Chimbo Toalombo Denisse Mariuxi Ip5

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO LAB E201- BLOQUE E
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE MEDICINA
INFORME DE PRÁCTICA DE BIOQUÍMICA I
I. DATOS GENERALES
INFORME DE PRÁCTICA Nº 5
PERIODO ACADÉMICO 2022 - 2S
HORARIO DE LA PRÁCTICA: PRIMERO B
viernes 10H00 a 12H00
FECHA DE REALIZACIÓN 20 de enero del 2023
DE LA PRÁCTICA:
10H00 a 12H00 GRUPOS 1-2-3
12H00 a 13H00 GRUPOS 4-5-6
FECHA DE ENTREGA DEL 10 de diciembre del 2023
INFORME DE LA PRÁCTICA:
NOMBRE DE LA DOCENTE Dra. María Angélica Barba Maggi, Mgs.
CURSO Primer Semestre
PARALELO B
GRUPO Nº 3
NOMBRES Y FIRMAS DE APELLIDOS Y CÉDULA FIRMA
LOS ESTUDIANTES NOMBRES
PARTICIPANTES COMPLETOS
Cajas Herrera 050449234
Sharlyn Marcela -9
Chimbo
025036125
Toalombo
-0
Denisse
Colcha Carrillo 060533420
Mónica Gisell -0
Segovia Almeida 050394891
Anayeli Marley -1
OBSERVACIONES
(espacio exclusivo para la
docente)
CALIFICACIÓN
(espacio exclusivo para la
docente)
LUGAR DE LA PRÁCTICA
LAB E201- BLOQUE E Facultad de Ciencias de la Salud
Soporte en el Aula Virtual Bioquímica I
https://moodle.unach.edu.ec/course/view.php?id=35026
CARRERA DE MEDICINA
UNIDAD SÍLABO No. 4 ENZIMAS

RESULTADO DE Relaciona la función de las enzimas y catalizadores,
APRENDIZAJE mediante el estudio de su comportamiento biológico, para
determinar su participación en los varios procesos
metabólicos, con base científica y sustento axiológico.
II. DESARROLLO
1. TÍTULO DE LA PRÁCTICA Reacciones Cualitativas y Cuantitativas de Enzimas
2. OBJETIVOS
2.1 OBJETIVO GENERAL Analizar cualitativa y cuantitativamente las enzimas,
interpretar resultados y establecer la importancia
biomédica.
2.2 OBJETIVOS EPECÍFICOS: 2.2.1 Describir y aplicar métodos cualitativos que permitan
analizar las propiedades y funciones de las enzimas
digestivas, amilasa salival, catalasa y establecer su
importancia en los procesos metabólicos.
2.2.2 Describir y aplicar métodos cuantitativos
espectrofotométricos para determinar la
concentración de enzimas para diagnóstico clínico:
GOT (Transaminasa Glutámica Oxal Acética), GPT
(Transaminasa Glutámica Pirúvica), Amilasa, Lipasa,
Creatincinasa, Fosfatasa Acida, Fosfatasa Alcalina,
Lactato deshidrogenasa (LDH) en muestra
sanguínea y establecer su importancia en los
procesos metabólicos.
3. MATERIALES – REACTIVOS – EQUIPOS:

 4 gradillas
 20 tubos de ensayo grandes (trae el grupo)
 5 tubos de ensayo pequeños (trae el grupo)
 1 pipeta semiautomática de 100 -1000 ul
 1 pipeta semiautomática de 10 -100 ul
 4 pipetas de vidrio de 5 ó 10ml
 1 pipeta Pasteur
 1 varilla de agitación
 1 vaso de precipitación de 250 ml
 2 erlenmeyers
 1 pera de succión
 1 embudo simple pequeño
 1 pizeta con agua destilada
 1 mortero con pistilo
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 1 pinza metálica para tubo de ensayo

 1 espátula
 1 cronómetro
 1 termómetro
 1 mechero de bunsen con suministro de gas
 Parafilm para tapar 2 vasos de precipitación de 50 o 100 ml
 Papel filtro
 1 malla metálica
 Papel filtro
Kit de reactivos para cuantificar:
 GOT
 AMILASA
 LIPASA
 Reactivo de lugol (5 ml en un tubo de ensayo grande rotulado por cada
grupo)
 Reactivo de Benedict (5 ml en un tubo de ensayo grande rotulado por
cada grupo)
 Almidón al 5% (5 ml en un tubo de ensayo grande rotulado por cada
grupo)
 Avena
Equipos
 Centrífuga
 Vórtex
 Espectrofotómetro
 Baño termostático
 Reverbero (dispensar vasos grandes) sobre una malla metálica para baño
maría

