Absorbancia Ley de BEER LAMBERT

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LEY DE BEER-LAMBERT

La espectrometría UV-Vis se utiliza con mayor frecuencia en forma cuantitativa para determinar
las concentraciones de especies absorbentes en solución, usando la Ley de Beer-Lambert:

 I 
A   log10     log10 T   ·c · l
 Io 
donde: A es la absorbancia medida
ε = Coeficiente de extinción molar, es una constante relacionada con el área de incidencia
del cromóforo y la probabilidad de de que produzca la absorción.

l = recorrido en cm de la radiación a través de la muestra


c = concentración de la muestra en moles/litro
Io es la intensidad de la luz incidente a una determinada longitud de onda
I es la intensidad de transmisión.
T es la transmitancia

Ejercicio 1

¿Cuál es la absorbancia de una disolución que presenta una transmitancia del 30%
a una longitud de onda de 640 nm?

Solución:

Para resolverlo, basta con acudir a las definiciones de absorbancia y transmitancia.

%T= 30

T= (30/100)= 0,3

Y sabiendo que A=-LogT, el cálculo es directo:

A= -Log 0,3= 0,5228

Notese que carece de unidades.


Ejercicio 2

Si la disolución del ejercicio anterior consiste de una especie W cuya concentración


es 2,30∙10-4 M, y suponiendo que la celda tiene un grosor de 2 cm: ¿cuál debe ser
su concentración para obtener una transmitancia del 8%?

Solución:

Se pudiera resolver directamente con esta ecuación:

-LogT= εlc

Pero, se desconoce el valor de ε. Por lo tanto, hay que calcularlo con los datos
anteriores, y se asume que permanece constante en un amplio rango de
concentraciones:

ε = -LogT/lc

= (-Log 0,3)/ (2 cm x 2,3∙10-4 M)

=1136,52 M-1∙cm-1

Y ahora, sí se puede proceder al cálculo con %T=8:

c = -LogT/εl

= (-Log 0,08)/ (1136,52 M-1∙cm-1 x 2cm)

=4,82∙10-4 M

Entonces, basta con que la especie W duplique su concentración (4,82/2,3) para


disminuir su porcentaje de transmitancia de 30% a 8%.
Ejercicio 3
Una disolución 100 µM de un determinado cromóforo tuvo una transmitancia a 525 nm de 0.5 cuando
se midió en una celda 1.5 cm de longitud. Calcular: a) la absorbancia de la disolución; b) la
absorptividad molar del cromóforo

Solución:

a) A = -log T = - log 0.5 = 0.301

b) A = C . . L Reordenando la ecuación obtendremos:

= A/(C x L) = 0.301 /(10-4 M x 1.5 cm) = 2 x 103 M-1 cm-1

Ejercicio 4
Una disolución patrón de níquel 5.00 x 10-5 M se coloca en una cubeta de longitud de paso 1 cm. La
absorbancia a 592 nm es 0.446. a) ¿Cuánto vale a 592 nm?. b) Si una disolución problema de níquel
tiene una absorbancia de 0.125 a la misma ¿cuál es la concentración de níquel en la muestra?.

Solución:

a) Dado que A = C . . L. Entonces 0.446 = 5 x 10-5 M x 1 cm x y deducimos = 8920 M-1 cm-1

b) Aplicando que A = C . . L. 0.125 = 8920 M-1 cm-1 x 1 cm x C; y por lo tanto C= 14 µM

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