Scribd Logo
Unggah

Selamat datang di Scribd!

  • 36 tayangan

    HPLC

    Diunggah oleh

    Webinar UY
    Ekstraksi, identifikasi, dan analisis kuantitatif senyawa flavanoid dari sarang semut (Myrmecodia pendens) menggunakan HPLC. Lima flavanoid diidentifikasi yaitu kaempferol, luteolin, rutine, quercetin, dan apigenin dengan kadar masing-masing 13,767 mg/g, 0,005 mg/g, 0,003 mg/g, 0,030 mg/g, dan 4,700 mg/g. Sarang semut berpotensi sebagai sumber flavanoid dan

    Hak Cipta:

    © All Rights Reserved
    Unduh sebagai PPTX, PDF, TXT atau baca online dari Scribd

    HPLC

    Diunggah oleh

    Webinar UY
    36 tayangan17 halaman
    Ekstraksi, identifikasi, dan analisis kuantitatif senyawa flavanoid dari sarang semut (Myrmecodia pendens) menggunakan HPLC. Lima flavanoid diidentifikasi yaitu kaempferol, luteolin, rutine, quercetin, dan apigenin dengan kadar masing-masing 13,767 mg/g, 0,005 mg/g, 0,003 mg/g, 0,030 mg/g, dan 4,700 mg/g. Sarang semut berpotensi sebagai sumber flavanoid dan

    Deskripsi Asli:

    Judul Asli

    140210100056_HPLC

    Hak Cipta

    © © All Rights Reserved

    Format Tersedia

    PPTX, PDF, TXT atau baca online dari Scribd

    Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

    Apakah konten ini tidak pantas?

    Ekstraksi, identifikasi, dan analisis kuantitatif senyawa flavanoid dari sarang semut (Myrmecodia pendens) menggunakan HPLC. Lima flavanoid diidentifikasi yaitu kaempferol, luteolin, rutine, quercetin, dan apigenin dengan kadar masing-masing 13,767 mg/g, 0,005 mg/g, 0,003 mg/g, 0,030 mg/g, dan 4,700 mg/g. Sarang semut berpotensi sebagai sumber flavanoid dan

    Hak Cipta:

    © All Rights Reserved
    Unduh sebagai PPTX, PDF, TXT atau baca online dari Scribd
    Unduh sebagai pptx, pdf, atau txt
    36 tayangan17 halaman

    HPLC

    Diunggah oleh

    Webinar UY
    Ekstraksi, identifikasi, dan analisis kuantitatif senyawa flavanoid dari sarang semut (Myrmecodia pendens) menggunakan HPLC. Lima flavanoid diidentifikasi yaitu kaempferol, luteolin, rutine, quercetin, dan apigenin dengan kadar masing-masing 13,767 mg/g, 0,005 mg/g, 0,003 mg/g, 0,030 mg/g, dan 4,700 mg/g. Sarang semut berpotensi sebagai sumber flavanoid dan

    Hak Cipta:

    © All Rights Reserved
    Unduh sebagai PPTX, PDF, TXT atau baca online dari Scribd
    Unduh sebagai pptx, pdf, atau txt
    dari 17

    Ekstraksi, Identifikasi dan Analisis

    Kuantitatif HPLC Senyawa Flavanoid


    dari Sarang Semut (Myrmecodia
    pendens)

    INDAH PERMATA YUDA


    140210100056

    Adam Mekonnen Engidaa, Novy S. Kasima, Yeshitila Asteraye Tsigie a, Suryadi Ismadjib,
    Lien Huong Huynhc, Yi-Hsu Jua
    a) Department of Chemical Engineering, National Taiwan University of Science and Technology, 43, Sec. 4, Keelung Road, Taipei
    106-07, Taiwan
    b) Department of Chemical Engineering, Widya Mandala Surabaya Catholic University, Kalijudan 37, Surabaya 60114, Indonesia
    c ) Department of Chemical Engineering, Can Tho University, Can Tho City, Viet Nam
    FLAVONOID