MATERIALES EN EQUIPO
 2 Franelas de 40 cm cada una
 1 frasco de cloro pequeño
 1 frasco estéril (para torundas de algodón, pueden ser recipientes plásticos
de boca ancha)
 Torundas de algodón
 1 frasco de alcohol
 5 gasas estériles
 1 frasco de jabón líquido
 1 dermográfico (o marcador de material de vidrio)
 2 cepillos para lavar tubos de ensayo (pequeños de 5 ml y grandes de 10
ml)
 1 par de guantes de uso doméstico
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 1 frasco con detergente (para lavado de materiales)

 20 puntas azules
 20 puntas amarillas
 1 paquetes de toallas desechables
 1 tubo al vacío de tapa roja (sin anticoagulante)
 1 Aguja vacuntainer tapa verde
 1 vendita o curita
 1 Torniquete
 1 Cápsula
 1 jeringuilla
 1 frasco alcohol antiséptico
 1 cápsula o comprimido de pancreatina (digenil o pankreoflat)
 2 inciensos
 2 vasos desechables transparentes pequeños
 1 porción pequeña de riñón de cerdo en estado fresco
(aproximadamente 20 g)
 1 porción pequeña de patata sin cáscara estado fresco
(aproximadamente 20 g)
 1 frasco pequeño de agua oxigenada
 1 tubo de tapa roja al vacío
 1 aguja vacuntainer
 1 cápsula
 1 torniquete
 1 curita
 1 goma de mascar sin azúcar
 6 jeringuillas de 5 ml
MATERIALES INDIVIDUALES
 1 mascarilla
 1 par de guantes de manejo de látex
 1 cobertor de cabello (gorra para laboratorio)
 1 mandil con el nombre del estudiante y sello de la universidad - Carrera de
Laboratorio Clínico
 1 toalla de mano para uso personal
4. HERRAMIENTAS DIDÁCTICAS:
Aula virtual, recursos multimedia imágenes, videos, texto en guía de práctica,
registros de datos de práctica, formato de informe.
5. FUNDAMENTO TEÓRICO:
Las enzimas son biomoléculas de naturaleza proteica, participan en las reacciones
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acelerando los procesos metabólicos (catálisis) que ocurren en niveles intra ó

extracelulares. Las variantes enzimáticas son: isoenzimas, heteroenzimas y
aloenzimas. Las enzimas No sufren cambios en su estructura al actuar como
catalizadoras, teniendo la capacidad de regeneración después de participar en las
reacciones.
En el proceso de digestión, los alimentos contienen biomoléculas, las cuales deben
ser catabolizadas en compuestos y/ó estructuras moleculares más sencillas, para que
sean absorbidas a nivel del tubo digestivo y ser transportadas a los diferentes
espacios celulares, sitios en los que participarán en otros procesos metabólicos, lo que
contribuyen al mantenimiento de la homeostasis o a su vez participar en el
anabolismo. En el caso particular de los carbohidratos inician su proceso de digestión
en la boca, lugar en el que gracias a la presencia de la enzima amilasa salival, la cual
cataboliza la degradación de enlaces glucosídicos del almidón, generando: maltosa,
glucosa y dextrinas de almidón que poseen todos los enlaces.
La actividad enzimática se afecta por las siguientes condiciones:
1. Temperatura:
Las enzimas son termolábiles, al incrementar la temperatura en ciertos límites se
acelera la velocidad de la reacción, sin embargo, esta condición tiende a
desnaturalizar la enzima pro ser de naturaleza proteica, perdiendo así su
actividad biológica.
La temperatura, a la cual se observa la máxima actividad enzimática se
denomina Temperatura óptima.
2. pH:
Las enzimas de un estado ionizado (con carga) pueden cambiar a un estado
neutro (sin carga), lo cual influyen en la pérdida de su actividad biológica.
El pH al cual se observa, la máxima actividad enzimática se denomina pH
óptimo.
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3. Inductores e inhibidores:
Se produce una interacción del sustrato con la enzima. Los inhibidores tienen
gran utilidad en bioquímica, ya que ayudan a determinar la especificidad de la
enzima por el sustrato y el mantenimiento de la estructura activa de la enzima.
Estos compuestos no son alterados químicamente por la enzima.
De acuerdo al tipo de inhibición que ejerzan éstas sustancias, son: reversibles e
irreversibles
5.1. LA ENZIMA CATALASA
La enzima catalasa se la puede encontrar en casi todos los organismos vivos
expuestos al oxígeno, trabaja como antioxidante de muchas toxinas, alcoholes
como el etílico el metílico, formaldehído, nitritos, entre otros.
La función principal es facilitar la reacción de descomposición del peróxido de
hidrógeno (agua oxigenada)
H2O2 → 2H2O + O2
5.2. ENZIMAS DE IMPORTANCIA CLÍNICA PARA DIAGNÓSTICO MÉDICO
Se emplean las enzimas en altas investigaciones de laboratorio y en análisis
clínicos, actúan como reactivos biológicos y permiten la cuantificación de analitos o
compuestos de interés en sangre o en cualquier muestra biológica, las cuales
ayudan en el diagnóstico, pronóstico y tratamiento.
Una clasificación resume a las enzimas de acuerdo con la reacción química que
catalizan:
1. Oxidoreductasas
2. Transferasas
3. Hidrolasas
4. Liasas
5. Isomerasas
6. Ligasas
Por significancia clínica pueden agruparse en:
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 Enzimas séricas hepáticas

