Clinica Básica Hematología6D

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Hematología Práctica

Clinica básica IVD COLOMBIA


Manuel Ramírez
1 La Sangre

2 Métodos de lectura

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1 Sistema Circulatorio

• El sistema circulatorio es el más grande dentro del cuerpo


humano

• Participa en el proceso de Respiración


• Transporte
• Recuperación
• Regulación

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1 Componentes de la sangre

 La sangre se la añade un
anticoagulante para que
permanezca líquida y se pueda
realizar la lectura ( tubo lila
tiene anticoagulante EDTA
(acido etilen-diamino-
tetracetico)

 Cuando el tubo permanece


algún tiempo sin mezclarse
permite ver claramente , el
plasma( líquido claro) , lás
células blancas(leucoitos) y
plaquetas (trombocitos )y en el
fondo las células
rojas(eritrocitos).
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1 Componentes de la sangre

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1 Componentes de la sangre
Componentes Forma Número Tamaño Función

Globulos rojos Disco 4.0-5.5 x 106/uL 82-95 fL Contiene hemoglobina, la


( Eritrocitos) Concavo cual es responsible de
transportar O2 a através
del cuerpo humano

Plaquetas Forma 100-300 x 7-11 fL Lleva a la formación de


irregular 103/uL coagulos en la sangre

Glóbulos Forma 4-10 x 103/uL 40-300 fL Hacen parte del sistema


Blancos(Leucoci irregular inmune, defendiendo el
tos) cuerpo ante infecciones y
cuerpos extraños

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De donde vienen las
células sanguíneas ?

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1 Glóbulos Rojos/Eritrocitos/RBC

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1 Glóbulos rojos

Glóbulo rojo nucleado (NRBC)


1 D ciclo
T y de v
ida
RE la ose férica
a

periférica

RBC
i

Sangre
u er
éd p
M e
ngr
S a

ciclo de
120 D
vida
c a
4 e vi d
i clo
osea

d
D
lo
Médu
NRBC
Reticulocitos (RET)

RBC
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1 Glóbulos rojos

Diferencia principales entre RBC, RET y NRBC

Tipo de célula Tamaño Ubicación Núcleo DNA/RNA


célula
RBC Grande Médula ósea si si
nucleados
media Médula y No si
Reticulocitos sangre
RBC pequeña sangre No No

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1 RBC: Glóbulos Rojos

Número RBC Número de glóbulos


rojos

MCV Media del tamaño de un


RBC
tamaño HCT hematocrito

RDW- Ancho distribución glóbulos rojos


SD/CV

HGB Concentración de Hemoglobina


Concentración
de hemoglobina MCH Media corpuscular de
hemoglobina
Concentración media cospuscular de
MCH
hemoglobina
C
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1 RET: Reticulocitos

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1 RET: Reticulocitos
Reticulocitos (Ret) Glóbulos rojos inmaduros,
usualmente están entre 0.5-1.5% del total de
glóbulos rojos

Paciente Porcentaje Valor absoluto


General 0.5 - 1.5 (%) 24 - 84 (×103/uL)
Neonato 2.0 - 6.0 (%)

Los reticulocitos no tienen nucleo, pero tienen material RNA,


Una característica que no se encuentra en los RBC maduros

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1 RET: Reticulocitos

Significancia clínica de los


reticulocitos:
RET # Ayuda a evaluar la habilidad de la médula ósea
para producir RBC y ayuda a distinguir entre la
RET % anemia relacionada con perdida de sangre y la
anemia relacionada con el descenso en la
LFR
producción de RBC
MFR
Ayuda a monitorear la respuesta de la médula ósea
HFR Y la recuperación de la función normal de la
médula ósea despues de un tratamiento con
IRF quimioterapia, transplante de médula ósea o el
seguimiento al tratamiento de anemia por
deficiencia de hierro,

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1 Reticulocitos Inmaduros
temprana Más madura
Etapa

Reticulocitos inmaduros

Más Menos
RNA

Alta Baja
Fluorescencia

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1 RET: Reticulocitos
4 Etapas de desarrollo de los
reticulocitos

De acuerdo a la concentración de RNA, los reticulocitos se


Alta

pueden dividir en tres tipo


Contenido RNA

Reference Range
HFR High fluorescent ratio 0.4-4.2 %
MFR Middle fluorescent ratio 13.6-23.8 %

LFR Low fluorescent ratio 72.2-85.4 %


Baja

IRF Immature reticulocyte fraction = HFR+MFR

Etapa IV son comumente visto en la sangre periférica.


