ACTIVIDAD 12 - Pruebas Bioquimicas

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Laboratorio de microbiología

NRC 23634

BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA NRC


23634 03L

MALDONADO CABRERA CARLOS

CUESTIONARIO XII
PRUEBAS BIOQUÍMICAS

VILA MADRID MANUELA MONSERRAT


MATRICULA 201958169

Vila Madrid Manuela Monserrat


Matricula 201958169
Laboratorio de microbiología
NRC 23634

PRUEBAS BIOQUÍMICAS

1. Menciona el mecanismo de las bacterias para utilizar a la lactosa.

Las que fermenten la lactosa liberarán productos ácidos que producirán un cambio
de pH que se detectará gracias al rojo neutro. Las colonias lactosa (+) aparecerán
de color rojo o violeta contrastando con la coloración amarillenta de las colonias
lactosa (-).

2. Indica la reacción de la descarboxilación de la lisina.

Las enterobacterias, por fermentación de la glucosa producen ácido, el cual hace


virar el indicador a color amarillo. Si la bacteria posee una lisina descarboxilasa,
por la descarboxilación de la lisina se producirá una amina, la cual neutralizará el
ácido producido por la fermentación de la glucosa retornando el medio a su color
original violeta.

La lisina es utilizada por las enzimas descarboxilasa y desaminasa. La lisina al ser


descarboxilada, se produce cadaverina y se libera CO2, lo que incrementa el pH
del medio y el indicador (púrpura del bromocresol) vira a violeta. La desaminación
de la lisina a ácido alfa cetocarbónico, forma compuestos pardo-rojizos en el pico
de flauta del medio con el citrato de hierro. La acción de las enzimas tiosulfato
reductasa y cisteína desulfurilasa forman H2S que al estar en presencia del citrato
de hierro y amonio, forman un precipitado negro.

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Caldo Lisina Descarboxilasa se utiliza para detectar y diferenciar enterobacterias


de otros microorganismos, basándose en la descarboxilación de la lisina. La
peptona de gelatina proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos
esenciales para el crecimiento. El extracto de levadura es una fuente de vitaminas,
en particular del grupo B. La dextrosa es el hidrato de carbono fermentable. El
púrpura de bromocresol es el indicador de pH. La lisina se agrega para detectar la
producción de la enzima específica. Cuando el medio se inocula con una bacteria
que puede fermentar dextrosa, el ácido producido reduce el pH del medio y el color
del indicador cambia de púrpura a amarillo. La condición ácida también estimula la
actividad descarboxilasa. Las bacterias que descarboxilan la L-lisina en cadaverina
se identifican por la presencia de un color
rojo púrpura. La producción de estas
aminas eleva el pH del medio. Un color
amarillo después de 24 horas indica un
resultado negativo. Al sustituir la L-lisina
por arginina u ornitina, se puede utilizar el
nuevo medio resultante (Base de Caldo
Falkow) para estudiar la descarboxilación
de estos aminoácidos.
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3. Menciona a las enterobacterias H2S positas, móviles y que desaminan


la lisina.

• Salmonella typhi

• Salmonella cholerasuis

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4. ¿Qué otro medio de cultivo, diferente al MIO, se puede utilizar para


determinar la movilidad?

Prueba de Sulfuro Indol Movilidad SIM

Prueba de Manitol Movilidad Nitratos

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5. ¿Cuál es la reacción entre el indol y el reactivo de Kovac’s?

El reactivo de Kovacs está diseñado para la demostración de producción de indol


por bacterias que poseen una triptofanasa (bacterias Gram (-), especialmente
Enterobacteriaceae)

Las bacterias que poseen una triptofanasa son capaces de degradar el triptófano
a indol. Cuando reacciona con este indol, el reactivo Kovacs se vuelve de un color
rojo cereza.

El Reactivo de Kovac es un reactivo utilizado para la detección de indol microbiano.


Las bacterias que poseen la enzima triptofanasa son capaces de rompear y
desaminar el triptófano provocando la síntesis de indol. La prueba del indol se basa
en la formación de un colorante rojo oscuro cuando el indol liberado reacciona con
el 4-dimetilaminobenzaldehído. La producción de indol es una característica
importante en la identificación de muchos microorganismos, especialmente E. coli
(+) de entre otras enterobacterias. Para la detección de indol, los microorganismos
deben cultivarse aeróbicamente en un ambiente libre de glucosa con abundante
triptófano. El agua peptonada es particularmente adecuada como sustrato en el
estudio de la producción de indol. Una reacción positiva se distingue por la
aparición de un color rojo rosado en la parte superior del tubo. Las reacciones
negativas permanecen incoloras o ligeramente amarillas.

Las bacterias que poseen la enzima triptofanasa son capaces de romper y


desaminar el triptófano provocando la síntesis de indol. La prueba del indol se basa
en la formación de un colorante rojo oscuro cuando el indol liberado reacciona con
el 4-dimetilaminobenzaldehído. La producción de indol es una característica
importante en la identificación de
muchos microorganismos,
especialmente E. coli (+) de entre
otras enterobacterias.
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Bibliografía

Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de importancia clínica. Jean


F. MacFaddin. Ed. Médica Panamericana, 2003

Manual de pruebas bioquimicas. UNAM.

Condalap. Caldo Lisina Descarboxilasa. Recuperado de:


file:///D:/Usuario/Downloads/1208_es_1.pdf

Condalap. Reactivo de Kovac. Recuperado de:


file:///D:/Usuario/Downloads/5205_es_1.pdf

Rodríguez F. Prueba de la Lisina Descarboxilasa. Recuperdo de:


https://www.franrzmn.com/prueba-de-la-lisina-descarboxilasa/

Lopardo H.A. Bacterias de Importancia Clínica. MANUAL DE MICROBIOLOGÍA


CLÍNICA DE LA ASOCIACIÓN ARGENTINA DE MICROBIOLOGÍA. Recuperdo de:
https://www.aam.org.ar/descarga-archivos/Parte21Enterobacterias.pdf

KOVAKS. DEMOSTRACIÓN DE LA PRODUCCIÓN DE INDOL. Recuperdo de:


https://www.bio-rad.com/webroot/web/pdf/inserts/CDG/es/55313_2015_01_ES.pdf

Elmer W. Koneman, Stephen Allen. Diagnostico Microbiologico. Ed. Médica


Panamericana, 2008.

Pruebas bioquímicas de identificación de bacterias. Recuperdo de:


https://www2.ulpgc.es/hege/almacen/download/35/35729/pruebas_bioquimicas_de
_identificacion_de_bacterias.pdf

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