 Enzimas séricas pancreáticas
 Enzimas séricas en el infarto de miocardio
 Enzimas séricas perfil prostático
 Variante de enzimas Láctico Deshidrogenasas, etc.
Como ejemplos se pueden citar de acuerdo a nomenclatura científica y de la
COMISIÓN DE ENZIMOLOGÍA CLÍNICA: Las siguientes
 FOSFATASAS: CLASE HIDROLASA SUBCLASE ESTERASAS
a. FOSFATASA ALCALINA: EC 3.1.3.1
b. FOSFATASA ACIDA: EC 3.1.3.2
 CREATINA QUINASA: EC 2.7.3.2
 AMINOTRANSFERASA O TRANSAMINASAS:
 ASPARTATO AMINOTRANSFERASA (AST ó GOT) EC 2.6.1.1
 ALANINA AMINOTRANSFERASA (ALT Ó GPT) EC 2.6.1.2
 GAMMA GLUTAMIL TRANSFERASA: EC 2.3.2.2
 LACTATO DESHIDROGENASA: EC 1.1.1.27
AMILASA: EC 3.2.1.1
6. MÉTODOS: Cualitativos y Cuantitativos (enzimáticos, colorimétricos y volumétricos)
7. PROCEDIMIENTO – FUNDAMENTO:
Rotular 2 vasos desechables pequeños transparentes como A y B respectivamente
Rotular 9 tubos de ensayo grandes como: A, B, C, D, E, F, G, H e I respectivamente
7.1. PODER DE LAS ENZIMAS DIGESTIVAS
1. Los vasos desechables pequeños transparentes que ya fueron rotulados: A
yB
Vaso A (será el vaso para el blanco)
Vaso B (será el vaso para la prueba)
2. En los vasos A y B pesar 5.0 g de avena respectivamente.
3. Triturar completamente una cápsula de pancreatina (digenil o pankreoflat)
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en el mortero.
4. Añadir 50 ml de agua destilada en los vasos A y B, mezclar. Establecer
características organolépticas: color, aspecto- consistencia y registrar datos,
observaciones
5. Inmediatamente añadir solo al vaso B el contenido de la cápsula de
pancreatina (digenil o pankreoflat), que fue previamente triturada, mezclar
con una varilla a de agitación.
6. Dejar en reposo 30 minutos
7. Trascurrido el tiempo de reposo, establecer características organolépticas:
color, aspecto- consistencia y registrar datos, observaciones y llegar a
conclusiones.
7.2 PRUEBAS CUALITATIVAS DE LA COMPOSICIÓN Y PROPIEDADES DE LAS
ENZIMAS
A. PREPARACIÓN DE LA ENZIMA AMILASA SALIVAL Y DETERMINACIÓN
DE SUS PROPIEDADES
Tubos de ensayo: A, B, C, D, E, F, G, H, I
1. Seleccione un estudiante del grupo, el cual deberá enjuagar su boca con
tres buchadas de agua destilada, masticará un trozo de papel filtro, o una
goma de mascar sin azúcar estimulando la salivación.
2. En el TUBO A: El estudiante irá depositando la saliva que segrega, a
través de un pequeño embudo simple, hasta obtener 2 ml de saliva
aproximadamente. Una vez obtenida la saliva adicionar 6 ml de agua
destilada (Esta solución se denominará “solución de enzima base”),
mezclar. Será está solución la que se utilizará para las siguientes
experiencias de la práctica.
3. En el TUBO B: Adicionar 1 ml de agua destilada y 4 ml de solución de
almidón al 5%, mezclar en vórtex 3 segundos.
4. En el TUBO C: Colocar 1 ml de agua destilada, añadir 4 ml de solución de
almidón al 5% y 4 ml de la “solución de enzima base” que estaba
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contenida en el tubo A, mezclar en vórtex 3 segundos y someter a

ebullición durante 5 minutos. Retirar el tubo de ensayo del baño de agua.
Realizar las siguientes pruebas indicadas en la tabla:

PRUEBA DE LUGOL: El lugol es PRUEBA DE BENEDICT: permite
una solución de Iodo – (Di Iodo identificar a los azucares reductores
disuelto en Ioduro de potasio), (contienen un OH libre del Carbono
permite identificar almidones dando anomérico, en medio alcalino reduce
2+
un color azul violeta o púrpura el Cobre (Cu ) a Cu+, produciendo
profundo. Determina la presencia o un precipitado rojo ladrillo de óxido
alteración del almidón u otros cúprico (Cu2O). En este experimento
polisacáridos. se indica la presencia de glucosa y
maltosa, producto de la hidrólisis del
almidón. El reactivo de Benedict
consta de: Sulfato cúprico, Hidróxido
de sodio, Sulfato de Sodio y
Carbonato anhidro de sodio.
TUBO D TUBO E TUBO F TUBO G

