Influencia de Ácidos Acético y Láctico en La (Autoguardado)

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Influencia de ácidos acético y láctico en la

degradación del cacao flavan-3-ol a través


de incubaciones de tipo fermentativo
Ing. Carlos Altamirano
QF. Eddy Carbajal Silva
Resumen
• Las reacciones bioquímicas que se producen en el interior de los granos de
cacao durante la fermentación se deben principalmente a la penetración
de ácidos lácticos y acéticos derivados de actividades microbianas.
• En el presente estudio, los granos de cacao frescos maduros se sometieron
a tres sistemas de incubación de tipo fermentativo: incubación durante 2
días a pH 4 en una solución de ácido acético, ácido láctico o ambos,
seguido de una incubación de 3 días a pH 5 en Acético.
• Después de cada tratamiento aplicado, el índice de fermentación fue
superior a 1 y un ensayo de corte reveló un color marrón, característico de
frijoles bien fermentados.
Resumen
• Como se muestra por RP-HPLC-ESI - MS / MS análisis, los principales flavan-3-
oles que se encuentran en Cacao alemán (grupo Amelonado) y ICS 40 (grupo
Trinitario) clasificó como sigue: epicatequina> C1> B2> catequina > B5>
dehydrodiepicatechin A.
• En ambas fermentaciones naturales e incubaciones de fermentación similar,
estos compuestos mostraron una fuerte disminución, siendo este efecto más
fuerte cuando el ácido acético estuvo presente desde el principio.
• El ácido láctico mostró un efecto protector polifenol. Dos procianidinas con
un peso molecular de 576, no detectadas antes de la fermentación, se dan
gran testimonio aquí por primera vez en los dos granos de cacao incubados y
naturalmente fermentados.
Índice de fermentación
• El índice de fermentación (FI), definido como la relación de la
absorción medida a 460 nm (polifenoles oxidados amarillos) a la
medida a 530 nm (antocianinas), se determinó por duplicado, según
Misnawi, Jinap, Jamilah y Nazamid (2003). Se mezclaron quinientos
miligramos de cacao molido en 50 ml de metanol / ácido clorhídrico
(97: 3 v / v) y luego se almacenaron a 8 ± 2 ◦ C durante 18 horas y se
filtraron a través de Whatman n "4 (Inglaterra). El filtrado se completó
a 50 ml con metanol / ácido clorhídrico (97: 3v / v) antes de las
determinaciones de absorbancia (Shimadzu UV-240, Japón).
Prueba de corte
• Esta prueba se llevó a cabo de acuerdo con Shamsuddin y Dimmick
(1986), con ligeras modificaciones. Diez frijoles de cacao secos de
cada esquema de incubación o fermentación se cortaron
longitudinalmente en dos partes aproximadamente iguales. Cada
mitad se examinó visualmente y se fotografió. La Fig. 1 muestra el
color observado en cada muestra para la mayoría de los frijoles.
ANÁLISIS ESTADÍSTICO
Todos los datos se analizaron con el software SPSS,
versión 17.0 (SPSS Inc., Chicago, EE.UU.). La
significancia estadística se evaluó mediante análisis de
varianza (ANOVA). La diferencia menos significativa
(LSD) según el test de Tukey se utilizó para comparar y
separar los medios, y se aceptó la significancia al nivel
del 5% (alfa = 0,05).
Tabla 3 Contenido de F1, F2 y deshidrodiepicatequina A (8) (mg / kg A2 equivalentes) de granos de cacao
alemán e ICS 40 después de 0, 2 y 5 días de incubación semejante a la fermentación o fermentación natural.
Diferentes letras en la misma línea indican diferencias significativas de acuerdo con la prueba de Tukey de rango
múltiple a = 0,05 (n = 2). n.d. Significa no detectado.
Univariate Results for Each DV (Spreadsheet1)
Effect Over-parameterized model
Type III decomposition
Degr. of Catequinas mg/Kg Catequinas mg/Kg Catequinas mg/Kg Catequinas mg/Kg
Freedom F p SS MS
Tratamientos_dia_2 3 8.3110 0.002930 3109.88 1036.63
Variedades 2 122.3950 0.000000 30532.34 15266.17
Tratamientos_dia_2*Variedades 6 8.3110 0.001037 6219.76 1036.63
Error 12 1496.74 124.73
Total 23 41358.72
T ra ta mie n to s_ d ia _ 2 *Va rie d a d e s; L S Me a n s
C u rre n t e ffe ct: F (6 , 1 2 )=8 .3 1 1 0 , p =.0 0 1 0 4
T yp e III d e co m p o sitio n
Ve rtica l b a rs d e n o te +/- sta n d a rd e rro rs
160

