FOSFATASA ALCALINA LS (IFCC)

Reactivo lquido para la determinacin de la enzima

Para uso en el diagnstico in Vitro. Apto para usar en autoanalizador.

SIGNIFICANCIA CLINICA TECNICA

La enzima fosfatasa alcalina se encuentra concentrada en el hgado, Llevar el reactivo a la temperatura de reaccin (37C.) y poner el
hueso, placenta, intestino, y algunos tumores. En los nios y durante el espectrofotmetro en cero contra blanco de agua destilada.
embarazo se encuentra en concentraciones ms altas debido a los
procesos de crecimiento seo y por accin placentaria, Reactivo de trabajo (ml) 1.00
respectivamente. Esta enzima se encuentra elevada en enfermedades
Volumen de muestra (ml) 0.02
tales como la hepatitis, enfermedades seas, entre otras.
Mezclar y transferir a la cubeta del espectrofotmetro. Incubar 60
FUNDAMENTOS DEL METODO segundos a la temperatura de reaccin. Leer la absorbancia inicial (A1)
a 405 nm. Repetir la lectura a los 60 segundos, exactos
Test cintico y fotmetrico de acuerdo a IFCC (International Federation
Adaptaciones para la aplicacin de este reactivo en autoanalizadores
of Clinical Chemestry and Laboratory Medicine),
estn disponibles a solicitud. Es responsabilidad del laboratorio validar
La fosfatasa alcalina cataliza la hidrlisis del p-Nitrofenilfosfato a p-
esta aplicacin.
Nitrofenol y fosfato, producindose un aumento de absorbancia a 405
nm. proporcional a la concentracin de enzima en la muestra. CALIBRACION
PAL
p-Nitrofenilfosfato p-Nitrofenol + fosfato En la calibracin se recomienda utilizar calibrador srico VALTROL-
C (cdigo 210-130), proceder de igual forma que con las muestras.
REACTIVOS Se recomienda recalibrar en cualquier momento que se evidencie
alguno de estos acontecimientos:
Conservados entre 2 y 8C. y protegidos de la luz, estables hasta la El lote de reactivo cambia
fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Se realiza un mantenimiento preventivo del equipo
Los valores de control han cambiado o se encuentran fuera
Reactivo 1: de escala.
Buffer 2-amino-2-metil-1-propanol pH 10,4 0,58 M CALCULOS
Mg2+ 2mM
Sulfato de Zinc 1mM Factor = Concentracin Calibrador
HEDTA 2mM A/min. Calibrador
Estabilizantes no reactivos c.s. Actividad PAL (UI/L)= Factor x Abs. Muestra
Reactivo 2:
O bien se puede utilizar el siguiente factor:
p-Nitrofenilfosfato 66 mM
Estabilizantes no reactivos c.s. Actividad PAL (UI/L) = A/min x 2751
Preparacin del Reactivo de Trabajo:
Factor = Vt x 1000 = 2751
Mezclar 10 ml. de Reactivo 1 con 2 ml. de Reactivo 2 o preparar el PNP x P x Vm
volumen requerido manteniendo la proporcin. Protjase este reactivo
Vt= Volumen total de reaccin
de la luz directa. Estabilidad del reactivo de trabajo: 10 das entre 2 y
PNP = Coef. de extincin milimolar del p-NPP a 405 nm.
8C. Descartar el reactivo si su absorbancia es mayor de 0.8 a 405 nm.
P= Espesor del paso de luz en la cubeta
contra blanco de agua.
Vm= Volumen de muestra utilizado
MUESTRA
CONTROL DE CALIDAD
De preferencia utilizar suero libre de hemlisis o plasma heparinizado. Es conveniente analizar junto con las muestras sueros controles
No utilizar plasma obtenido con oxalato, fluoruro o citrato ya que valorados para Fosfatasa Alcalina por este mtodo. Se recomienda
interfieren con el ensayo. La fosfatasa alcalina es estable a lo menos 4 la utilizacin de los sueros controles VALTROL-N (cdigo 210-100)
das entre 2 y 8C. y sobre un mes a -20C. y VALTROL-P (cdigo 210-110).
Si los valores obtenidos para los controles se encuentran fuera del
MATERIAL NECESARIO NO INCLUIDO rango de tolerancia, revisar el instrumento, el reactivo y el
calibrador.
Espectrofotmetro manual o automtico o fotocolormetro de filtros
Cada laboratorio debe disponer de su propio Control de Calidad y
con cubeta termoestable, capaz de medir absorbancia a 405 nm, bao
establecer las correcciones necesarias en caso de que no se
termoregulado, cronmetro, pipetas, calibrador y sueros controles.
cumpla con las tolerancias permitidas para los controles.