1. Medir 2 ml de 3. Medir 2 ml 1. Medir 2 ml 1. Medir 2
la solución del de la de la solución ml de la
tubo B solución del del tubo B. solución del
2. Añadir 5 tubo C. 2. Añadir 1 ml tubo C.
gotas de 4. Añadir 5 de reactivo de 2. Añadir 1
lugol. gotas de Benedict, mezclar ml de reactivo
Registrar lugol. en vórtex 5 de Benedict,
observacione Registrar segundos llevar a mezclar en
s y llegar a observacion ebullición en Baño vórtex 5
conclusiones es y llegar a María 5 minutos. segundos
conclusiones Registrar llevar a
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observaciones y ebullición en
llegar a Baño María 5
conclusiones minutos.
Registrar
observaciones
y llegar a
conclusiones.
B. ENZIMA CATALASA
Triturar una pequeña cantidad (10 g aproximados de riñón de cerdo en estado

fresco) en un mortero y proceder como sigue en la tabla:
A. DETERMINACIÓN DE LA B. DESNATURALIZACIÓN DE LA
PRESENCIA DE ENZIMA ENZIMA CATALASA EN TEJIDO
CATALASA EN TEJIDO ANIMAL
ANIMAL
TUBO H TUBO I
1. Colocar aproximadamente 1. Colocar aproximadamente 5 g de riñón
5 g de riñón de cerdo fresco de cerdo fresco
2. Encender un incienso 2. Someter a cocción frente a la llama de
3. Añadir 2 ml de agua un mechero, durante este procedimiento
oxigenada al tubo cuidar que los vapores que se
4. Enseguida acercar a la desprenden, se dirijan en posición
boca del tubo el incienso, contraria a los estudiantes.
mientras se produce el 3. Dejar que el tubo enfríe brevemente.
burbujeo, cuidando que no 4. Encender un incienso
se moje el incienso. 5. Añadir al tubo 5 ml de agua
Registrar datos, oxigenada
observaciones y llegar a 6. Enseguida acercar a la boca del tubo el
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conclusiones. incienso. Registrar datos, observaciones

y llegar a conclusiones.
C. ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA CATALASA –
TEMPERATURA MÁXIMA DE CATÁLISIS
1. Rotular 2 erlenmeyers A, B
2. Pesar 10 g de riñón de cerdo, triturar y colocar en el erlenmeyer A.
3. Pesar 10 g de patata, triturar y colocar en el erlenmeyer B.
4. Cubrir con parafilm y colocar 1 termómetro con cuidado
5. Añadir a cada erlenmeyer 10 ml de agua oxigenada (el agua oxigenada
debe añadirse una vez que vaya terminando la reacción de cada
erlenmeyer, es decir no añadir a los dos al mismo tiempo)
6. Enseguida medir la temperatura inicial (tiempo 0 minutos)
7. Simultáneamente encender el cronómetro medir las variaciones de
temperatura en intervalos de 1/2 minuto (durante 3 minutos).
8. Registrar datos, observaciones, realizar gráficas (Tiempo Vs. Temperatura
máxima de catálisis enzimática) y llegar a conclusiones.
7.3 CUANTIFICACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ENZIMAS DE INTERÉS
CLÍNICO
Revisar y aplicar los métodos dispuestos en el Aula virtual. Se recoge la muestra

de sangre en tubo de tapa roja al vacío, se coagula la sangre y se centrifuga 10
min a 3000 rpm, para separar el suero a un tubo limpio y seco.
En el suero sanguíneo aplicar los métodos para cuantificación
GOT (Transaminasa Glutámica Oxal Acética)

Amilasa
Lipasa
8. REGISTRO DE DATOS DE LA PRÁCTICA (ORIGINAL ANEXO):

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9. CÁLCULOS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

9.1 PODER DE LAS ENZIMAS DIGESTIVAS
A B A B
0 minutos (inicio) 30 minutos de reacción
Color: Color: Color: Color:
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Ligeramente Ligeramente Blanquecino Blanquecino

blanquecino blanquecino
Aspecto Aspecto: Turbio Aspecto: Aspecto:

Consistencia: Ligeramente Turbio
Turbio transparente
SUSTRATO: Avena
ENZIMA: Lipasa, amilasa, proteasa
OBSERVACIONES: Después de los 30 minutos en el vaso B la avena era más
fina debido a que la capsula de pancreatina catalizó las proteínas y carbohidratos
de la avena.
INTERPRETACION DE RESULTADOS: Vaso A: Negativo Vaso B: positivo

