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    Identificacion Ácidos Nucleicos

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    Victor Antonio Cofre
    Este documento describe un procedimiento para extraer e identificar fragmentos de ácidos nucleicos como el ADN a partir de muestras naturales como frutas y hígado. Se explica cómo extraer el ADN usando NaCl, lavalozas y etanol frío, y luego cómo identificar la presencia de pentosas, bases nitrogenadas y grupos fosfatos a través de pruebas con diferentes reactivos, lo que confirmaría que el producto obtenido es realmente ADN. Finalmente, se plantean preguntas sobre los pasos del procedimiento y cómo determinar otras sust

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    Identificacion Ácidos Nucleicos

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    Victor Antonio Cofre
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    Este documento describe un procedimiento para extraer e identificar fragmentos de ácidos nucleicos como el ADN a partir de muestras naturales como frutas y hígado. Se explica cómo extraer el ADN usando NaCl, lavalozas y etanol frío, y luego cómo identificar la presencia de pentosas, bases nitrogenadas y grupos fosfatos a través de pruebas con diferentes reactivos, lo que confirmaría que el producto obtenido es realmente ADN. Finalmente, se plantean preguntas sobre los pasos del procedimiento y cómo determinar otras sust

    Descripción original:

    guía de laboratorio

    Título original

    identificacion ácidos nucleicos

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    Este documento describe un procedimiento para extraer e identificar fragmentos de ácidos nucleicos como el ADN a partir de muestras naturales como frutas y hígado. Se explica cómo extraer el ADN usando NaCl, lavalozas y etanol frío, y luego cómo identificar la presencia de pentosas, bases nitrogenadas y grupos fosfatos a través de pruebas con diferentes reactivos, lo que confirmaría que el producto obtenido es realmente ADN. Finalmente, se plantean preguntas sobre los pasos del procedimiento y cómo determinar otras sust

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    Este documento describe un procedimiento para extraer e identificar fragmentos de ácidos nucleicos como el ADN a partir de muestras naturales como frutas y hígado. Se explica cómo extraer el ADN usando NaCl, lavalozas y etanol frío, y luego cómo identificar la presencia de pentosas, bases nitrogenadas y grupos fosfatos a través de pruebas con diferentes reactivos, lo que confirmaría que el producto obtenido es realmente ADN. Finalmente, se plantean preguntas sobre los pasos del procedimiento y cómo determinar otras sust

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    PRACTICA N3

    Reconocimiento e Identificacin de cidos Nucleicos


    Podemos extraer e identificar fragmentos de cidos nucleicos a partir de
    distintas muestras naturales?

    Introduccin.

    Los cidos nucleicos son las biomolculas portadoras de la informacin


    gentica. Tienen una estructura polimrica, lineal, cuyos monmeros son los
    nucletidos. El grado de polimerizacin puede llegar a ser altsimo, con
    molculas constituidas por centeneras de millones de nucletidos en una sola
    estructura covalente.
    Los cidos nucleicos son el cido desoxirribonucleico (ADN) y el cido
    ribonucleico (ARN). El ADN porta la informacin gentica que comanda la
    formacin de un organismo completo y, junto con el ARN, determinan las bases
    del funcionamiento celular a travs de la expresin de la informacin que
    contienen, sin importar si el organismo es unicelular o multicelular, procarionte
    o eucarionte. Todos los organismos tienen el ADN como vehculo de su cdigo
    gentico.
    Los organismos formados por clulas que tienen ncleos verdaderos, es decir,
    separados del citoplasma por una doble membrana bien diferenciada, se
    denominan organismos eucariontes.
    El ADN est organizado en estructuras llamadas cromosomas. Los organismos
    eucariontes como los animales, plantas y hongos, almacenan la mayor parte de
    su material gentico dentro del ncleo celular.
    El ADN es una molcula de longitud gigantesca, que est formada por
    agregacin de tres tipos de sustancias; un azcar (desoxirribosa), un grupo
    fosfato y cuatro bases nitrogenadas distintas; adenina, timina, guanina y
    citosina.
    Estas bases nitrogenadas se enlazan a travs de puentes de hidrgeno,
    formando as la estructura de doble hlice caracterstica de esta molcula.

