Bacteriológica
Bacteriológica
Bacteriológica
Autores:
Tutor/Asesor
Msc. Felipe Agustín Torres Meneses
PEPFAR: fondo de emergencia del presidente de los estados unidos ante el VIH en el
mundo.
Ha sido para mí un enorme placer haber podido ser parte del presente estudio, por lo
que agradezco a sus autores: Br(a) Oscarlett Ampié, Br Yader Jarquín y Godofredo
Sobalvarro. Y los felicito por haber realizado un importante trabajo monográfico en pro
de su formación profesional.
Atentamente
A Dios padre todopoderoso por habernos guiado durante estos 5 años de carrera
universitaria y por demostrarnos que nos acompaña en cada uno de nuestros
pasos, por habernos brindado la sabiduría, la paciencia y por sobre todas las
cosas por no dejarnos caer aun en los momentos difíciles.
A nuestros padres y madres por dar todo su esfuerzo, por haber estado ahí para
nosotros y ofrecernos su apoyo incondicional, por toda la dedicación y la fe
depositada en nosotros, por sabernos guiar con las palabras de aliento y ser
nuestro eje fundamental en la formación como profesionales. Por ser amigos,
consejeros, confidente durante todo este periodo de universidad.
A nuestro maestro, amigo, Director y líder Msc.Juan Francisco Rocha López por
habernos demostrado siempre su apoyo y su amistad incondicional, por habernos
acompañado durante toda la carrera y estar pendiente de la situación que se nos
presentara y apoyarnos en el desarrollo como profesionales.
A Msc. Vilma Rosa Pérez por su ayuda incondicional, sin importar que no fuera
maestra de nuestro departamento y apoyándonos de manera integral como
profesional del instituto politécnico de la salud.
Los paneles de Proficiencia utilizando muestra seca en tubo como alternativa para el
control de calidad fueron diseñados en el CDC por XhianJiangZhou. El método
después de haberlo probado decidieron implementarlo en todos los países que hacen
pruebas rápidas de VIH, es un método costo – beneficio viable, fácil de preparar y de
realizar, con una sencilla distribución a zonas geográficas de difícil acceso, sin la
necesidad de utilizar cadena de frio, y sin riesgo de derrames biológicos.
Durante muchos años la infección por VIH se ha tratado en nuestra sociedad como un
hecho propio de grupos marginales, considerando que las personas “de buena vida” no
podían contraer la infección y asociando el concepto de VIH/SIDA a multitud de
prejuicios que, todavía hoy, persisten y hacen que el padecimiento de la enfermedad sea
considerado un tema tabú.
La infección por VIH se ha configurado como una pandemia a lo largo de las 2 últimas
décadas del siglo XX y los primeros años de este nuevo siglo. A finales de 1998 había
33,4 millones de personas infectadas por el VIH y 13,9 millones de muertes registradas
por su causa. En 2014 había 36.9 millones de personas infectadas por el VIH 1/2, A
finales de ese mismo año 2 millones de personas contrajeron el HIV y 1.2 millones de
personas fallecieron a causa del VIH/SIDA. A mediados de 2015 había 15,8 millones de
personas infectadas por el VIH que recibían terapia antirretrovírica en todo el mundo.
La infección por el VIH se suele diagnosticar mediante análisis de sangre, aunque puede
hacerse la prueba en muestras de orina y saliva.En los que se detecta la presencia de
anticuerpos contra el virus en caso de estar contagiada la persona. En general los
resultados de estas pruebas están disponibles el mismo día de su realización, hecho
esencial para el diagnóstico, el tratamiento y la atención precoz.
1
Las pruebas serológicas determinan la presencia o ausencia de anticuerpos contra el
VIH 1 y 2.Estas pruebas deben realizarse acorde con un algoritmo diagnostico validado
el cual debe cumplirse adecuadamente para lograr establecer el estatus de
seropositividad o negatividad para el VIH.
En los últimos años, los test rápidos (TR) para VIH-1/2 adquirieron gran importancia en
el diagnóstico del VIH debido a su sensibilidad y especificidad, bajo costo, fácil de
realizar, pueden preservarse hasta 30 °C y lo más importante es que para procesar las
pruebas rápidas no se requiere de una estructura de laboratorio.Esto permite llevarlas a
sitios de difícil acceso y poder ofrecer un diagnostico oportuno lo que permitirá
incorporar con mayor prontitud a los pacientes afectados.
A pesar de los buenos resultados que se obtienen con las pruebas rápidas para el
diagnostico de VIH es de imprescindible cumplimiento y aplicación el control externo
de la calidad de dichos test y del personal que las procesa. Para que la población tenga
resultados confiables. Por lo antes mencionado es que se están implementando los
paneles de proficiencia utilizando muestra seca en tubo, orientado por el CDC de
Atlanta.
2
ANTECEDENTES
Las pruebas diagnósticas para VIH cumplen una función primordial en la detección de
la infección por el virus, así como también en la ampliación y el acceso a una mejor
calidad en la atención y el tratamiento antirretroviral.
