Aula 2.2 - Transcrição - Prof João Geisteira

TRANSCRIÇÃO
DOGMA CENTRAL DA BIOLOGIA
PROF.: JOÃO GEISTEIRA | UERJ-ZO

Apesar de os genes
fornecerem as informações para a produção de proteínas, eles não constroem
diretamente uma proteína
• A ponte entre o DNA e a síntese proteica é o RNA
• Para isso, o RNA mensageiro (mRNA) é produzido a partir de uma fita molde de
DNA, sendo complementar a esta última molécula
• Esse processo é a transcrição, a síntese de RNA sob o controle do DNA
A transcrição acontece
de maneira diferenciada em organismos procariontes e eucariontes
• Em organismos procariontes o DNA não está localizado separadamente das
estruturas responsáveis pela síntese de proteínas, esse processo acontece enquanto
ocorre a transcrição
• Em organismos eucariontes, onde o DNA encontra-se no núcleo, a tradução começa
apenas ao fim da transcrição
PROPRIEDADES DO RNA
FITA SIMPLES | MAIOR FLEXIBILIDADE
• Açúcar: ribose
• Bases nitrogenadas: A, G, C e U
• Polaridade: 5’ - 3’
RNA POLIMERASE
Os eucariontes apresentam três tipos de RNA’s polimerase que

atuam na síntese de moléculas de RNA específicos.
RNA ribossômico | RNAr
Fica armazenado no núcleo (associado a proteínas), e, em seguida, é transportada ao
citoplasma para formar os ribossomos
RNA mensageiro | RNAm

Responsável pelo transporte da informação transcrita do DNA. A informação é
transportada por meio dos códons (sequências de três nucleotídeos, por exemplo, AUG)
RNA transportador | RNAt

Apresenta regiões onde ocorre o pareamento de bases e uma região com três bases livres,
os anticódons, que podem parear com um dos códons do RNAm. Essas moléculas de
RNA transportam aminoácidos específicos, de acordo com seu anticódon, do citoplasma
até os ribossomos
O
PROCESSO
ESTRUTURA GERAL DO GENE
Início
• O processo se inicia com
o reconhecimento da sequência específica
do DNA a ser transcrita
• As ligações de H que unem as duas
cadeias de DNA se rompem e as duas
fitas se separam
• Apenas uma das duas fitas servirá como
molde para a síntese de RNA
A transcrição tem 3 etapas
A helicase rompe ligações
de H do DNA
1
RNAp reconhece o promotor,
início da transcrição
Alongamento, RNAp de H do DNA
1
adiciona nucleotídeos e RNAp reconhece o promotor,
sintetiza o transcrito início da transcrição
A dupla hélice de DNA é
novamente formada
2
IDENTIFICAÇÃO DO PROMOTOR | FATOR SIGMA
• Fatorσreconhece o
promotor do gene
• RNAp + fatorσ =
complexo holo-RNAp
(holoenzima)
• O fatorσestabelece uma
forte ligação ao DNA
• TATA box | Região promotora não
codificante de eucariotos
• CAAT box | 60-100b
• GC box | padrão de sequencia em
promotores eucarióticos, 100b
PROMOTORES
• São sequências de DNA específicas para o início da transcrição.

• Tais sequências são reconhecidas por proteínas específicas - fatores de transcrição, que trazem
a RNA polimerase para realizar a montagem dos RNAs.
INÍCIO DA SÍNTESE DE RNA
• Um pequeno segmento de RNA é sintetizado

(~10nt)
• O fatorσse solta do complexo
• RNAp se move mais rapidamente
Alongamento, RNAp de H do DNA
1
adiciona nucleotídeos e RNAp reconhece o promotor,
sintetiza o transcrito início da transcrição
A dupla hélice de DNA é
novamente formada Liberação do transcrito (pré-
2 RNAm)
RNAp reconhece o terminador,
final da transcrição
3
RNAp ENCONTRA A REGIÃO DO TÉRMINO
• RNA polimerase se solta do DNA

• RNA recém sintetizado é liberado
• RNA polimerase pode se associar
ao fator σ e iniciar outro processo
de transcrição
| O pré RNAm deve ser processado para formar o RNAm
| Um CAP 5' é adicionado ao começo do transcrito de RNA, e uma cauda poli-a é
adicionada ao final
CAP 5´
• Estrutura de RNAm eucariótico
• Gerada pela ligação 5-5´ do RNAm e
uma guanina modificada (guanosina)
• CAP 5´ protege o RNAm contra
ribonucleases e dá mais estabilidade
Processamento do pré RNAm

| O pré RNAm deve ser processado para formar o RNAm
| Um CAP 5' é adicionado ao começo do transcrito de RNA, e uma cauda poli-a é
adicionada ao final
CAUDA POLI-A
• Cauda de poliadenilato na
extremidade 3´ (~200 A’s)
• Protege o RNAm das nucleases e
maior estabilidade
Processamento do pré RNAm