9.2 PRUEBAS CUALITATIVAS DE LA COMPOSICIÓN Y PROPIEDADES DE LAS
ENZIMAS
A. PREPARACIÓN DE LA ENZIMA AMILASA SALIVAL Y DETERMINACIÓN DE
SUS PROPIEDADES
TUBO D TUBO E TUBO F TUBO G
Color: Morado Color: Morado Color: Verde Color: Verde
oscuro azulado azulado claro
Aspecto: Turbio Aspecto: Turbio Aspecto: Aspecto:
Ligeramente Turbio
turbio
SUSTRATO: Almidón
ENZIMA: Amilasa
OBSERVACIONES: Todos los tubos presentaron reacción al almidón
INTERPRETACION DE RESULTADOS: Tubo D, E, F, G: positivo
B. ENZIMA CATALASA
DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DESNATURALIZACIÓN DE

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DE ENZIMA CATALASA EN TEJIDO LA ENZIMA CATALASA EN

ANIMAL TEJIDO ANIMAL
TUBO H TUBO I
Enzima catalasa presente en el tejido, ya No se presentó una reacción
que presento una reacción rápida
(burbujeo)
SUSTRATO: Riñón de cerdo
ENZIMA: Catalasa
OBSERVACIONES: En el tubo H se presentaron muchas burbujas al acercar el
incienso debido a la presencia de la enzima (catalasa). En el tubo H no se
presentó ninguna reacción debido a que se sometió el riñón al calor y
desnaturalizó la enzima.
INTERPRETACION DE RESULTADOS: Tubo H: positivo Tubo I: negativo
C. ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA CATALASA – TIEMPO
Vs. TEMPERATURA MÁXIMA DE CATÁLISIS
TIEMPO (min) TEMPERATURA (° C)

A (riñón) B (patata)
0 19° 19°
0.5 22° 21°
1.0 22° 22°
1.5 22° 23°
2.0 23° 23°
2.5 23° 23°
3.0 23° 24°
SUSTRATO: Riñón de cerdo y papa

ENZIMA: Catalasa
GRÁFICAS:
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OBSERVACIONES: casi no hay cambios notables en la temperatura

INTERPRETACION DE RESULTADOS: positivo en ambos casos
9.3 CUANTIFICACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ENZIMAS DE INTERÉS
CLÍNICO: GOT, amilasa, Lipasa.
1. CUANTIFICACIÓN DE GOT
GOT a 37 °C
Longitud de Onda 340 nm
Factor para el cálculo a 37 °C 3333
BLANCO Absorbancia (A): 0.003
MUESTRA A (inicial): 0.230
A (1 minuto): 0.230
A (2 minuto): 0.231
A (3 minuto): 0.235
Valor Referencia Hasta 40 U/L
Cálculo de la Actividad de GOT
0.231 – 230 = 0.001
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0.235 – 0.231 = 0.004
0.005 / 2 = 0.0025
0.0025 * 3333 = 8.3325 U/L
Interpretación de Resultados Dentro del rango normal
2. CUANTIFICACIÓN DE LIPASA
LIPASA a 37 °C
Concentración del estándar 85,3 U/L
CALIBRADOR (PATRÓN O ESTÁNDAR) A (1 minuto): 0.372
A (2 minuto): 0.895
MUESTRA A (1 minuto): 0.349
A (2 minuto): 0.568
Valor Referencia ≤ 38 U/L
Cálculo de la Actividad de Lipasa 3.285 – 3.279 = 0.006
3.289 – 3.285 = 0.004
0.01 / 2 = 0.005
0.005 * 3591 = 17.955 U/L
Interpretación de Resultados Dentro de los valores
normales
3. CUANTIFICACIÓN DE AMILASA
AMILASA a 37 °C
Factor para el cálculo a 37 °C 3591
MUESTRA A (1 minuto): 3.279
A (2 minuto): 3.285
A (3 minuto): 3.289
Valor Referencia < 86 U/L
Cálculo de la Actividad de Amilasa ( 0,568−0.003 )−( 0.349−0.003)
( 0.895−0.003 )−( 0.372−0.003)
0.418 * 85.3 = 35.65 U/L
Interpretación de Resultados Dentro del rango normal