3
Estos son algunos métodos que aportaron al aislamiento, detección y control del VIH
Jiang Yan, China en el año 2009 evaluaron 8273 Laboratorios locales, 254
laboratorios de confirmación, 35 laboratorios centrales de confirmación y 1
laboratorio Nacional de Referencia, el cual evaluaron los métodos de pruebas
rápidas.(Jiang, 2008)
Liang Xi, Yang Li en Octubre de 2011 Evaluaron una dosis de paneles o Cassete
de Dispositivos intravenoso de seis compuestos en ratas seguido de muestra de
sangre hemolizada (HBS) y el muestreo DBS se evaluó en este estudio, este
estudio demostró la aplicabilidad o viabilidad sobre el muestreo de cribado en
Muestras Secas en Tubo.
4
En Nicaragua hasta antes del año 2012 no se habían hecho estudios en donde se
observara con que calidad el personal de laboratorios maneja el diagnostico
mediantes las pruebas rápidas, es por eso que este documento tratara de explicar
acerca de la calidad con que se procesan las pruebas rápidas de VIH en las
unidades de salud del SILAIS-Managua. Mediante la implementación y
distribución de paneles proficiencia utilizando MST.
5
JUSTIFICACION
Lo que se pretende alcanzar con esta monografía es dejar un registro como precedente
de realización de control externo de la calidad a nivel del sector salud para las pruebas
rápidas de VIH, establecer que el control de calidad sea un hábito de trabajo entre los
analistas de todas las áreas de la salud. De igual maneradejar un método establecido
para el control de calidad a nivel Nacional.
6
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
En el país esta forma de realizar el control de calidad conlleva altos costos de insumos,
sobrecarga de trabajo y personal, es por esto que surgen los paneles de proficiencia con
muestra seca en tubo como un método a implementar el control de calidad a nivel de
cada una de las unidades de salud.
Los paneles de Proficiencia con muestra seca en tubo como alternativa para el control
de calidad en el país, es un método económico, fácil de realizar, con una sencilla
distribución a zonas geográficas de difícil acceso en nuestro territorio, sin la necesidad
de utilizar cadena de frio, a muy bajo costo y sin riesgo a derrame biológicos.
¿Cuál será la utilidad de los paneles de proficiencia utilizando muestra seca en tubo (MST) en
las pruebas rápidas de VIH de los centros de salud y hospitales del SILAIS Managua en el
periodo octubre 2013 a enero 2016?
HIPOTESIS
7
OBJETIVOS
Objetivo General
Objetivos Específicos
8
Marco Teórico
VIH
Generalidades
Los virus son los agentes infecciosos más pequeños (con tamaños que van de casi 20
nm a 300 nm de diámetro) y contienen sólo un tipo de ácido nucleico (RNA o DNA) en
su genoma. El ácido nucleico está rodeado por una cubierta proteínica, que puede estar
rodeada por una membrana que contiene lípidos. La totalidad de la unidad infecciosa se
denomina virión.
Los virus son inertes en el entorno extracelular; se replican sólo en células vivas donde
actúan como parásitos al nivel genético. El ácido nucleico viral contiene la información
necesaria para la programación de la célula hospedadora infectada para sintetizar
macromoléculas virales específicas necesarias para la producción de la progenie viral.
Durante este ciclo de replicación se producen numerosas copias de ácidos nucleicos
virales y cubiertas proteínicas. Estas últimas se ensamblan para formar una cápside, que
rodea y estabiliza el ácido nucleico viral y lo protege del entorno extracelular y facilita
la unión y penetración del virus hasta que hay contacto con una nueva célula
susceptible.
La infección viral puede tener poco o ningún efecto en la célula hospedadora o puede
causar daño o muerte celulares. El universo de los virus tiene una gran diversidad;
varían en gran medida en cuanto a estructura, organización y expresión genómicas, así
como en las estrategias de replicación y transmisión. El rango de hospedador para un
virus dado puede ser muy amplio o extremadamente limitado. Se sabe que los virus
infectan microorganismos unicelulares como micoplasmas, bacterias y algas, así como a
9
plantas y animales superiores; Gran parte de la información con respecto a las
relaciones entre virus-hospedador se han obtenido de estudios realizados en
bacteriófagos, los virus que atacan a las bacterias.
Estructura
Métodos diagnósticos:
10
Los métodos de diagnóstico del VIH se pueden clasificar en métodos directos e
indirectos. Los métodos indirectos reconocen principalmente anticuerpos específicos
producidos por el sistema inmune como respuesta a la presencia de virus o bien detectan
la respuesta inmune celular frente al VIH. Los métodos directos permiten detectar el
propio virus o alguno de los componentes, como proteínas o ácidos nucléicos.
Directos
Indirectos
11
Definición de Paneles de Proficiencia
• CCE de las pruebas rápidas de VIH garantizan que los resultados ofrecidos al paciente
son correctos.
Características.
Paneles de competencia.
12
Este mecanismo de evaluación no había sido utilizado por los programas de VIH en la
región, pero Un Grupo de expertos convocados por la OMS a finales de 2013, realizo
capacitaciones con el fin de que la certificación y la evaluación de competencia tuviera
una reorientación en el abordaje propuesto en el marco de “Desarrollo de Paneles de
Proficiencia para la evaluación de control de calidad Externo”, al recalcar la
importancia de este componente dentro del sistema y al considerar temas como el
establecimiento de criterios para el procesamiento de pruebas rápidas para el
diagnóstico de VIH para los laboratorios pertenecientes a la red y del establecimiento de
paneles de evaluación, así como de criterios de calificación y certificación.
