ASAT/AST/GOT (IFCC)

Reactivo lquido para la determinacin fotomtrica de la enzima

Transaminasa Glutmico Oxalactica (Aspartato Aminotransferasa) en suero.

Para uso en el diagnstico in Vitro. Apto para usar en autoanalizador.

SIGNIFICANCIA CLINICA MATERIAL NECESARIO NO INCLUIDO

La ASAT se encuentra presente en todos los tejidos, pero en altas Espectrofotmetro manual o automtico o fotocolormetro de filtros
concentraciones en el hgado, msculo, rin y corazn. Su aumento se con cubeta termoestable, capaz de medir absorbancia a 340 nm., bao
asocia a enfermedades que afectan dichos tejidos tales como hepatitis, termoregulado, cronmetro, pipetas, calibrador y sueros controles.
infarto del miocardio, entre otras.
TECNICA
FUNDAMENTOS DEL METODO
Llevar el reactivo a la temperatura de reaccin (30C o 37C.).
La determinacin de ASAT se realiza acoplando su accin transaminasa Ajustar el espectrofotmetro a cero con blanco de agua destilada.
a la accin de la enzima MDH en presencia de NADH. Este mtodo se
basa en el mtodo de Henry et al., siguiendo las recomendaciones de Reactivo de trabajo (mL) 1.0
IFCC
Muestra o calibrador (mL) 0.1
L-Aspartato+a-Cetoglutarato
ASAT
Oxaloacetato + Glutamato Mezclar y transferir a la cubeta del espectrofotmetro. Incubar 60
segundos a la temperatura de reaccin. Leer la absorbancia inicial (A1)
Oxaloacetato + NADH
MDH
Malato + NAD+ a 340 nm. Repetir la lectura a intervalos de 60 segundos exactos,
hasta por tres minutos.
El L-Aspartato reacciona con el a-Cetoglutarato en presencia de ASAT
formndose Oxaloacetato y Glutamato. El Oxaloacetato producido es Adaptaciones para la aplicacin de este reactivo en autoanalizadores
reducido por la enzima MDH con la consiguiente oxidacin del NADH a estn disponibles a solicitud. Es responsabilidad del laboratorio validar
NAD. esta aplicacin.
La actividad de la ASAT se mide determinando la disminucin de
absorbancia a 340 nm. segn el NADH sea oxidado a NAD. CALIBRACION

REACTIVOS En la calibracin se recomienda utilizar calibrador srico VALTROL-

C (cdigo 210-130), proceder de igual forma que con las muestras.
Conservados entre 2 y 8C. y protegidos de la luz, estables hasta la Se recomienda recalibrar en cualquier momento que se evidencie
fecha de caducidad indicada en la etiqueta. alguno de estos acontecimientos:
El lote de reactivo cambia
Composicin Reactivo 1: Se realiza un mantenimiento preventivo del equipo
Los valores de control han cambiado o se encuentran fuera
Buffer pH 7.8 0.1 cs
de escala.
a-Cetoglutarato 15 mM
L-Aspartato >240 mM
CALCULOS
LDH >1200 U/L
MDH >960 U/L
Determine el cambio de Absorbancia por minuto (A/min) tanto para el
Azida 0.3%
calibrador como para las muestras.
Composicin Reactivo 2:
Factor = Concentracin Calibrador
NADH 1,08 mM A/min Calibrador
Estabilizadores cs Actividad ASAT (UI/L) = Factor x A/min. muestra

Preparacin del Reactivo de Trabajo: O bien se puede utilizar el siguiente factor:

Mezclar 1 mL. de Reactivo 1 con 200 ul. de Reactivo 2 o preparar el
volumen requerido manteniendo la proporcin. Actividad ASAT desconocido (UI/L) = A/min x 1768
Estabilidad del reactivo de trabajo: 10 das entre 2 y 8C.
Descartar el reactivo si su absorbancia es menor de 0.8 a 340 nm.
contra blanco de agua. y paso de luz de 1 cm o presenta turbidez. Factor 1768 = Vt x 1000____
NADH 340 x P x Vm
MUESTRA
Vt = Volumen total de reaccin
De preferencia utilizar suero libre de hemlisis. Descartar muestras con NADH 340 = Coef. de extincin milimolar del NADH a 340 nm.
hemlisis visible ya que se pueden obtener valores falsamente P = Espesor del paso de luz en la cubeta
elevados. La ASAT es estable a lo menos 7 das entre 2 y 8C. y 15 das a Vm = Volumen de muestra utilizado
-20C.