10. CUESTIONARIO/TAREAS/PREGUNTAS:
Tomando como referencia los recursos indicados en la fundamentación teórica y
práctica de la presente guía desarrolle el cuestionario.
1. ¿Qué es el almidón y cuál es su estructura, qué compuestos se producen en
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el catabolismo?,
El almidón, o fécula, es una macromolécula que está compuesta por dos polímeros
distintos de glucosa, la amilosa (en proporción del 25%) y la amilopectina (75%).
Es el glúcido de reserva de la mayoría de los vegetales. Por ejemplo, cuando
comemos comida, las moléculas de grasa se descomponen en moléculas más
pequeñas de ácidos grasos (catabolismo). Por su parte, se sintetizan moléculas de
grasa más grandes a partir de las pequeñas para almacenar energía (anabolismo).
(Roa, 2022)
¿Cómo actúa la amilasa salival sobre el almidón?
La enzima amilasa degrada el almidón para así formar azúcares más simples como
la glucosa, es decir, de moléculas complejas pasa a moléculas simples. Las
moléculas de glucosa atraviesan la pared intestinal y posteriormente llegan a la
sangre.
¿Y por qué es importante tanto el almidón como la amilasa salival en el
metabolismo?
Para el caso del almidón, las amilasas secretadas por el páncreas y las glándulas
salivales son las encargadas de degradar los carbohidratos. De esta forma, los
polisacáridos que se encuentran en el alimento son degradados a glúcidos más
simples con capacidad para atravesar la pared digestiva o ser absorbidos en el
intestino. La amilasa es una enzima que degrada el almidón. También recibe los
nombres de sacarasa y ptialina. ... La función de la amilasa es catalizar la digestión
de los hidratos de carbono, es decir, es una reacción de hidrólisis para digerir
el almidón o el glucógeno, y formar azúcares simples más sencillos. (¿qué efecto
tiene la amilasa salival sobre el almidón?, s/f)
2. ¿Explique el fundamento de la prueba de Lugol sobre los almidones?
El reactivo de Lugol es una disolución compuesta por yodo y yoduro potásico, es
una prueba cualitativa que sirve para determinar si en una solución de azúcares no
reductores (reacción Fehling negativa) existen polisacáridos, particularmente
elalmidón (prueba lugol positiva). El almidón es una mezcla de
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amilosa y amilopectina. Cuando el almidón se pone en contacto con una gota de

Lugol, toma un color azul violeta característico (la amilosa se colorea de azul
oscuro a negro y amilopetenida se colorea entre naranja y amarillo). El almidón
absorbe el yodo produciendo una coloración azul intensa (formación de un
complejo de Ioduro de almidón), la cual desaparece al calentar porque rompe la
estructura que se ha producido, pero vuelve aparecer al enfriar. Este
ensayo es una reacción no química, en la que se forma un compuesto de
inclusión de yodo en el interior del as hélices de la amilosa, esta inclusión es
reversible y esta acondicionada por la temperatura. (Fundamento DE Prueba DE
Benedict Y Lugol, s/f)
3. ¿Explique el fundamento de la prueba de Benedict sobre los almidones?
La reacción o prueba de Benedict es un método muy empleado para
la identificación de carbohidratos, esta reacción es específica para azúcares
reductores (lactosa, glucosa, maltosa y celobiosa). Es un método cualitativo que
emplea reactivo Benedict, que al igual que el reactivo de Fehling contiene
ióncúprico Cu2+ (otorgado por el sulfato cúprico) el cual se reduce a ion Cu1+
en medio alcalino caliente, esto por efecto del grupo aldehído del azúcar. El ion
Cu1+se oxida y precipita en forma de Cu2O, lo que proporciona la coloración
positiva de la reacción generalmente rojo-naranja o rojo ladrillo. La coloración
dependerá de la concentración de óxido de cobre y esta a su vez de la reducción
de cobre; va desde verde, amarillo, anaranjado o rojizo, dependiendo de la
coloración. El reactivo de Benedict consta de: Sulfato cúprico, hidrato de sulfato de
sodio o cloruro, carbonato anhidro de sodio, además de ello emplea NaOH para
alcalinizar el medio. (Fundamento DE Prueba DE Benedict Y Lugol, s/f)
4. ¿Cuál es la fuente de la que se extrae la enzima catalasa?
La principal fuente de donde se extrae la catalasa es de la descomposición y
fermentación de microorganismos como los hongos presentes en algunos
alimentos como vegetales y carnes, también en algunos alimentos como cebollas,
manzanas, puerros, aguacates, carne de ternero, y muchos otros. (Puig, 2019)
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5. ¿Cuál es el sustrato sobre el que actúa la enzima catalasa?

Las catalasas catalizan la dis- mutación del peróxido de hidrógeno en agua y
dioxígeno evitando así que se forme el radical hidroxilo y el oxí- geno singulete,
especies de oxígeno que son muy reactivas. En el hombre, la catalasa protege la
hemoglobina del peróxido de hidrógeno que se genera en los eritrocitos. (EZE,
2018)
Mediante reacción indique la acción de la catalasa sobre el sustrato peróxido