Paneles de Proficiencia
El Control de Calidad Externo con los paneles de Proficiencia permite comparar los resultados
del laboratorio centralizado de referencia con los resultados de otros laboratorios a nivel
nacional. A estos se les denomina Test de Proficiencia y que están a cargo de organismos
internacionales de reconocido prestigio técnico y profesional para ser establecido y preparados
por los encargados de los laboratorios de referencia del país.
Solicitud de muestras por parte del CNDR a la cruz roja, dichas muestra ya ha sido
probada por el método de quimioluminiscencia para determinar que esta no contenga
ningún otro agente patógeno.
13
c.Fase 3, esta se realiza una vez que la muestra se ha secado en el vial y se
reconstituye para ser probada nuevamente y constatar que la muestra no ha perdido sus
propiedades
Una vez caracterizadas las muestras es agregado el Green Dye a una concentración final
del 0.1% (1:10). A continuación se pipeteo 20 ul de muestras en cada uno de los viales
ya codificados tanto positivos y negativos, todos los viales se dejan en una cabina de
flujo laminar sin ser sellados durante toda la noche,
Etiquetado de cada vial de muestra, se utiliza las siglas de VIH seguido del número de
la ronda y el año, esto se realiza al siguiente día de agregada la muestra; se eligió
intercalar 3 positivos y 3 negativos para cada panel.
Documentación
Una vez realizado el panel tiene vigencia de un mes para su procesamiento, al entregar
cada panel los laboratorios tienen un máximo de cinco días para procesarlo, un tiempo
máximo de tres días para enviar los resultados y un periodo de quince días para que el
CNDR entregue la retroalimentación a cada unidad.
Muestra seca en tubo: un método simple y rentable para las preparaciones de pruebas de
competencia VIH y materiales de control de calidad para su uso en entornos con
recursos limitados.
14
Aseguramiento de la calidad externa es esencial para asegurar la exactitud de los
componentes de las pruebas de diagnóstico .las llaves de control de calidad externo son:
(a) las pruebas de competencia o PT (b) repetir periódicamente las pruebas de un
subconjunto de muestras en un laboratorio calificado y (c) las visitas al sitio / auditorías
por expertos externos. Los programas de pruebas de competencia (PT) han demostrado
ser muy eficaz en la mejora de la calidad de las pruebas para diversas enfermedades y
analitos; sin embargo, son bien limitados en la cobertura o que carecen por completo en
la mayoría de los países en desarrollo donde la carga de las enfermedades es alta y la
infraestructura de laboratorio es limitada.
Varios factores han contribuido a los programas EQA limitados en el desarrollo de los
países .la repetición delos exámenes es el principal medio de control de la calidad de
las pruebas serológicas del VIH, el enfoque es costoso, consume tiempo y
logísticamente difícil en entornos descentralizados. Visitas a miles de sitios de prueba
requieren un gran número de personal capacitado y recursos, así como el seguimiento
posterior para asegurar Se han tomado las medidas correctivas. Los programas de
pruebas de competencia utilizando muestras de suero o plasma líquido se limitan a los
laboratorios o en los sitios que son de fácil acceso y no incluyen miles de pruebas
rápidas en el sitio .muchas más, muestras de líquido requieren una cadena de frío, que
es caro y difícil de mantener en todo el país.
15
Después de la optimización, el estudio comparativo de DTS y muestras líquidas se
realizó mediante un panel diverso de muestras (N = 303.135 VIH positivos y 168
negativos VIH) .Estas muestras se obtuvieron de Sudáfrica, Camerún, Costa de Marfil,
Kenia y Estados Unidos. Todas las muestras se caracterizaron por el inmunoensayo
enzimático aprobado por la Administración de Alimentos y Fármacos de Estados
Unidos (EIA) (Genetic Systems VIH-1-2-O EIA; Bio-Rad Laboratories, Hércules, CA,
EE.UU.). Repetidamente ejemplares EIA-reactivos fueron aún más confirmada para el
estado de VIH-1 por el VIH-1 por transferencia.
16
Para los estudios de estabilidad, múltiples conjuntos de muestras secas en tubo se
prepararon utilizando un "panel de 10 miembros" (4 VIH positivos y VIH negativos 6) y
se almacenó a 4◦C, 25◦C, 37◦, 45◦C. para evaluar la estabilidad tubos de muestra seca
en tubo, un conjunto de cada temperatura se rehidrata en las semanas 1, 2, 3 y 4, y la
prueba de anticuerpos contra el VIH.
PBS Tween fue preparado, filtrado con filtro de 2 um y alicuotado en 1.5 ml de buffer
para la rehidratación únicamente de la prueba de la muestra seca en tubo. Para su
posterior uso, la muestra seca en tubo se rehidrato con 200 ul o 7 gotas de PBS-Tween
bien sea con una pipeta de precisión o bien puede ser con una pipeta plástica de una
graduación conocida para dispensar. Siete gotas ascendieron a unos 200 ul con esta
pipeta. Esto dio lugar a una dilución 1:10 de la muestra original, pero fue tratado como
sin diluir con el propósito de realizar más pruebas. Las muestras se mezclaron
golpeando ligeramente, sin agitación, para imitar las condiciones prácticos encontrados
en el asesoramiento y los sitios de ensayo, y se dejaron durante la noche a temperatura
ambiente para permitir la solubilización de suero o plasma se seca en el tampón de
Pruebas de Proficiencia. Al día siguiente, las muestras se mezclaron de nuevo
golpeando ligeramente las placas y se utiliza para realizar pruebas rápidas o EIA (Fig.