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1 NRBC: Células Rojas nucleadas
Interfieren con el conteo de WBC en muestras anormales,por tal
motivo NRBC debe ser eliminadascuando se realiza el conteo de
WBC (Correción conteo de WBC).

NRBC #

NRBC%

NRBC Son reportadas como número de NRBCs por cada 100 WBCs.

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1 Globulos Blancos /Leucocitos/WBC
Eosinophil

Band

Neutrophil
Monocyte
Lymphocyte
Basophil

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1 WBC: Glóbulos Blancos

Hay 5 tipo de celulas presentes en los globulos blancos ( WBC)

Linfocitos Monocitos Neutrofilos Eosinofilos Basofilos

La célula más pequeña, Granulos en el


La célula de mayor citoplasma, teñidos de Granulos en el Son las células menos
gran núcleo / citoplasma, tamaño, Citoplasma citoplasma, teñidos comunes, granulos en
citoplasma claro, es uno violeta, reaccionan
claro, participa en la dentro de las primeras de rojo oscuro, el citoplasma teñidos
de los componentes ingestión de sustancia responsable de de azul oscuro,
principales del sistema horas cuando hay una
extrañas como lesión de tejidos y es el combatir las importante fuente de
inmunitario humano bacterias o parásitos infecciones y los histamina y citocaina
sello distintivo en una
inflamación aguda. parásitos

Granulocitos

LYM MON NEU EOS BAS

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1 WBC: Glóbulos Blancos
WBC

∑ Total No

La célula más pequeña, gran núcleo / citoplasma, citoplasma claro, es uno de


Lymphocytes (#,
%) los componentes principales del sistema inmunitario humano
.
La célula de mayor tamaño, Citoplasma claro, participa en la ingestión de
Monocytes (#,%)
sustancia extrañas como bacterias o parásitos
.
Neutrophils (#,%) citoplasma, teñidos de violeta, reaccionan dentro de las primeras horas
cuando hay una lesión de tejidos y es el sello distintivo en una inflamación
aguda;
Eosinophils (#,%) Granulos en el citoplasma, teñidos de rojo oscuro, responsable de combatir
las infecciones y los parásitos
;
Basophils (#,%) Son las células menos comunes, granulos en el citoplasma teñidos de de azul
oscuro, importante fuente de histamina y citocaina
.

DIFF WBC/BASO
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1 WBC: Glóbulos Blancos

LYM # MON # NEU # EOS # BAS #

LYM% MON% NEU% EOS% BAS%

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1 WBC: Glóbulos Blancos

Células blancas inmaduras

Médula ósea

Células blancas maduras


Sangre periférica
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1 WBC: Glóbulos Blancos
Granulocitos inmaduros(IMG*) =
Metamielocitos + Mielocitos + Promielocitos+
Basofilos inmadurosl + Eosinofilos Inmaduros

IMG Aperecen en la sangre periférica, debido a :

• Infecciones
IMG#*
• Inflamación IMG%*
• Intoxicaciones
• Leucemia

“Left shift” Alarma


* Parámetros RUO

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1 WBC: Glóbulos Blancos
Blastos

infección viral

linfocitos Linfocitos atípicos

High Fluorescence Cell (HFC*) = HFC%*


Blastos + linfocitos atípicos HFC #*

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1 WBC: Resumen
Alto contenido RNA , Nucleo simple

WBC
inmaduros

Alto contenido RNC, Núcleo


complejo

WBC
maduros Bajo contenido RNA, Núcleos simples
Y complejos
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1 PLT: Plaquetas

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1 PLT: Plaquetas

Las plaquetas son producidas en la médula ósea, por


una célula madre llamada megacariocito.