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ADVERTENCIAS Y MEDIDAS DE PRECAUCION: RANGOS DE REFERENCIA

Los volmenes indicados pueden ser alterados proporcionalmente Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia en
sin alterar los resultados. funcin de la poblacin de pacientes. Los rangos de referencia que se
Los rangos normales deben informarse de acuerdo a la enumeran a continuacin estn tomados de la bibliografa existente.
temperatura a la cual se realiza el ensayo.
ADULTOS (6)
Consultar en nuestra pgina WEB la ficha de seguridad de este Sexo femenino U/lt Sexo masculino U/lt
reactivo y observar todas las medidas de precaucin necesarias 20 50 aos 42 - 98 53 - 128
para la manipulacin y eliminacin de residuos. > 60 aos 53 - 141 56 - 119
En autoanalizadores debe utilizarse contenedores de reactivos
nuevos. NIOS (7)
El Hipoclorito de Sodio a una concentracin 10 mg/dl tiene un Sexo femenino U/lt Sexo masculino U/lt
fuerte efecto interferente sobre la estabilidad del reactivo, por lo 1 30 dias 48 - 406 75 -316
que todo el material utilizado debe estar LIBRE de residuos de 1 mes 1 ao 124 - 341 82 - 383
Hipoclorito para garantizar el resultado obtenido. 1 3 aos 108 - 317 104 - 345
4 6 aos 96 - 297 93 - 309
ESPECIFICACIONES DE DESEMPEO: 7 9 aos 69 - 325 86 - 315
10 12 aos 51 - 332 42 - 362
-Linealidad: 690 U/L. 13 15 aos 50 - 162 74 - 390
Para valores superiores 690 U/L, diluir la muestra con suero fisiolgico y 16 18 aos 47 - 119 52 - 171
el resultado obtenido se multiplica por el factor de dilucin.
PRESENTACIONES DISPONIBLES
-Lmite de deteccin: 2 U/L.
CODIGO CONTENIDO
-Interferencias: Hemoglobina sobre 1,0 gr/dL, bilirrubina sobre 20 100-150 Reactivo 1 3 x 50 ml
mg/dL y la lipemia (triglicridos sobre 1000 mg/dL) podran interferir en Reactivo 2 1 x 31 ml
la tcnica. Otros medicamentos y sustancias podran interferir (4). 300120 Reactivo 1 4 x 40 ml
Reactivo 2 2 x 16 ml
-Exactitud: Los reactivos VALTEK no muestran diferencias sistemticas 200120 Reactivo 1 4 x 40 ml
significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales. Los Reactivo 2 2 x 16 ml
detalles del estudio comparativo estn disponibles bajo solicitud.
BIBLIOGRAFIA
-Repetibilidad intraserie: n = 20
1.- Henry, R.J., Clinical Chemistry, Principles and Technics. Harper and Row
Nivel Media (U/L) C.V. Publishers. New York, 1964.
Normal 93.19 0.99% 2.- Moss DW. International and national views on methods for alkaline
Patolgico 218.39 0.62% phosphatase activity measurement in the clinical laboratory. Proceeding of
the Second International Symposium on Clinical Chemistry, Washington, DC
-Reproducibilidad interserie: n = 20 1976; 41 50.
3.- McComb R.B. Fundamentals of the chemestry of alkaline phosphatase
ans their relation in the measurement of alkaline phosphatase activity in the
Nivel Media (U/L) C.V.
laboratory. Proceeding of the Second International Symposium on Clinical
Normal 93.19 0.78%
Chemistry, Washington, DC 1976; 27 40.
Patolgico 218.39 0.46% 4.- Tietz NW, Rinker D., Shaw LM. IFCC methods for the measurement of
catalytic concentrations of enzymes. Part 5: IFCC method for alkaline
Estos datos han sido obtenidos utilizando un autoanalizador MINDRAY phosphatase. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983; 21:731 748.
de la serie BS. Los resultados pueden variar al cambiar de instrumento o 5.- R.Rueda, R. Lpez, A. Galn, F. Canalias, F. Barragan, F.J. Gella. Mtodo
al realizar el procedimiento manualmente. recomendado para la determinacin en rutina de la concentracin cataltica
de fosfatasa alcalina en suero sanguneo humano. Quimica Clinica 1992; 11
-Certificado de Conformidad y Trazabilidad disponible a solicitud (3) 176 180-
6.- Burtis CA, Ahswood ER, aditores. Tietz textbook of clinical chemistry. 3
ed., Filadelfia: W. B. Saunders Company, 1999. p. 1829.
7.- Soldin JS, Brugnara C., Wong CE, In: MJ Hicks, editor, Pediatric reference
intervals. 6 ed. Washington: AACC Press, 2007. p.11.

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