1). Determine HIV-1/2 (Inverness Medical, Waltham, MA, EE.UU.), OraQuick
ADVANCE HIV-1/2 (OraSure Technologies, de Bethlehem, PA, EE.UU.), Unigold, y
Capillus (ambos de Trinity Biotech, Dublín, Irlanda), Bioline (Standard Diagnostics,
Corea) y GS VIH 1-2-O EIA (GS EIA, Bio-Rad Laboratories, Hércules, CA, EE.UU.)
se realizaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
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Muestras de tubos secos basados en paneles de pruebas de eficiencia y
pilotos
18
Control de calidad
Técnicas operativas y actividades necesarias para cumplir con los requisitos de calidad y
concierne al monitoreo diario de los procedimientos realizados en el laboratorio.
Basados en estos datos y siguiendo el algoritmo diagnóstico para VIH en el país se hace
necesario realizar, verificar y tener siempre a disposición muestras controles que sirvan
para validar tanto las pruebas verificadas y aprobadas en el algoritmo diagnostico así
como para la introducción de un sistema de control de calidad como el caso de la
muestra seca en tubo.
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El control de calidad generalmente incluye la realización de pruebas usando
especímenes ya conocidos, estos últimos deben analizarse con los mismos reactivos y
equipos que se utilizan con las muestras que se estén analizando en el momento, es decir
que a las muestras de control de calidad de las pruebas tanto A1 como A2, ELISA se les
dará el mismo trato que se le da a una muestra de un paciente X.
En el año 2013 el licenciado Felipe torres Meneses lleva cabo un plan piloto con quince
unidades de salud dentro del silais Managua con el fin de explorar la situación del
control de calidad a las pruebas rápidas que en el país circulan, es ahí donde por primera
vez se habla de MST o muestra seca en tubo para la realización de un control de calidad
a la red de laboratorios del SILAIS-Managua.
Clasificación
Técnicas y actividades operacionales que son utilizadas dentro del laboratorio para
cumplir los requerimientos de calidad del servicio y sus mediciones.
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Consiste en hacer mediciones repetitivas de un mismo material de control de cada uno
de los lotes de trabajo y resumir los datos obtenidos para efectuarles un tratamiento
estadístico que permita verificar el funcionamiento adecuado del laboratorio.
ISO 15189:2012
Los servicios de Laboratorios Clínicos son esenciales para el cuidado del paciente y por
lo tanto deben estar disponibles para satisfacer las necesidades, tanto de los pacientes
como del personal clínico responsable del cuidado de los mismos.
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Estos servicios incluyen la estructura de las solicitudes de exámenes, identificación y
preparación del paciente, toma de muestras, transporte, almacenamiento, procesamiento
y examen de muestras clínicas, junto con la posterior interpretación, además de las
consideraciones de seguridad y ética en el trabajo del Laboratorio Clínico, entre otros.
Esta norma esta propuesta para que la utilicen los Laboratorios Clínicos para desarrollar
su Sistema de Gestión de la Calidad y evaluar su competencia. También puede ser
utilizada para confirmar o reconocer la competencia de los Laboratorios Clínicos por
parte de los clientes, autoridades reguladoras y organismos de acreditación.
Es importante aclarar que no está destinada para ser utilizada con propósitos de
certificación, sin embargo, el cumplimiento de los requisitos de esta norma
internacional por parte de un Laboratorio Clínico, significa que cumple tanto con los
requisitos de competencia técnica, como con los requisitos del sistema de gestión
necesarios para que puedan entregar en forma consistente resultados técnicamente
válidos.
22
“Conducta ética” con la relevancia que pasa a formar parte de una aplicabilidad
en vez de un anexo, se añade también el “Compromiso de la dirección”.
6. Fortalecimiento de la “Evaluación” que incluye:
Normativa 091
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• Si el resultado de la prueba rápida inicial fuera Reactor, se realiza inmediatamente
una segunda prueba rápida (A2) de diferente marca o principio metodológico.
En el CNDR se realizará control de calidad externo a todas las muestras referidas por la
red de laboratorios para el diagnóstico del VIH, empresas médicas previsionales,
ONG´s y laboratorios privados utilizando una combinación de pruebas serológicas,
ELISA 4ta Generación y Western Blot.
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Nota: Los centros que realizan la prueba de ELISA deberán ser autorizados por el
CNDR-MINSA para cumplir la función de laboratorio de referencia departamental para
el diagnóstico de VIH.
Es necesario realizar la toma de muestra venosa o capilar cumpliendo con las buenas
prácticas de laboratorio para garantizar la correcta atención y diagnóstico de las
personas que soliciten el servicio.
La calidad de los resultados de los análisis del laboratorio está íntimamente relacionada
con la calidad de la toma, manejo y envió de la muestra hasta llegar a las instalaciones
del laboratorio donde serán analizadas.
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Procedimientos Analíticos
No existe ninguna manifestación clínica que sea característica de la infección VIH o del
sida y aunque la presencia de alguna de ellas pueda sugerir en un contexto determinado
la presencia de la infección, no es posible establecer un diagnóstico clínico de la
enfermedad por lo que éste solo se puede establecer de un modo definitivo por técnicas
de laboratorio. Por medio de ellas es posible detectar al propio virus o algunos de sus
componentes.
