACTIVOS
METODOS:
Saponificación
Solubilidad
CONCLUSIONES
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CUESTIONARIO:
REFERENCIAS: