Scribd Logo
Încărcați

Bine ați venit la Scribd!

  • 306 vizualizări

    LP 3 Amilaza

    Încărcat de

    adriano_marcelo_7
    LP 3 Amilaza

    Drepturi de autor:

    © All Rights Reserved
    Descărcați ca PDF, TXT sau citiți online pe Scribd

    LP 3 Amilaza

    Încărcat de

    adriano_marcelo_7
    306 vizualizări2 pagini
    LP 3 Amilaza

    Drepturi de autor

    © © All Rights Reserved

    Formate disponibile

    PDF, TXT sau citiți online pe Scribd

    Vi se pare util acest document?

    Este necorespunzător acest conținut?

    LP 3 Amilaza

    Drepturi de autor:

    © All Rights Reserved
    Descărcați ca PDF, TXT sau citiți online pe Scribd
    Descărcați ca pdf sau txt
    306 vizualizări2 pagini

    LP 3 Amilaza

    Încărcat de

    adriano_marcelo_7
    LP 3 Amilaza

    Drepturi de autor:

    © All Rights Reserved
    Descărcați ca PDF, TXT sau citiți online pe Scribd
    Descărcați ca pdf sau txt
    din 2

    LP 3 Determinarea activitii amilazei / 2 ore

    Determinarea activitii amilazei: principiul


    rezultatelor, valori normale, variaii patologice.

    metodei,

    interpretarea

    Amilazele sunt enzime care catalizeaz hidroliza legturilor glicozidice din


    amidon, glicogen i poliglucidele derivate ale acestora, ducnd la formarea de
    molecule mai mici precum maltoz, dextrine, glucoz.
    In cavitatea bucala actioneaza amilaza salivara (ptialina) ce hidrolizeaza
    amidonul si glicogenul.
    Determinarea activitii amilazei prin metoda Wohlgemuth
    Principiul metodei
    Amilaza catalizeaz hidroliza amidonului n compui cu mas molecular din ce n ce
    mai mic, care pierd proprietatea de a se colora cu iodul.
    n 10 eprubete se fac diluii succesive ale probei de ser. Se pune apoi n fiecare din
    ele amidon i iod i se observ coloraia. Se apreciaza cantitatea minima de ser necesara
    hidrolizei amidonului.
    Reactivi
    Solutie NaCl 0,9%
    Solutie iod 0,1N
    Solutie amidon 0,1%
    Proba
    Ser sau urina
    Tehnica de lucru
    Se pregatesc 10 eprubete.
    In prima eprubeta se pipeteaza 2 ml ser iar in celelalte 9 se pune cate 1 ml NaCl.
    Din prima eprubeta se ia 1 ml si se pune in eprubeta 2, din eprubeta 2 se ia 1 ml si se
    pune in eprubeta 3, samd. In ultima eprubeta se ia 1 ml si se arunca.
    Se adauga in toate eprubetele cate 2 ml solutie amidon.
    Se agita si se introduc in termostat la 370C 30 min.
    Dupa racire se adauga in fiecare eprubeta cate 3 picaturi de iod 0,1N.
    Eprubetele se agita si se observa culoarea.

    nr.
    1
    eprubeta
    dilutia
    1/1
    serului
    activitatea 2
    amilazica
    (UW)

    10

    1/2

    1/4

    1/8

    1/16

    1/32

    1/64

    1/128

    1/256

    1/512

    16

    32

    64

    128

    256

    512

    1024

    Interpretarea rezultatelor
    Culoarea eprubetelor reflecta gradul de hidroliza al amidonului:
    mare)

    - eprubetele colorate n albastru conin amidon nehidrolizat (diluia probei a fost prea
    - eprubetele colorate n violet conin amilodextrine
    - eprubetele colorate n brun-roscat au hidroliza incompleta, conin eritrodextrine
    - eprubetele colorate slab glbui conin amidon partial hidrolizat, contin flavodextrine
    - eprubetele incolore conin amidon complet hidrolizat
    Activitatea amilazei se exprima in unitati Wolgemuth (UW)

    1 UW reprezinta cantitatea minima de enzima capabila sa hidrolizeze 1 mg de


    amidon, in 30 min la 370C.
    1 UD (unitate diastazica) reprezinta cantitatea de enzima capabila sa
    hidrolizeze 0,2 ml amidon in conditiile descrise.
    1 UW = 2n UD
    Unde:
    n = nr ultimei eprubete in care nu apare culoarea albastra (amidonul a fost hidrolizat)
    Calcul
    Se calculeaza cantitatea de amidon (mg) hidrolizata de amilaza continuta in 1 ml ser.
    Rezultatul exprimat in UW se obtine inmultind titrul dilutiei ultimei eprubete in care nu
    apare culoarea albastra cu 2.
    Ex. eprubeta 4 este eprubeta dinaintea celei in care a aparut culoarea albastra
    1/8 ml ser.........2 ml amidon 0,1%
    1 ml ser............x
    X = 2 x 8 = 16
    Valori normale
    Amilazemie ser: 16 32 UW
    Amilazurie urin: 8 64 UW
    Variaii patologice
    Valori crescute ale amilazei n ser:
    - pancreatite acute i cronice, insuficien renal, carcinom de cap de pancreas,
    obstrucii intestinale, ulcer perforat, colici biliare, afeciuni ale glandelor salivare, intoxicaii
    acute cu alcool;
    Afectiune genetica macroamilazemie apar molecule mari de enzima ce nu pot fi excretate
    de rinichi.
    Valori crescute n urin: ulcer, colici biliare
    Valorin sczute ale amilazei n ser
    - ciroze, carcinom hepatic, hepatite, alcoolism

    S-ar putea să vă placă și