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    Espectometria

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    BerioskaRosasCartolín
    El documento presenta los objetivos y marco teórico de un experimento de espectrofotometría. Los objetivos incluyen conocer los fundamentos de la espectrofotometría y aplicar la ley de Lambert-Beer. El marco teórico explica conceptos como espectrofotómetro, absorbancia, transmitancia y la ley de Lambert-Beer. La parte experimental describe la elaboración de una curva de calibración y la medición de una muestra problema para determinar su concentración usando la curva.

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    El documento presenta los objetivos y marco teórico de un experimento de espectrofotometría. Los objetivos incluyen conocer los fundamentos de la espectrofotometría y aplicar la ley de Lambert-Beer. El marco teórico explica conceptos como espectrofotómetro, absorbancia, transmitancia y la ley de Lambert-Beer. La parte experimental describe la elaboración de una curva de calibración y la medición de una muestra problema para determinar su concentración usando la curva.

    Descripción original:

    fisica nuclear

    Título original

    espectometria

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    El documento presenta los objetivos y marco teórico de un experimento de espectrofotometría. Los objetivos incluyen conocer los fundamentos de la espectrofotometría y aplicar la ley de Lambert-Beer. El marco teórico explica conceptos como espectrofotómetro, absorbancia, transmitancia y la ley de Lambert-Beer. La parte experimental describe la elaboración de una curva de calibración y la medición de una muestra problema para determinar su concentración usando la curva.

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    El documento presenta los objetivos y marco teórico de un experimento de espectrofotometría. Los objetivos incluyen conocer los fundamentos de la espectrofotometría y aplicar la ley de Lambert-Beer. El marco teórico explica conceptos como espectrofotómetro, absorbancia, transmitancia y la ley de Lambert-Beer. La parte experimental describe la elaboración de una curva de calibración y la medición de una muestra problema para determinar su concentración usando la curva.

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    OBJETIVOS

    Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometra para la


    determinacin de concentraciones en soluciones.
    Elaborar curva de calibracin
    Enunciar la ley de Lambert Beer, comprender el significado de las
    magnitudes que intervienen en ella e interpretar la naturaleza de las
    desviaciones de esa ley

    MARCO TEORICO
    La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en
    las investigaciones biolgicas. El espectrofotmetro es un
    instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o
    transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida
    de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma
    sustancia.
    Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz
    monocromtica a travs de una muestra y medir la cantidad de luz
    que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador
    realizar dos funciones:
    1. Dar informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra
    2. Indicar indirectamente qu cantidad de la sustancia que nos
    interesa est presente en la muestra

    LEYES DE ABSORCION DE ENERGIA RADIANTE


    Se refiere a las relaciones existentes entre la cantidad absorbente y
    el grado con el que es absorbida la energa radiante. Hay dos
    variables capaces de afectar al grado de absorcin: la concentracin
    del absorbente y la longitud del trayecto que el rayo luminoso recorre
    a travs de la solucin

    LEY DE LAMBERT - BEER


    Cuando una onda electromagntica de longitud de onda definida, incide sobre
    una sustancia, la fraccin de la radiacin absorbida, ignorando las prdidas
    debidas a reflexiones y disipacin, es una funcin de la concentracin de la
    sustancia en la trayectoria de la luz y del espesor de la muestra.
    Esta ley tambin es conocida como Ley de Beer o Ley de Beer-LambertBouguer. Se trata de una ecuacin matemtica que relaciona la absorcin de la
    luz, con las propiedades del material que es atravesado por esta onda.

    o
    o
    o
    o
    o
    o
    o

    A: Absorbancia o densidad ptica.


    IE: Intensidad de la luz emitida una vez atravesada la muestra.
    I0: Intensidad de la luz incidente.
    T: Transmitancia, cociente de intensidad emitida entre intensidad incidente.
    K: Absortibidad del medio o coeficiente de absorcin.
    B: Camino ptico o ancho de la celda.
    C: Concentracin de la substancia absorbente.

    Los espectrmetros dan la lectura directa de la absorbancia (A) o bien, el


    porcentaje de transmitancia (% T).

    TRANSMITANCIA
    La transmitancia ptica se refiere a la cantidad de luz que atraviesa un cuerpo,
    en una determinada longitud de onda. Cuando un haz de luz incide sobre un
    cuerpo traslcido, una parte de esa luz es absorbida por el mismo, y otra
    fraccin de ese haz de luz atravesar el cuerpo, segn su transmitancia. El valor
    de la transmitancia ptica de un objeto se puede determinar segn la siguiente
    expresin:
    I es la cantidad de luz transmitida por la muestra e I0 es la cantidad total de luz
    incidente