ÉXONS |sequencias codificantes
ÍNTRONS |sequencias não codificantes
Estrutura do RNAm
SPLICING
SPLICEOSSOMOS
• São grandes arranjos formados por snRNPs
(complexos formados por pequenos RNAs
nucleares e ribonucleoproteínas) e precursores de
mRNA.
• Nos mamíferos, o início do splicing se dá
quando ocorre o reconhecimento do “ponto de
corte 5’ “ pelo snRNP U1, que contém uma
sequência complementar ao ponto de corte.
• Essa molécula liga-se à região de corte
protegendo cerca de 15 nucleotídeos da digestão.
SPLICING ALTERNATIVO
• Mais de um RNAm pode ser formado a partir do mesmo gene
• Através do splicing alternativo, os eucariontes podem codificar mais proteínas
diferentes do que há de genes no DNA
• Ex.: O mesmo pré-RNAm pode sofrer splicing de três maneiras diferentes,
dependendo de quais éxons sejam mantidos
• Isso resulta em três RNAm maduros, cada qual é traduzido em uma proteína de
estrutura diferente
Pré RNAm
íntrons
RNAm
TRADUÇÃO
VANTAGEM ADAPTATIVA
Geração de diversidade vinculada à economia de energia e espaço.
DNA LIXO
• Os estudos sobre o “DNA lixo” provêm de
um projeto de 196 milhões de dólares
chamado Enciclopédia de Elementos do
DNA (Encode)
• O objetivo é dar sentido ao Projeto Genoma
Humano - a sequência de 3,2 bilhões de bases
que constituem o código genético
PGH | início em 1990 – término em 2003
DNA LIXO
• Do genoma, são os cerca de 21
mil genes que especificam quais
proteínas uma célula produz
• Cerca de 1% do genoma,
codifica proteínas
• Mas, um desafio!
Mas qual é a
função dos 99%
Durante anos foi

chamado de DNA lixo
AO EXAMINAR A PARTE MENOSPREZADA DO GENOMA
os cientistas do Encode descobriram que cerca de 80%
• do DNA antes visto como "lixo" na verdade desempenha uma função biológica
• Primariamente, o DNA "nem tão lixo assim" constitui o painel de controle com cerca de 4
milhões de pedaços de DNA controlando todo o resto
• "O DNA lixo, os 99%, na verdade estão encarregados de administrar os genes“ –

Gerstein.
Por que uma célula da pele e um
neurônio são tão diferentes, se
teoricamente carregam o mesmo
genoma
• Alguns genes estão ligados/desligados
em certos momentos, em diferentes
tipos de células, e se ligam/desligam
de acordo com diferentes estímulos
(regulação gênica)
• De maneira geral, as regiões não

codantes contribuem para essa
regulação gênica de duas formas:
1. Regiões com muitas repetições
(1-5 nucleotídeos) podem alterar a
estabilidade do local onde
ocorrem, alterando a expressão
dos genes;
2. Algumas regiões não codantes,

conseguem ser transcritas em
RNAs que regulam a expressão de
outros genes, impedindo que se
traduzam em proteínas ou outros
mecanismos mais sofisticados
Alguns genes são sempre “ligados”,
IMPORTANCIA DA independentemente das condições ambientais. Esses
REGULAÇÃO GÊNICA genes são os mais importantes do genoma e controlam a
síntese de proteínas relacionadas ao metabolismo
• Parte importante do central de um organismo. Em contraste, os genes
desenvolvimento normal. regulados são necessários apenas ocasionalmente.
• Os genes são ligados e desligados,
durante o desenvolvimento, para
fazer com que uma célula da folha
de uma planta pareça e aja
diferente de uma célula da raiz ou
de uma célula do fruto, por
exemplo.
To be continued ...

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Os eucariontes apresentam três tipos de RNA’s polimerase que

RNA mensageiro | RNAm

RNA transportador | RNAt

• São sequências de DNA específicas para o início da transcrição.

• Um pequeno segmento de RNA é sintetizado

• RNA polimerase se solta do DNA

Processamento do pré RNAm

Processamento do pré RNAm

Durante anos foi

• "O DNA lixo, os 99%, na verdade estão encarregados de administrar os genes“ –

• De maneira geral, as regiões não

2. Algumas regiões não codantes,

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