El uso de esta técnica permite detectar Ag p24 y/o Ac anti-VIH 1/2 en suero, plasma y
sangre total (muestra capilar) del paciente mediante inmunoensayo rápido basado en un
principio de reacción tipo sándwich Inmunocromatográfica.
El uso de esta técnica permite detectar Ac anti-VIH 1/2 en suero, plasma y sangre total
(muestra capilar) del paciente mediante inmunoensayo rápido basado en un principio de
reacción tipo sándwich Inmunocromatográfica.
26
El uso de esta técnica permite detectar Ag p24 y Ac anti-VIH 1/2 en suero y plasma del
paciente mediante inmunoensayo de tipo ELISA de 4ta generación de principio de
reacción tipo sándwich.
El uso de esta técnica permite detectar Ac anti-VIH 1/2 en suero y plasma del paciente
mediante Inmunoensayo cualitativo.
Esta técnica realizada por el principio de citometría de flujo, permite conocer el número
absoluto de sub poblaciones de linfocitos T por ml de sangre periférica. Es importante
para el estudio del estado del sistema inmunológico de pacientes infectados con el virus
del VIH.
Desde el nacimiento y aproximadamente hasta los 18 meses de edad los hijos de madres
seropositivas al VIH pueden presentar pruebas serológicas (detección de Ac) positivas,
27
lo cual no es necesariamente indicativo de infección ya que dichos Ac pueden ser
inmunoglobulinas G de origen materno que cruzaron la placenta durante el embarazo.
La amplificación del ADN proviral del VIH-1, constituye un método preferencial para
el diagnóstico perinatal, es un ensayo cualitativo in vitro para la detección del ADN
proviral de VIH-1 en sangre total y/o muestra seca.
Estos paneles que usan muestra seca en tubo son de muy bajo costo, fáciles de realizar,
se pueden trabajar con las condiciones mínimas presentes dentro de un laboratorio y
además sirven como ayuda constante en el diagnóstico.
Dichos paneles pueden ser trasladados sin riesgo a derrames biológicos a las zonas más
alejadas del país y sin necesidad de cadena frio pues no pierden su propiedad.
Consiste en la entrega dos veces al año de paneles de Proficiencia con el fin de evaluar
las competencias del personal de salud encargado de la realización de las pruebas
rápidas de VIH y de aportar un mayor seguimiento a los lineamientos de la calidad
normados y estandarizados a nivel internacional y nacional por el centro nacional de
diagnóstico y referencia de MINSA; por lo tanto se adoptan medidas correctivas en base
a los resultados obtenidos.
Se establece un modo de trabajo disciplinado y ordenado para los analistas que son
parte de la red de MINSA. Gestiona y organiza que los insumos concernientes a las
pruebas rápidas de VIH estén en tiempo y forma en cada una de las unidades de salud.
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DISEÑO METODOLOGICO
Tipo de estudio:
Universo y muestra.
Tipo de muestreo
Criterios de Inclusión
Que los laboratorios de las unidades de salud a las que se les aplicara el control
de calidad sean del SILAIS-Managua.
Que los participantes hayan recibido la capacitación.
Que en los centros de salud y hospitalesestén realizando las pruebas de VIH.
Criterios de exclusión
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Método e instrumento de recolección
1. Método
Consiste en tomar una alícuota de suero ya conocida sea esta positiva o negativa,
seguidamente debe ser codificada en sus respectivos viales para muestra,colocarles un
colorante de pastelería (Green Dye) y dejar secar durante toda la noche,para luego poder
ser procesada esto con una fecha límite devencimiento por parte del personal de salud
capacitado para realizar pruebas rápidas de VIH, se reconstituye con una solución buffer
que contiene Tween y de esta manera la muestra contenida en el panel está indicada
para ser procesadacomo espécimen de paciente, aplicando todas las medidas de
bioseguridad y dando seguimiento al algoritmo diagnóstico del país.
Este se realizó mediante fichas de evaluación que consistía en analizar el proceso del
llenado de documentación, asimismola manera en que se cuantifica el llenado de la
documentación es a través de los acápites plasmados con un puntaje determinado en la
hoja de formulario entregada a cada analista, que posteriormente será revisada mediante
una base de datos para conocer la calidad del diagnóstico.
Procedimientos
1. Autorización
30
Se realizó un perfil de monografíacon una breve explicación del tema en estudio a fin de
obtener la aprobación por parte de las autoridades del Instituto Politécnico de la Salud y
de esta manera proseguir con el estudio.
Posterior, el planteamiento y aceptación por parte del responsable del área de VIH del
CNDR.
2. Área de estudio
Hospitales primarios y de referencia nacional así como centros de salud del SILAIS-
Managua a los cuales se les asigno una codificación previa. Siendo detallada de la
siguiente manera:
Nombre de la
No. De Unidad Unidad Código Asignado Significado.
Diseñado con el fin
Centro de Salud de proteger la
1 Xolotlan LRO18-01 privacidad de las
unidades
participantes.
3. Recursos
31
Analistas de las áreas de procesamiento para pruebas rápidas en las
distintas unidades de salud evaluadas.
Los recursos financieros necesarios para llevar a cabo esta investigación fueron
suministrados por el Centro Nacional de Diagnóstico y Referencia de MINSA en
conjunto con la Organización Panamericana de la Salud (OPS), quienes
facilitaron toda la logística, transporte, equipos y materiales requeridos para la
elaboración del estudio.