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CONTROL DE CALIDAD

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros controles -Repetibilidad intraserie: n=20
valorados para ASAT por este mtodo. Se recomienda la
utilizacin de los sueros controles VALTROL-N (cdigo 210-100) y Nivel Media(U/L) C.V.
VALTROL-P (cdigo 210-110). Normal 43 2.7%
El factor podra variar en autoanalizadores por diferencia en el Patolgico 186 1.4%
espesor de paso de luz. En este caso es indispensable utilizar un -Reproducibilidad interserie: n=20
calibrador srico compatible con esta metodologa de anlisis.
Si los valores obtenidos para los controles se encuentran fuera del Nivel Media(U/L) C.V.
rango de tolerancia, revisar el instrumento, los reactivos y el Normal 44 4.9%
calibrador. Patolgico 183 2.5%
Cada laboratorio debe disponer de su propio Control de Calidad y
establecer las correcciones necesarias en caso de que no se Estos datos han sido obtenidos utilizando un autoanalizador MINDRAY
cumpla con las tolerancias permitidas para los controles. de la serie BS. Los resultados pueden variar al cambiar de instrumento o
al realizar el procedimiento manualmente.
ADVERTENCIAS Y MEDIDAS DE PRECAUCION:
-Certificado de Conformidad y Trazabilidad disponible a solicitud
Los volmenes indicados pueden ser alterados proporcionalmente RANGOS DE REFERENCIA
sin alterar los resultados.
Los rangos normales deben informarse de acuerdo a la Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia en
temperatura a la cual se realiza el ensayo. funcin de la poblacin de pacientes. Los rangos de referencia que se
Consultar en nuestra pgina WEB la ficha de seguridad de este enumeran a continuacin estn tomados de la bibliografa existente.
reactivo y observar todas las medidas de precaucin necesarias
para la manipulacin y eliminacin de residuos. Suero: hasta 22 U/L a 30C.
Contiene Azida de Sodio 0.05% (N CAS 26628-22-8) No peligroso Suero: hasta 34 U/L a 37C.
a esta concentracin. No ingerir. En contacto con metales
PRESENTACIONES DISPONIBLES
pesados, como tuberas de cobre o plomo, podra formar azida
metal que es explosiva, elimine los residuos con grandes
CODIGO CONTENIDO
volmenes de agua y/o de conformidad con las regulaciones
170-250 Reactivo 1 3 x 50 mL
locales.
Reactivo 2 1 x 31 mL
Debe utilizarse contenedores de reactivos de autoanalizadores
nuevos. 300210 Reactivo 1 4 x 40 mL
El Hipoclorito de Sodio a una concentracin 10 mg/dL tiene un Reactivo 2 2 x 16 mL
fuerte efecto interferente sobre la estabilidad del reactivo, por lo 200210 Reactivo 1 4 x 40 mL
que todo el material utilizado debe estar LIBRE de residuos de Reactivo 2 2 x 16 mL
Hipoclorito para garantizar el resultado obtenido.
BIBLIOGRAFIA
ESPECIFICACIONES DE DESEMPEO:
1. Tietz, N.W. (ed) Fundamentals of Clinical Chemistry W.B. Saunders
-Linealidad: 500 U/L. Co., Philadelphia, 1976.
Para valores superiores 500 U/L, diluir la muestra con suero fisiolgico y 2. Henry, R.J., Clinical Chemistry, Principles and Technics. Harper and
el resultado obtenido se multiplica por el factor de dilucin. Row Publishers. New York, 1964.
3. Provisional Recomendations on IFCC methods for the measurement
-Lmite de deteccin: 4,0 U/L. of catalytic concentrations of enzymes. Clin Chem 23(887),1977.
4. Young D.S., effects of drugs on clinical laboratory tests,
th
- Sensibilidad analtica: 1 U/L = 0.00058 A 4 ed. AACC Press,1995.

-Interferencias: Hemlisis, bilirrubina sobre 20 mg/dL, y la lipemia

(triglicridos sobre 200 mg/dL) pueden interferir en la tcnica. Otros REV N 2
medicamentos y sustancias podran interferir (4).

-Exactitud: Los reactivos VALTEK no muestran diferencias sistemticas

significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales. Los
detalles del estudio comparativo estn disponibles bajo solicitud.