de hidrógeno H2O2
2 H2O2 + CATALASA → 2 H2O + O2
La importancia de esta función consiste en que el peróxido de hidrógeno es una
sustancia tóxica para las células. La catalasa produce agua y oxígeno, dos
sustancias que no dañan al organismo.
Al realizar la descomposición, la catalasa neutraliza la acción tóxica del peróxido de
hidrógeno y equilibra su producción en el organismo.
La función de la catalasa es importante para la actividad de los riñones y el hígado.
En estos órganos existen numerosos peroxisomas responsables de la
desintoxicación del organismo. En el hígado, los peroxisomas y la acción de la
catalasa ayudan en la producción de sales biliares y en la neutralización de
sustancias tóxicas. (EZE, 2018)
6. ¿Cuál es la importancia biomédica de la enzima catalasa en el organismo?
La enzima catalasa es un catalizador de origen proteico. Es la encargada
de eliminar el peróxido de hidrógeno (H2O2), compuesto altamente tóxico, del
organismo. Por ende, esta enzima es de suma importancia para los seres vivos y
se encuentra en todas las células eucariotas, ya sean vegetales o animales,
contenidas en los peroxisomas. (Biología. La enzima catalasa es un catalizador de
origen proteico, 2017)
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7. Mediante un organizador gráfico indique el fundamento de los métodos de

cuantificación de las siguientes enzimas y su importancia biomédica:
GOT (Transaminasa Glutámica Oxal Acética)
GPT (Transaminasa Glutámica Pirúvica)
Amilasa
Lipasa
Creatincinasa,
Fosfatasa Acida
Fosfatasa Alcalina
Lactato deshidrogenasa
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11. GRÁFICOS
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12. OBSERVACIONES:
Después de haber realizado la práctica sobre los enzimas se logró obtener
conocimientos necesarios tanto del manejo de sustancias en relación con las enzimas,
en aprender acerca de la actividad enzimática en diferentes condiciones, como la
variación de la concentración de enzima o sustrato, la variación de la temperatura. La
práctica permite entender cómo las condiciones ambientales afectan la velocidad de la
reacción enzimática y cómo la estructura de la enzima está relacionada con su
función. Esto nos ayudó a comprender que existen sustancias que no reaccionan con
las enzimas, así como comprender que existen sustancias que si reaccionan con la
misma. Para poder obtener los resultados de las muestras se necesitan diferentes
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técnicas que nos permite diferenciar cual es la reacción que se tiene, estos pueden ser
negativo o positivo.
13. CONCLUSIONES:
 Las enzimas son catalizadores que pueden acelerar las reacciones químicas, una
enzima proteolítica acelera la degradación, con el fin de gastar menos energía y
generar subproductos.
 Las enzimas se ven afectadas por los cambios que se producen en su entorno,
presencia de disolventes orgánicos, variación del pH o de la temperatura, ya que
estos pueden alterar su estructura o incluso provocar su desnaturalización
 La papa como el hígado contienen la enzima (Catalasa) la cual es un poderoso

antioxidante, es decir, que impide la oxidación de las sustancias químicas. Si
agregamos agua oxigenada o Peróxido de Oxigeno (H2O2) a una de estos crudo,
la catalasa separará el Oxigeno del Peróxido de Oxígeno, liberando una gran
cantidad de gas (O2), esto es lo que produce el burbujeo que observamos en
nuestro experimento, por el contrario cuando esta cocinado (sancochado) no se
podría liberar el oxígeno porque esta se desnaturalizó en la cocción.
 Al terminar la práctica y analizar nuestros resultados concluimos que la

temperatura es sin duda muy importante para el buen funcionamiento de
las enzimas, cada una tiene una temperatura óptima para poder catalizar la
reacción de forma adecuada. La catalasa es de suma importancia en
los tejidos ya que el peróxido de hidrogeno es una molécula toxica
producto del metabolismo celular, y sin la acción de esta enzima podría realizar
irregularidades en las actividades celulares.
14. SUGERENCIAS:
 Los alumnos que ingresen al laboratorio deben tener conocimientos previos de los
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temas que se abordaran durante la práctica.
 Debe comprender la recolección de muestras, el equipo de recolección de objetos

punzocortantes, el uso de equipos de laboratorio y el uso adecuado de las
características de bioseguridad para evitar inconvenientes.
15. TERMINOLOGÍA:
- Lipasa:
La lipasa es una enzima encargada de hidrolizar los triglicéridos a ácidos grasos de

cadena larga presentes en estado de emulsión en la luz intestinal. (Rivera, 2005)
- Sacarasa:
En el metabolismo de las levaduras la sacarosa se convierte en glucosa y fructosa.

Esta transformación ocurre por medio de la enzima sacarasa o invertasa.Como la
sacarosa no es un azúcar reductor, podemos detectar la actividad de la sacarasa
por su transformación en azúcares reductores. (Rivera, 2005)
- Amilasa salival:
Es una enzima que hidroliza el almidón dando glucosa. Podemos detectar su acción
por la presencia de azúcares reductores o por la negatividad de la reacción de
lugol. (Rivera, 2005)
• Inhibición irreversible
En la forma irreversible se producen modificaciones covalentes de la enzima que no

pueden eliminarse fácilmente. En este capítulo solo se trata de los primeros, los
reversibles. (s/f)
• Inhibición reversible
En la forma reversible el inhibidor forma con la enzima un complejo enzima-inhibidor