Una vez aprobada la solicitud se organizó con el encargado de área de VIH del CNDR-
MINSA Msc. Felipe Torres Meneses para dar paso a la realización del estudio.
5. Coordinación
6. Tiempo
El estudio fue realizado en tres momentos de los cuales en dos de ellos se pudo estar
presente ya que el primer muestreo se realizó en el año 2013 cuando se trajo por primera
vez la técnica de la muestra seca en tubo y los otros dos se llevaron a cabo en
32
septiembre de 2015 y enero de 2016, teniendo cada uno de ellos una codificación que
determina el año y el número de ronda evaluada.
33
Operacionalización de variables
Fecha de
Expiración
Seguimiento del
Algoritmo.
Las etapas de
la elaboración Documentación Fecha de Formularios
de los paneles . Reconstitución. SI - No
de Proficiencia, Hojas de
consiste en Fecha de llenado de
Realización. evaluación.
realizar la
documentación
Fecha de Envío
, la de Resultados.
caracterización
de las muestras
y la Kit de viales de Reactor Positivo
preparación de pruebas. No Reactor
materiales Negativo
necesarios para
el
procesamiento
de las mismas.
Puntuaciones
Hoja de
evaluación para 0 – 10 Insatisfactorio
Los resultados .
la
Procesamient
que se documentación o en base de
obtuvieron datos en
mediante un Hoja de Microsoft
proceso evaluación para 0 - 90 Excel
sistemático de el Regular. mediante
medición, procesamiento programación
llevado a cabo del centro
34
en diferentes para el control
tiempos Evaluación 0 -100 Satisfactorio. de
evaluando una Total enfermedades
(CDC)
serie de
parámetros.
35
ANALISIS Y DISCUSION DE LOS RESULTADOS
P 2.5
A
R 2
T
I 1.5
C
I 1
P
0.5
A
C 0
I
LRO18-28
LRO18-10
LRO18-03
LRO18-05
LRO18-06
LRO18-08
LRO18-22
LRO18-23
LRO18-25
LRO18-26
LRO18-09
LRO18-11
LRO18-12
LRO18-15
LRO18-18
LRO18-13
LRO18-17
LRO18-01
LRO18-04
LRO18-14
LRO18-16
LRO18-19
LRO18-07
LRO18-24
LRO18-29
LRO18-30
LRO18-21
LRO18-20
LRO18-02
O
N
CODIGO DE UNIDADES DE SALUD.
En septiembre del año 2015 se llevo a cabo la segunda evaluación para la evaluación del
panel de los paneles de proficiencia para el control de calidad para dar seguimiento y se
agregaron 4 unidades más, las cuales contaron con un excelente desempeño a lo largo
del proceso.
En febrero del año 2016 se efectuó la tercera ronda para la evaluación del control
externo de la calidad se agregaron 10 unidades más de salud de las cuales su primera
capacitación la recibieron in situ, en este punto se refleja que la mejora constante a lo
largo de este estudio termino siendo un factor determinante.
36
Grafico 2: Resultados obtenidos versus resultados esperados de las muestras positivas
incluidas en el total de las rondas realizadas para el control externo de la calidad.
100%
100.00%
86.66%
90.00% 83.33%
80.00%
70.00%
60.00%
50.00%
40.00%
30.00%
20.00% 13.33% 14.28%
10.00% 0% 0% 0% 0% 0% 0% 2.38%
0.00%
Acertados Indeterminados No Reportados No Acertados
37
La cantidad de aciertos presenta variaciones en las diferentes rondas; en la ronda 2 fue
donde se obtuvo el 100% de aciertos al momento de diagnosticar todas las pruebas que
realmente fueron caracterizadas como positivas.en la ronda 1 reportaron un 13.3% como
indeterminados lo que evidencia un error en la interpretación de las pruebas rápidas ya
que dicho termino no se utiliza según las indicaciones establecidas en los insertos de
pruebas, si en la práctica diariase reportan análisis como indeterminados esto
conllevaría a generar atrasos en el diagnostico a los pacientes, incremento de costos.La
ronda No. 3 su principal detalle se encuentra en los resultados no acertados en un
2.38%, lo que nos induce a pensar que una mínima cantidad del personal de laboratorio
que proceso el panel, `presento deficiencias en la fase analítica y post analítica.
100%
100%
90.74%
90% 84.52%
80%
70%
60%
50%
40%
30%
20.37%
20%
10% 5.50%
0% 0.54% 0% 0% 0% 1.85%2.38%
0%
Acertadas Indeterminadas No Reportadas No Acertadas
En base a las tres rondas reportadas se puede observar que donde hubo mejor acierto
fue en la primera ronda,que tuvo un rendimiento del 100%.
38
En la ronda 2 se obtuvo un 90.74% de similitud en los resultados, 1.85% no acertados y
5.5 no reportaron estado final. Además informaron erróneamente 0.54% de
indeterminados.
Para la tercera ronda se obtuvo un 100% de acierto en los paneles procesados, se logró
disminuir la cantidad de reportes de muestras indeterminadas y estado final de muestras
no reportado.
Grafico 4: Pruebas rápidas de VIH utilizadas en las unidades de salud del SILAIS
Managua, que participaron en las tres rondas, para el procesamiento de las muestras de
los Paneles de Proficiencia de VIH.