    Flavonoid mempunyai kerangka dasar karbon yang


    terdiri dari 15 atom karbon, dimana dua cincin
    benzen (C6) terikat pada suatu rantai propan (C3)
    sehingga membentuk sustu susunan C6-C3-C6.
    FLAVANOID

    Manfaat Flavanoid :
    Antioksidan
    Pengkhelat logam
    1 B
    Antiproliferative O
    C2
    Antikarsinogenik
    A C
    Antibakteri C3
    C
    Anti-inflammatory 4
    Antialergi 2-fenilkroman
    Antiviral effect
    Sarang Semut (Myrmecodia pendens)

    Kingdom : Plantae
    Divisi : Tracheophyta
    Kelas : Magnoliopsida
    Sub Kelas : Lamiidae
    Ordo : Rubiales
    Famili : Rubiaceae
    Genus : Myrmecodia
    Spesies : Myrmecodia pendens
    Nama lokal : Sarang semut (Papua)
    Sarang Semut (Myrmecodia pendens)

    Etnobotani Etnofarmakologi

    Sakit punggung Antioksidan


    Alergi
    Asam urat Antikanker
    TBC
    Tumor Antimikroba
    Melancarkan peredaran darah
    Immunomodulatory
     High Performance Liquid Chromatography
    (HPLC) atau KCKT menggunakan cairan sebagai
    HPLC fasa gerak dan fasa diamnya.
     Prinsip kerja HPLC : pemisahan komponen analit
    berdasarkan kepolarannya
     Dengan bantuan pompa, fasa gerak cair dialirkan
    melalui kolom detektor. Cuplikan (sampel)
    dimasukkan ke dalam aliran fasa gerak dengan
    cara penyuntikan.
     Setiap campuran komponennya yang keluar kolom
    dideteksi oleh detektor kemudian direkam dalam
    bentuk kromatogram.
     Pada kromatogram, jumlah peak menyatakan
    jumlah kompenen, sedangkan luas peak
    menyatakan konsentrasi komponen dalam
    campuran.
     Komputer digunakan untuk mengontrol kerja
    sistem HPLC dan mengumpulkan serta mengolah
    data hasil pengukuran.
    HPLC

     Metode HPLC dapat digunakan untuk


    analisa kuantitatif dan sekaligus
    kualitatif. Untuk analisa kualitatif dengan
    membandingkan kromatogram sampel
    dengan kromatogram baku pembanding
    berdasarkan waktu retensinya.
     Sedangkan untuk analisa kuatitatif dapat
    digunakan dengan persamaan :
    Cx = Ax / Ap X Cp
    Keterangan :
    A = Peak area = Luas puncak
    C = Konsentrasi
    X = sampel
    P = pembanding

    Atau jika ingin mendapatkan data yang lebih valid dapat pula ditentukan dengan
    menggunakan kurva kalibrasi larutan standar.
    PROSEDUR ANALISIS HPLC

    3 gram Sarang semut

    - dipanaskan dengan etanol pada suhu 55 0C selama 4 jam dalam pelarut

    - disaring dengan kertas saring Whatman No. 2

    - dihilangkan etanol menggunakan rotary evaporator pada suhu 60 0C

    - dihilangkan air menggunakan freeze drying

    Ekstrak pekat sarang semut

    - reconstituted

    - dipanaskan kembali pada suhu 800C dalam pelarut 40 ml 65% metanol dan 0,5 g/l TBHQ yang terlarut

    - di tambahkan 10 ml HCl 6 N
    - dinginkan

    - sonikator selama 5 menit

    - encerkan dengan air de-ionisasi hingga volumenya 100ml

    Ekstrak pekat sarang semut

    - disaring melalui Anotop syringe 0,2 µm

    - dianalisis dengan HPLC: Luna 5U-C18 (2) 100A column (250 mm ×4.5 mm, 5 µm) plus Jasco,
    quaternary gradient pump (pu-2089) plus Jasco, UV-2077 4λ intelligent UV/vis detector.