    MATERIALES:

    REACTIVOS:

    Mortero y pistilo

    Frutas

    Matraz de Kitazato de 250 mL

    Higado

    Embudo Bschner

    NaCl
    Lavalozas

    Papel filtro
    Pipeta graduada de 20 mL
    Pipeta graduada de 5 mL

    Etanol
    Hielo
    NH4OH

    Propipeta

    Ribosa

    Gradilla

    AgNO3

    Tubos de ensayo

    HNO3

    Gotario

    (NH4)6 Mo7O244H2O

    Embudo de Gravitacin

    Orcinol
    HCl

    Esptula

    FeCl3

    Vaso precipitado de 250 mL


    Vidrio Reloj

    Procedimiento.
    I.
    -

    Extraccin de cidos nucleicos.


    En el mortero colocar un trozo de frutas y moler con el pistilo hasta
    formar una pasta
    En un embudo Bschner con papel filtro coloca la pasta resultante y filtra
    para obtener zumo (pulpa)
    El zumo transferirlo a un vaso de precipitado y aadir la solucin de
    NaCl (Preparacin: Masar 10 g de NaCl y agregar a un matraz
    erlenmeyer y luego aforar con agua)
    Extraer 10 mL de la mezcla y aadirla a un tubo de ensayo
    Aadir al tubo de ensayo unas gotas de lavalozas
    Verter 15 mL de etanol fro por las paredes del tubo de ensayo. Luego,
    agitar el tubo suavemente para que precipite el ADN.
    Extraer el ADN del tubo enrollando la masa gelatinosa en una pipeta y
    depositarlo en el vidrio reloj con agua para conservarlo
    Repetir la experiencia con las dems muestras.

    II.
    -

    Identificacin de la pentosa.
    Tomar 6 tubos de ensayo y agregar lo siguiente en cada uno de ellos:
    Muestras (5). Ribosa (1).

    III.
    -

    IV.
    -

    Agregar reactivo de Bial a cinco tubos de ensayo (1 para cada muestra


    ms una ribosa)
    Llevar a bao mara por 5 minutos los tubos de ensayo o hasta que
    observe cambio de coloracin.
    Repetir lo anterior, pero ahora con el reactivo de dische.
    Llevar a bao mara por 15 minutos los tubos de ensayo o hasta que
    observe cambio de coloracin.

    Identificacin de bases nitrogenadas.


    Agregar gotas de NH4OH concentrado hasta obtener un medio bsico y
    aadir algunas gotas de una solucin de AgNO3 0.1 M a una cantidad
    del precipitado obtenido que se ha colocado en un tubo de ensayo.

    Identificacin de grupo fosfato


    Agregar un poco del precipitado en un tubo de ensayo y aadir NH4OH
    concentrado hasta obtener un medio bsico, acidifique con gotas de
    HNO3 y agregue 1 mL de (NH4)6 Mo7O24 4H2O 0,5M

    Cuestionario
    1. Por qu razn se utiliza NaCl y lavalozas al momento de realizar la
    extraccin del ADN de las muestras?
    2. Qu funcin tiene el etanol en la obtencin del fragmento de ADN de
    las muestras? Por qu debe estar a baja temperatura?
    3. De qu manera ser posible corroborar que el producto obtenido es
    realmente ADN y no otro cido nucleico?
    4. El ADN puro es totalmente translcido, Por qu entonces presenta otra
    coloracin al ser extrado?
    5. Sera posible determinar la presencia de otras sustancias que estn
    contaminando la muestra de ADN experimentalmente, como protenas
    por ejemplo?

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