A1 A2
120%
80%
A2, 64.28%
60%
40%
20%
0%
Ronda 1(VIH01-13) Ronda 2 (VIH02-15) Ronda 3 (VIH03-16)
39
Para la evaluación de los análisis de resultados de cada una de las rondas se aplico el
algoritmos diagnostico de VIH establecido para Nicaragua. en cual estipula la
utilización de una prueba A1 y una prueba A2, en todos los centros asistenciales que
pertenecen a la red diagnostica de VIH. A todas las muestras se les hace A1 y la
solamente a las que resulten reactivas en A1.
Como podemos observar en las dos últimas rondas no fue posible la aplicación del
algoritmo diagnostico ya que las unidades tenían un déficit respecto al abastecimiento
de reactivos. Esta situación puede conllevar a afectar el flujo de pruebas que se deben
realizar en las unidades de salud para brindar un diagnostico de calidad a la población.
40
300%
100%
50% 100% 100% 100% 90% 100% 100% 100% 100% 100%
0%
LRO18-03 LRO18-05 LRO18-06 LRO18-08 LRO18-22 LRO18-23 LRO18-25 LRO18-26 LRO18-28
En la primera ronda solamente una de las unidades obtuvo un 90% el resto obtuvo un
100%, por lo que podemos aseverar que el plan piloto fue exitoso.
Consideramos que dos principios básicos del sistema de gestión de la calidad como son;
la mejora continua a través de las capacitaciones y el hábito del llenado adecuado de la
documentación son factores determinantes en las fases: pre analítica, analítica y post
analítica en las buenas prácticas de laboratorio.
41
Grafico 6: Calificaciones obtenidas por los Hospitales de Referencia en el llenado de la
documentación para el procesamiento de los paneles de proficiencia de VIH para el
control externo de la calidad de las pruebas rápidas de VIH.
300%
200%
100%
0%
LRO18-09 LRO18-11 LRO18-12 LRO18-15 LRO18-18
Las unidades con los códigos LRO18-12 Y LRO18-18 obtuvieron el 100% para las
rondas 1 y 2 y un 90% para la ronda 3, es decir que en el nivel más alto de atención de
salud el llenado de la documentación se cumple tal cual se orienta según las normas ya
establecidas como país y muy particularmente como el nivel central lo estipula.
42
seguimiento y además se les brinda tratamiento a los pacientes que resulten ser
seropositivos a VIH.
300%
100% 100%
250% 100% 66.67%
0%
200%
100%
0%
LRO18-09 LRO18-11 LRO18-12 LRO18-15 LRO18-18
La Ronda 1 (VIH01-13) se observa que todas las unidades tuvieron un rendimiento del
100%, en el procesamiento de las muestras del panel.
43
En conclusión en las rondas 2 y 3 tres unidades participantes obtuvieron bajo
rendimiento, consideramos que no siguieron de forma correcta las instrucciones para
procesar el panel
300%
44
tales como; aspectos legales, morales, sociales y económicos. Es por todos estos
motivos que recalcamos en la necesidad dar seguimiento a todas las normas y
regulaciones establecidas para el correcto desempeño cuando hacemos una prueba que
va a servir para dar un diagnóstico de calidad a los usuarios. Cabe señalar que el
personal de salud o el analista siempre debe trabajar en pro de mejorar la calidad con
capacitaciones constantes, con el uso de buenas prácticas de laboratorio, con el uso de
documentación y sobre aplicar y dar fiel cumplimiento al algoritmo diagnostico.
Grafico 9: Puntaje final obtenido por todas las unidades de salud participantes en las
tres rondas realizadas con los paneles de proficiencia de VIH usando MST para el
control externo de la calidad de las pruebas rápidas de VIH.
350
300
50 100 100 99 100 100 100 100 100 100 100 100 100
55 55
0
Fuente: Tabla 9.
45
reflejaron cometer errores al menos en 1 o más parámetros evaluados para la
puntuación final.
Mantener un buen desempeño cuando se procesen los paneles de control de calidad o las
muestras de pacientes en estudio, es un aspecto de vital importancia para los analistas,
ya que de ello depende en gran medida la salud de la población. Si no damos
cumplimiento a este y otros aspectos relacionados con las buenas prácticas de gestión de
la calidad podemos influir negativamente en detrimento de la economía del país, el
prestigio de nuestras instituciones. Además estigma y discriminación a niveles sociales
para nuestros pacientes, por no dar un diagnostico adecuado en tiempo y forma. De tal
manera debe de ser un compromiso para cada analista y para cada institución la mejora
continua para poder obtener altos rendimientos y el mantener un servicio de salud con
calidad y calidez para toda la población.
46
CONCLUSIONES
47
RECOMENDACIONES
A los analistas de cada una de las unidades de salud se les recomienda hacer un
protocolo de trabajo alternativo, para llevar un control interno de la calidad.
48
Bibliografía
1) al., K. a. (2013). Lab Forum. Obtenido de Lab Forum.
12) Stark, T. (Martes 23 de Julio de 2015). Gen HUnter. Obtenido de Gen Hunter:
http://www.genhunter.com/cgi-
local/news_display.pl?action=article&date=1329945037
49
13) Tinoco, L. (2 de Junio de 2012). Sinonimo de Calidad. Obtenido de
http://www.sincal.org/articulo42-cambios-de-la-norma-iso-15189-version-2007-a-la-
2012-aplicable-a-laboratorios-clinicos.html
50
ANEXOS
51
Centros de salud y hospitales centinelas SILAIS-Managua
Sirva la presente para que los estudiantes sean atendidos por el personal que realiza las
pruebas rápidas de VIH en las diferentes unidades de salud incluidas. De tal manera
que ellos puedan entregar los paneles de Proficiencia, brinden las orientaciones
necesaria para procesar el panel y finalmente que los responsables de laboratorio envíen
un informe de acuerdo a las instrucciones adjuntas en los paneles.
