06 Criopreservación
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Contenidos básicos:
UD 6. CRIOPRESERVACIÓN
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MÓDULO 1: CULTIVOS CELULARES
UD 6 Criopreservación
6.1. Criopreservación
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MÓDULO 1: CULTIVOS CELULARES
6.1.2. Crioprotectores
Los crioprotectores son substancias hidrosolubles que protegen a la
célula durante los procesos de congelación y descongelación. Previenen la
lisis celular porque minimizan el desequilibrio osmótico y la formación de
cristales de hielo. Cuando estos penetran en la célula, aumenta la
concentración de solutos, reduciendo la cantidad de hielo intracelular
que se forma. Por otro lado, el crioprotector también reduce el punto de
congelación y eso permite que la velocidad de enfriamiento sea menor
(retrasa la congelación) y los cristales que se forman son más pequeños.
Hay dos tipos de crioprotectores:
a) Permeables - de bajo peso molecular, atraviesan la membrana celular
y penetran dentro de la célula. Son de este tipo los usados con más
frecuencia:
- DMSO o dimetil-sulfóxido.
- Glicerol.
b) No permeables - de alto peso molecular, provocan una rápida
deshidratación de la célula. Se usan siempre en combinación con otros
permeables.
- Sacarosa.
- Glucosa.
- Dextrosa y dextrano.
- Polietilenglicol (PEG).
- Polivinilpirrolidona (PVP).
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MÓDULO 1: CULTIVOS CELULARES
Cajas de
Crioviales Criotubos Ampolla congelación
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Congelador en rampa
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MÓDULO 1: CULTIVOS CELULARES
una condición de control de calidad para ver en qué estado están dichas
células.
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MÓDULO 1: CULTIVOS CELULARES
Por último hay que tener en cuenta las medidas de seguridad que
conllevan el manejo del nitrógeno líquido y tomar las medidas
adecuadas.
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MÓDULO 1: CULTIVOS CELULARES
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MÓDULO 1: CULTIVOS CELULARES
Los registros pueden ser tipo tabla Excel con unos datos mínimos
necesarios (fecha de congelación, pase, código, posición de almacenamiento,
etc), o plantillas de papel en las cajas de congelación, aunque lo ideal es utilizar
sistemas informatizados como por ejemplo: nSIBAI, BioeBank, noraybio, etc.
para la gestión de biobancos con alto nivel de seguridad asegurando la
privacidad y protección de los datos personales de donantes, su registro y
trazabilidad.
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