140

120

100
Catequinas mg/Kg

80

60

40

20

-2 0 Va rie d a d e s
1
-4 0 Va rie d a d e s
1 2 3 4 2
Va rie d a d e s
T ra ta mie n to s_ d ia _ 2 3
Tukey HSD test; variable Catequinas mg/Kg (Spreadsheet1)
Cell No. Approximate Probabilities for Post Hoc Tests
Error: Between MS = 124.73, df = 12.000
Tratamientos_dia_2 Variedades 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0.0000 0.0000 85.500 0.0000 0.0000 126.00 0.0000 0.0000 35.000 0.0000
1 1 1 1.000000 0.000348 1.000000 1.000000 0.000174 1.000000 1.000000 0.179743 1.000000
2 1 2 1.000000 0.000348 1.000000 1.000000 0.000174 1.000000 1.000000 0.179743 1.000000
3 1 3 0.000348 0.000348 0.000348 0.000348 0.085672 0.000348 0.000348 0.020989 0.000348
4 2 1 1.000000 1.000000 0.000348 1.000000 0.000174 1.000000 1.000000 0.179743 1.000000
5 2 2 1.000000 1.000000 0.000348 1.000000 0.000174 1.000000 1.000000 0.179743 1.000000
6 2 3 0.000174 0.000174 0.085672 0.000174 0.000174 0.000174 0.000174 0.000258 0.000174
7 3 1 1.000000 1.000000 0.000348 1.000000 1.000000 0.000174 1.000000 0.179743 1.000000
8 3 2 1.000000 1.000000 0.000348 1.000000 1.000000 0.000174 1.000000 0.179743 1.000000
9 3 3 0.179743 0.179743 0.020989 0.179743 0.179743 0.000258 0.179743 0.179743 0.179743
10 4 1 1.000000 1.000000 0.000348 1.000000 1.000000 0.000174 1.000000 1.000000 0.179743
11 4 2 1.000000 1.000000 0.000348 1.000000 1.000000 0.000174 1.000000 1.000000 0.179743 1.000000
12 4 3 0.009535 0.009535 0.357327 0.009535 0.009535 0.001600 0.009535 0.009535 0.744907 0.009535
Univariate Results for Each DV (Spreadsheet1)
Effect Over-parameterized model
Type III decomposition
Degr. of catequina catequina catequina catequina
Freedom SS MS F p
Intercept 1 123195.0 123195.0 3262.544 0.000000
Variedades 2 3816.9 1908.4 50.541 0.000001
Tratamiento dia 5 3 4337.7 1445.9 38.291 0.000002
Variedades*Tratamiento dia 5 6 5115.5 852.6 22.579 0.000007
Error 12 453.1 37.8
Total 23 13723.2
Tukey HSD test; variable catequina (Spreadsheet1)
Cell No. Approximate Probabilities for Post Hoc Tests
Error: Between MS = 37.760, df = 12.000

Variedades Tratamiento dia 5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12


62.500 62.500 88.500 108.00 77.750 37.500 46.000 54.000 49.500 73.000 83.500 117.00
1 1 1 1.000000 0.033195 0.000434 0.426387 0.042907 0.332492 0.946495 0.623395 0.835236 0.117970 0.000198
2 1 2 1.000000 0.033195 0.000434 0.426387 0.042907 0.332492 0.946495 0.623395 0.835236 0.117970 0.000198
3 1 3 0.033195 0.033195 0.169724 0.816728 0.000241 0.000719 0.003934 0.001417 0.406502 0.999008 0.017494
4 1 4 0.000434 0.000434 0.169724 0.011208 0.000174 0.000177 0.000202 0.000182 0.003493 0.048772 0.925307
5 2 1 0.426387 0.426387 0.816728 0.011208 0.001095 0.007708 0.059077 0.018645 0.999370 0.996753 0.001344
6 2 2 0.042907 0.042907 0.000241 0.000174 0.001095 0.946495 0.332492 0.713422 0.003106 0.000405 0.000173
7 2 3 0.332492 0.332492 0.000719 0.000177 0.007708 0.946495 0.963290 0.999964 0.025665 0.001965 0.000174
8 2 4 0.946495 0.946495 0.003934 0.000202 0.059077 0.332492 0.963290 0.999613 0.190950 0.013543 0.000176
9 3 1 0.623395 0.623395 0.001417 0.000182 0.018645 0.713422 0.999964 0.999613 0.062964 0.004434 0.000174
10 3 2 0.835236 0.835236 0.406502 0.003493 0.999370 0.003106 0.025665 0.190950 0.062964 0.835236 0.000555
11 3 3 0.117970 0.117970 0.999008 0.048772 0.996753 0.000405 0.001965 0.013543 0.004434 0.835236 0.005010
12 3 4 0.000198 0.000198 0.017494 0.925307 0.001344 0.000173 0.000174 0.000176 0.000174 0.000555 0.005010
Va rie d a d e s*T ra ta mie n to d ia 5 ; L S Me a n s
C u rre n t e ffe ct: F (6 , 1 2 )=2 2 .5 7 9 , p =.0 0 0 0 1
T yp e III d e co m p o sitio n
Ve rtica l b a rs d e n o te 0 .9 5 co n fid e n ce in te rva ls
140
130
120
110
100
90
catequina

80
70
60
50
40
T ra ta mie n to d ia 5
30 1
T ra ta mie n to d ia 5
20 2
T ra ta mie n to d ia 5
10
1 2 3 3
T ra ta mie n to d ia 5
Va rie d a d e s 4
Conclusión
La incubación de cacao en soluciones de ácido láctico y / o acético reveló
que bien imita la fermentación natural, según se juzga a partir de índices de
fermentación, pruebas de corte o cuantificaciones de flavan-3-ol. Sin
embargo, el ácido láctico mostró un efecto protector polifenol.
Dos nuevos compuestos llamados F1 y F2 fueron detectados tanto en
frijoles naturales como incubados, además de la bien identificada
dehidrodiepicatequina A.
Se necesitan más investigaciones para identificar F1 y F2 y para evaluar
cómo podrían ser usadas por los fabricantes de chocolate como
indicadores del cacao Calidad masiva.

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