Cabe señalar que esta actividad permitirá obtener datos que nos servirán para evaluar el
las pruebas rápidas y el desempeño del personal que procesa dichas pruebas.
Atentamente
52
Tabla N° 2: Resultados obtenidos versus resultados esperados de las muestras positivas
incluidas en el total de las rondas realizadas para el control externo de la calidad.
Ronda 2
VIH02-15 54 100 0 0 0 0 0 0 54
Ronda 3
VIH03-16 70 83.33 0 0 12 14.28 2 2.38 82
53
Tabla N° 3: Resultados obtenidos versus resultados esperados de las muestras incluidas
negativas, en el total de las rondas realizadas para el control externo de la calidad.
Ronda 2
VIH02-15 49 90.74 1 0.54 3 5.55 1 1.85 54
Ronda 3
VIH03-16 71 84.52 0 0 11 20.37 2 2.38 84
54
Tabla N° 4: Pruebas rápidas de VIH utilizadas en las unidades de salud del SILAIS
Managua, que participaron en las tres rondas, para el procesamiento de las muestras de
los Paneles de Proficiencia de VIH.
Unidades Unidades
Rondas Tipo de % De Tipo de % De Total %
Prueba Salud Prueba Salud
A1 A2
Fuente: Gráfico4
55
Tabla N° 5: Calificaciones obtenidas en el llenado de la documentación para el
procesamiento de los paneles de proficiencia de VIH, para el control externo de la
calidad de las pruebas rápidas de VIH. Por parte de los Centros de Salud participantes
en las tres rondas.
Código
Unidades Ronda 1 % Ronda 2 % Ronda 3 % Total %
Hospitalaria (Puntaje (Puntaje (Puntaje (Puntaje
s ) ) ) )
LRO18-23 10 100 7 70 7 70 24 80
LRO18-25 10 100 8 80 9 90 27 90
56
Tabla N° 6: Calificaciones obtenidas por los Hospitales de Referencia en el llenado de
la documentación para el procesamiento de los paneles de proficiencia de VIH para el
control externo de la calidad de las pruebas rápidas de VIH.
Código
Unidades Ronda 1 % Ronda 2 % Ronda 3 % Total %
Hospitalaria (Puntaje (Puntaje (Puntaje (Puntaje
s ) ) ) )
57
Tabla N° 7: Puntaje obtenido en el procesamiento de los paneles de Proficiencia
utilizando MST para el control externo de calidad de los Hospitales de Referencia.
Código
Unidades Ronda 1 % Ronda 2 % Ronda 3 % Total %
Hospitalaria (Puntaje (Puntaj (Puntaje (Puntaje
s ) e) ) )
58
Tabla N° 8: Puntaje obtenido en el procesamiento de los paneles de Proficiencia
utilizando MST para el control externo de calidad de los Centros de Salud.
Código
Unidades Ronda 1 % Ronda 2 % Ronda 3 % Total %
Hospitalaria (Puntaje (Puntaje (Puntaje (Puntaje
s ) ) ) )
59
Tabla No. 9: Puntaje final obtenido por todas las unidades de salud participantes en las
tres rondas realizadas con los paneles de proficiencia de VIH usando MST para el
control externo de la calidad de las pruebas rápidas de VIH.
LRO-18-25 55 98 99 84%
Total 15 15 15 100
Fuente: Gráfico 9
60
Ilustración 1 Materiales para elaboración de Paneles de Proficiencia
61
Ilustración 3 Muestra Negativa para VIH
62
Ilustración 6 Etiquetado de viales
63
Ilustración 8 Panel de Proficiencia
64
65
Ilustración 10 Resultados de pruebas A1 y A2
66
Ilustración 11 Algoritmo Nacional
67
Ilustración 12 Procedimiento de las MST
68
Ilustración 13 Presentación de los resultados
69
Ilustración 14 Evaluación de los resultados
70
Ilustración 15 Normativa 091
71
Ministerio de Salud
Centro Nacional de Diagnóstico y Referencia
Departamento de Virología
Área de Serología de VIH
Programa de Control de Calidad en Pruebas Rápidas
Check List
Por favor, indiquela fecha ysus inícialescuando la acciónhaya sido completada.
Gracias por suparticipación y colaboración en la implementación y desarrollo del control de calidad en pruebas
rápidas de VIH, utilizando muestra seca en tubo. En Nicaragua.
72
Programa de control de calidad en pruebas rápidas de VIH
Instrucciones de uso y lista de verificación para Muestra seca en tubo.
Las
iníciales
73
con sus muestras depacientes, para que los resultados sean
verdaderamenteindicativos del desempeño diariode su
laboratorio.
Orientarse con la normativa 091 (guía de procedimientos
para el diagnóstico de VIH). En la página 33 aparecen los
procedimientos analíticos.
Anote los resultados en el formulario de presentación de
resultados y envíelos al CNDR.
PRESENTACION DE RESULTADOS
74