Los Megacariocitos se hacen células gigantes, luego


experimentan un proceso de fragmentación , a través
del cual relajan hasta 100 plaquetas por megacariocito

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1 PLT: Plaquetas

Número PLT Número de plaquetas

MPV Media del tamaño de plaquetas

PCT Plaquetocrito

tamaño PDW Distribución del ancho de plaquetas

P-LCC Platelet large cell count

P-LCR Platelet large cell ratio

Plaquetas ( no como los RBC), pero también tienen material DNA /RNA,
por tanto presentan señales de fluorescencia.

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1 Parámetros de rutina (33)
RBC RET# NRBC# PLT WBC

MPV LYM#
MCV RET% NRBC%
LYM%
HCT LFR PCT
MON#
RDW-SD MFR PDW
MON%
RDW-CV HFR P-LCC
NEU#
HGB IRF P-LCR NEU%
MCH EOS#
MCHC EOS%
BAS#
BAS%

8 6 2 6 6 11
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1 Parámetros de investigacion (11)

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2 Métodos de Lectura
Baños de DIFF, WBC/BASO, NRBC, RET
Baño RBC/PLT

Baño de HGB

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2 Métodos de Lectura

Voltimetro Foto- Sistema


detector óptico
(PD/PMT)

Flujo focalizado- Método Dispersión por laser y Dispersión


Impendancia fotométrico fluorescencia por laser

Canal de RET bath


Canal RBC/PLT Canal Diferencial Canal RET Canal NRBC Canal DIFF/BASO
HGB

Histogram Histograma Dispersogram Dispersograma Dispersogram Dispersogra Disp


Disp NRBC
a RBC PLT a DIFF RET a PLT-O ma RET_Ext WBC/BAS

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2 Métodos de Lectura

2 histogramas

DIFF BASO RET NRBC PLT-O RET-EXT

6 dispersogramas
3 Disp
tridimensionales

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2 Fluorescencia

longitud Onda de Longitud de onda de


excitación(~635nm) salida (~670nm)

Laser Fluorescence

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2 Fluorescencia

Laser Fluorescencia
635nm 670nm

Paso 1 Paso 2 Paso 3

Celula teñida por un Luz Absorbida Emsion de luz


Reactivo es excitada

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2 Dispersión por laser
FL

SS

FS

Laser (=635nm)

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2 Tecnología Cubo SF
Disperson por laser frontal
Tamaño de la célula
S
1-10 °(635nm)

Dispersion por laser lateral


Complejidad de la célula
90 ° ±25 ° (635nm)

F Fluorescencia
(650-800nm)
Información DNA/RNA

Cubo Analisis 3D

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2 Tecnología Cubo SF

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2 WBC: Lectura canal DIFF

Poder penetración
RBC LYM MON NEU EOS

LD lyse

RBC LYM MON NEU EOS

Tinción
FD Dye

RBC LYM MON NEU EOS


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2 WBC: Lectura canal DIFF
Intensidad de señal
LD lisado FD tinción por fluorescencia

Poder de penetración
WBC WBC WBC

Tinción
BLAST BLAST
BLAST/
ALY ALY ALY

IMG IMG IMG


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2 WBC: Lectura canal DIFF
HFC%* IMG%*

Left shift
MON%

(NEU+
BAS)%
LYM%

NRBC EOS%

PLT Clump InR‰*


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2 WBC: Lectura canal DIFF
Parámetros reportables:
LYM%, LYM#, MON%, MON#, EOS%, EOS#, NEU%, NEU#

Parámetros de investigación:
HFC%*, HFC#*, IMG%*, IMG#*, WBC-D*, InR#*, InR‰*
Partículas infectadas en RBC
InR#*
Particulas en WBC