    ABSORBANCIA
    Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslcido, una parte de esta luz
    es absorbida por el cuerpo, y el haz de luz restante atraviesa dicho cuerpo. A
    mayor cantidad de luz absorbida, mayor ser la absorbancia del cuerpo, y menor
    cantidad de luz ser transmitida por dicho cuerpo. Como se ve, la absorbancia y
    la transmitancia son dos aspectos del mismo fenmeno. La absorbancia, a una
    determinada longitud de onda lambda, se define como:

    Donde I es la intensidad de la luz que pasa por la muestra (luz transmitida) y I0


    es la intensidad de la luz incidente

    PARTE EXPERIMENTAL
    a) Elaboracin de una calibracin :
    -

    A partir de la solucin de azul de metileno ,preparar una dilucin de 10%

    Luego

    preparar

    una batera de tubos

    N TUBOS

    SOLUCIN

    10

    AGUA
    DESTILADA

    10

    Medir la intensidad de color de cada solucin

    Tubo 1: 0
    Tubo 2: 0.475
    Tubo 3: 0.686
    Tubo 4: 1.092
    Tubo 5: 1.375
    Tubo 6: 1.581

    b) La muestra problema 2.810

    c) Medir la longitud de la onda espectrofotmetro

    CONCLUSIONES
    Se ha llegado a la conclusin de que la espectrofotometra es un mtodo
    analtico indirecto porque se basa en la medicin de la absorbancia o
    transmitancia de las radiaciones; es de gran utilidad en la actualidad para la
    identificacin de un analito en una muestra problema

    CUESTIONARIO 3 - PRACTICA ESPECTROFOTOMTRICA


    1. Que es un espectrofotmetro, haga un esquema indicando las partes externa
    e internas de un espectrofotmetro de un solo haz y haga un cuadro
    comparativo entre un espectrofotmetro de un solo haz y uno de doble haz?
    Un espectrofotmetro es un instrumento usado en el anlisis qumico que
    sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores
    de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y la
    concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra.

    CUADRO COMPARATIVO

    E. DE UN HAZ

    E. DE DOBLE HAZ

    Consiste en una fuente de ctodo proviene de la fuente de ctodo hueco


    se divide mediante un contador
    hueco
    reflejante y un divisor de haz

    un contador o una
    alimentacin de impulsos

    fuente

    Los dos haces se encuentran


    de nuevamente en el mismo camino
    ptico
    mediante
    un
    espejo
    semiplateado o recombinado antes de
    entrar al monocromador

    proveniente de la fuente pasa una mitad pasa a travs de la llama y


    directamente a travs de todos los la otra es enviada por un paso ptico
    componentes del instrumento hasta interno
    llegar al detector

    2. A que se llama coeficiente de extincin molar. Averige el coeficiente de


    extincin molar de la hemoglobina y el beta caroteno.
    El coeficiente de absorcin molar, coeficiente de extincin molar, o
    absortividad molar, es una medida de la fuerza con una especie qumica
    absorbe luz a una longitud de onda dada. Es una propiedad intrnseca de las
    especies; la absorbancia real, Un, de una muestra depende de la longitud de
    la trayectoria, l, y la concentracin, c, de las especies a travs de la ley de
    Beer-Lambert.

    COEFICIENTE DE EXTINCION MOLAR: BETA CAROTENO:

    = 34.5 mg-1.ml.cm-1

    COEFICIENTE DE EXTINCION MOLAR: HEMOGLOBINA

    E = 2,805.10-2ml.mg-1cm

    3. A que se llama espectro de absorcin y cual es su utilidad dentro del anlisis


    qumico -bioqumico.
    El espectro de absorcin de un material muestra la fraccin de la radiacin
    electromagntica incidente que un material absorbe dentro de un rango de
    frecuencias. De hecho, se emplea el espectro de absorcin para identificar
    los elementos componentes de algunas muestras, como lquidos y gases;
    ms all, se puede emplear para determinar la estructura de compuestos
    orgnicos
    UTILIDAD DEL ESPECTRO DE ABSORCION:
    Espectroscopia de absorcin se emplea como una herramienta qumica
    analtica para determinar la presencia de una sustancia particular en una
    muestra y, en muchos casos, para cuantificar la cantidad de la sustancia
    presente
    4. Seale 3 causas experimentales y 3 causas qumicas que afectan la Ley de
    Lambert y Beer
    CAUSAS EXPERIMENTALES:

    Las interacciones entre soluto y radiacin producidas por mecanismos


    distintos a la absorcin producen una disminucin en la intensidad de
    la luz que se puede confundir en la medicin pudiendo considerarse
    como absorcin.
    Falta de monocromatismo
    Interacciones entre los solutos absorbentes.

    CAUSAS QUIMICAS

    Alteraciones del equilibrio de las reacciones que provocan una


    alteracin de la concentracin del absorbente
    La existencia de otros equilibrios qumicos, reacciones cido-base,
    reacciones de precipitacin
    Las reacciones de formacin de complejos pueden producir la
    dispersin de la radiacin, tambin pueden modificar el color del
    absorbente

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