    - dielusi secara bergradien dengan fasa gerak A dan B


    - pelarut A : air deionisasi dan 1% asam asetat, sedangkan pelarut B : metanol (grade HPLC) dan
    1% asam asetat. Elusi bergradien diatur menurut :
    10% B–17.2% B (18 min), 17.2% B–23% B (12 min), 23% B isokratik (10 min),
    23%–31.3% B (13 min), 31.3% B–46% B (12 min), 46% B–55% B (5 min),
    55% B–100% B (5 min), 100% B isokratik (8 min), 10% B (2 min) dan 10% B isokratik (5 min).

    - semua volume sampel diinjeksi sebanyak 20 µl

    - dimonitori pada panjang gelombang 280 nm dan 285 nm dengan laju alir 1 ml/min

    Kromatogram
    Standar

    Larutan stok flavanoid standar disiapkan. Pengenceran dan injeksi dilakukan hingga
    kromatogram HPLC menunjukkan tinggi puncak flavanoid sampai kira-kira S/N 10:1 untuk
    LOQ dan 3:1 untuk LOD.

    Flavanoid diidentifikasi dengan membandingkan waktu retensi dan spektra standar dan
    kandungan flavanoid menggunakan kurva kalibrasi.

    Kurva kalibrasi dibuat dari plot rata-rata puncak vs. konsentrasi setiap analit.
    Kromatogram untuk pelarut blanko dikurangi kromatogram sampel untuk mengkoreksi
    “backgrond error”.

    Kuantitas setiap flavanoid ditentukan menggunakan persamaan regresi linear (Y = ax±b),


    dimana x adalah konsentrasi dan y adalah puncak setiap flavanoid yang didapat dari kurva
    kalibrasi terhadap setiap standar.

    Linearitas dikoreksi dengan faktor koreksi (R 2), slope, intercept, dan kalibrasi statistik
    lainnya menggunakan Microsoft excel versi 7.0.
    HASIL DAN PEMBAHASAN

    Gbr. 1. Kromatogram delapan standar flavanoid yang dimonitor pada 280 nm dan teridentifikasi dengan
    waktu retensi (min) catechin (17.593), (+)-epicatechin (43.110), rutine (62.433), luteoline (73.178),
    myrcetin (74.777), kaepferol (76.197), quercetin (78.147) dan apigenin (87.160).
    Gbr. 2. Kromatogram HPLC dari ekstrak kasar kondisi dibawah optimum : etanol 80%l, 4 jam dan
    50 ml per gram sampel. Puncak no. 4 (rutine), 7 (luteolin), 9 (kaepferol), 10 (quercetin) dan
    12 (apigenin) diidentifikasi puncak senyawa tersebut.
    Semua flavanoid yang teridentifikasi dikalibrasi
    pada panjang gelombang 280 nm.

    Lima flavanoid kaempferol, luteoline, rutine,


    quercetin dan apigenin diukur.
    kaempferol : 13,767 mg/g
    apigenin : 4,700 mg/g
    quercetin : 0,030 mg/g
    luteoline : 0,005 mg/g
    rutine : 0,003 mg/g
    KESIMPULAN

    Dari analisis HPLC ekstrak kasar, lima flavanoid


    teridentifikasi dan terukur dalam tanaman sarang
    semut adalah kaempferol (13,767 mg/g), luteolin
    (0,005 mg/g), rutine (0,003 mg/g), quercetin (0,030
    mg/g) dan apigenin (4,700 mg/g).
    Tanaman ini dapat dipertimbangkan berpotensi
    sebagai sumber utama flavanoid dan senyawa fenolik.
    Penemuan ini menambah nilai potensial tanaman
    untuk keperluan kesehatan.
    Terima Kasih

    SEKIAN

    Anda mungkin juga menyukai