WBC

InR#*
InR‰*
RBC

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2 WBC: Lectura canal BAS

RBC LYM MON NEU EOS BAS

Contracción
LB lisante

RBC LYM MON NEU EOS BAS

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2 WBC: Lectura canal BAS

BAS
Tamaño de la célula

Other WBC

GHOST
WBC/ BAS%
Complejidad SS
WBC-B*

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2 WBC: Lectura canal BAS

Parámetros reportables:
WBC 、 Bas% 、 Bas#

Parámetros de investigación:
WBC-B*

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2 NRBC: lectura de Normoblastos

Poder de penetración
RBC NRBC WBC

LN lisante

RBC NRBC WBC

Tinción
FN tinción

RBC NRBC WBC


ntensidad de señal
por fluorescencia
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2 NRBC: lectura de Normoblastos
Automaticamente corrige El conteo total de
blancos

FS
Tamaño de la célula

N
WBC
R
B
C

NRBC% WBC-N*
ST
GHO
Intensidad por fluorescenciaFL
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2 NRBC: Principio lectura NRBC

(1)
NRBC% = ×
(2)
100%

(2) NRBC% × WBC


(1) NRBC# = ×
(1
NRBC% 100%
+ )

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2 RET: Lectura de reticulocitos

Esferifirificación
RBC RET PLT

DR Diluyente

RBC RET PLT

tinción
FR tinción

RBC RET PLT


Fluorescence
Signal Intensity Mindray international market ★ Version 3.0
2 RET: Lectura de reticulocitos

FS
MFR HFR
LFR

W
Tamaño R RET
de la B
célula B
C
C

- O
LT
P
Intensidad por fluorescencia FL
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2 RET: Lectura de reticulocitos
IRF MFR HFR

IRF: Immature Reticulocyte Fraction

RBC-O*

PLT-O*

LFR MFR HFR

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2 RET: Lectura de reticulocitos
RET

PLT-O RET-EXT

Medición RET Medición PLT-O* Medición WBC-R*

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2 RET: Lectura de reticulocitos
Parámetros reportables:
RET% 、 RET# 、 IRF 、 LFR 、 MFR 、 HFR

Parámetros de investigación:
RBC-O* 、 PLT-O* 、 WBC-R*

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2 RBC/PLT: lectura de Plaqueta y RBC
U=R*I
Cuando la célula pasa a través de la apertura
debido al vacio, genera un cambio en la
impedancia.
Aperture
Con una fuente de corriente constante, el
+ - cambio de voltaje es directamente
Vacuum proporcional al tamaño de la célula
Electrode

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2 RBC/PLT: lectura de Plaqueta y RBC
DS Diluyente

Asegura que las células pasen a través


Previene la recirculación
de la apertura, haciendo una fila
de lás células. Mindray international market ★ Version 3.0
ordenada
2
Number
RBC/PLT: lectura de Plaqueta y RBC

Number
Volume Volume
Traditional DC impedance method Focusing Flow-DC method

Este método minimiza la interferencia encontrada en la técnología tradicional

Debido a esto parámetros como MCV, RDW-CV, RDW-SD son más precisos y ofrecen
una información mas confiable para el diagnóstico clínico

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2 RBC/PLT: lectura de Plaqueta y RBC

El resultado de PLT-O* evita interferencias


Por presencia de microcitosis, plaquetas
Grandes o cúmulos de plaquetas.

PLT-O*
Optical + Fluorescence
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2 HGB: lectura de Hemoglobina
LH Lisante

LH
525nm

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2 RBC/PLT: lectura de Plaqueta y RBC
RBC * MCV
HCT =
10

HGB
MCH =
RBC
MCV RDW-CV RDW-SD

HGB
MCHC = * 100
HCT

PLT *MPV
PCT =
10000
MPV PDW Mindray international market ★ Version 3.0
2 RBC/PLT: lectura de Plaqueta y RBC
Parámetros reportables:
RBC 、 MCV 、 HCT 、 RDW-SD 、 RDW-CV 、 HGB 、 MCH 、 MCHC

PLT 、 MPV 、 PCT 、 PDW 、 P-LCC 、 P-LCR

Parámetros de investigación
PLT-I* 、 PDW-SD*

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Gracias!

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