(EI) unido por fuerzas no covalentes y que por lo tanto puede disociarse. (s/f).
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16. BIBLIOGRAFÍA:
1. Roa, Y. (2022, April 30). Donde se localiza el almidon cuales son sus

componentes principales. Filosofía. https://filosofia.co/literatura/donde-se-
localiza-el-almidon-cuales-son-sus-componentes-principales-23137/
2. ¿qué efecto tiene la amilasa salival sobre el almidón? (n.d.). Org.mx. Retrieved

January 27, 2023, from https://aleph.org.mx/que-efecto-tiene-la-amilasa-salival-
sobre-el-almidon
3. Fundamento DE Prueba DE Benedict Y Lugol. (n.d.). Idoc.Pub. Retrieved

January 27, 2023, from https://idoc.pub/documents/fundamento-de-prueba-de-
benedict-y-lugol-qn8590r6v8n1
4. Puig, R. P. (2019, July 4). Catalasa: características, estructura, funciones,

patologías. Lifeder. https://www.lifeder.com/catalasa/
5. eze. (2018, November 3). La catalasa es una enzima producida por casi todos
los organismos vivos. Leer más. Funcion.info. https://www.funcion.info/catalasa/
6. Biología. La enzima catalasa es un catalizador de origen proteico. (2017, August

27). Clubensayos.com. https://www.clubensayos.com/Ciencia/Biolog%C3%ADa-
La-enzima-catalasa-es-un-catalizador-de/4107888.html
7. Rivera J. M., Pertierra A. Fundamentos de Bioquímica estructural. Alfaomega S.

A. México. 2005. Pág.: 193-198.
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO LAB E201- BLOQUE E

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

UNIDAD SÍLABO No. 4 ENZIMAS

3. MATERIALES – REACTIVOS – EQUIPOS:

 1 pinza metálica para tubo de ensayo

 1 frasco con detergente (para lavado de materiales)

acelerando los procesos metabólicos (catálisis) que ocurren en niveles intra ó

 Enzimas séricas hepáticas

6. MÉTODOS: Cualitativos y Cuantitativos (enzimáticos, colorimétricos y volumétricos)

contenida en el tubo A, mezclar en vórtex 3 segundos y someter a

Realizar las siguientes pruebas indicadas en la tabla:

TUBO D TUBO E TUBO F TUBO G

Triturar una pequeña cantidad (10 g aproximados de riñón de cerdo en estado

conclusiones. incienso. Registrar datos, observaciones

Revisar y aplicar los métodos dispuestos en el Aula virtual. Se recoge la muestra

En el suero sanguíneo aplicar los métodos para cuantificación

GOT (Transaminasa Glutámica Oxal Acética)

8. REGISTRO DE DATOS DE LA PRÁCTICA (ORIGINAL ANEXO):

9. CÁLCULOS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

Ligeramente Ligeramente Blanquecino Blanquecino

Aspecto Aspecto: Turbio Aspecto: Aspecto:

INTERPRETACION DE RESULTADOS: Vaso A: Negativo Vaso B: positivo

DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DESNATURALIZACIÓN DE

DE ENZIMA CATALASA EN TEJIDO LA ENZIMA CATALASA EN

TIEMPO (min) TEMPERATURA (° C)

SUSTRATO: Riñón de cerdo y papa

OBSERVACIONES: casi no hay cambios notables en la temperatura

0.235 – 0.231 = 0.004

Interpretación de Resultados Dentro del rango normal

amilosa y amilopectina. Cuando el almidón se pone en contacto con una gota de

5. ¿Cuál es el sustrato sobre el que actúa la enzima catalasa?

Mediante reacción indique la acción de la catalasa sobre el sustrato peróxido

7. Mediante un organizador gráfico indique el fundamento de los métodos de

 La papa como el hígado contienen la enzima (Catalasa) la cual es un poderoso

 Al terminar la práctica y analizar nuestros resultados concluimos que la

temas que se abordaran durante la práctica.

 Debe comprender la recolección de muestras, el equipo de recolección de objetos

La lipasa es una enzima encargada de hidrolizar los triglicéridos a ácidos grasos de

En el metabolismo de las levaduras la sacarosa se convierte en glucosa y fructosa.

En la forma irreversible se producen modificaciones covalentes de la enzima que no

En la forma reversible el inhibidor forma con la enzima un complejo enzima-inhibidor

1. Roa, Y. (2022, April 30). Donde se localiza el almidon cuales son sus

2. ¿qué efecto tiene la amilasa salival sobre el almidón? (n.d.). Org.mx. Retrieved

3. Fundamento DE Prueba DE Benedict Y Lugol. (n.d.). Idoc.Pub. Retrieved

4. Puig, R. P. (2019, July 4). Catalasa: características, estructura, funciones,

6. Biología. La enzima catalasa es un catalizador de origen proteico. (2017, August

7. Rivera J. M., Pertierra A. Fundamentos de Bioquímica estructural. Alfaomega S.

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