Esterilización Autoclave

Técnicas generales Procedimiento Normalizado de Trabajo (PNT) 11/11/22
de Laboratorio
Práctica nº 7: Esterilización en autoclave
1. Objetivos
Conocer los procedimientos previos para la esterilización de diversos materiales de
laboratorio en el autoclave. Preparar el autoclave la esterilización así como los valores
óptimos para una correcta esterilización y pasos a seguir para evitar ocasionar un
accidente.
2. Fundamento teórico
- Autoclave: equipo para esterilizar material de laboratorio. Calienta el agua
destilada de su interior para que se convierta en vapor. Este vapor de agua
produce un aumento de la presión en el interior, por lo que aumenta la
temperatura de ebullición. El proceso de esterilización, a 121ºC y 103ºC.
- KPa: unidad de medición de la presión

- Indicador químico: sustancias empleadas para controlar uno o más parámetros
del proceso de esterilización con el propósito de detectar fallos en el paquete,
carga o función del esterilizador
- Calor húmedo: método térmico de esterilización para eliminar
microorganismos
3. Materiales
Materiales y reactivos
EPI: bata y guantes (térmicos y normales)
Espátulas
Cucharas
Pinzas de metal
Puntas de micropipetas
Tubos eppendorf
Tubos de ensayo
Agua destilada
Autoclave
4. Procedimiento
En función del material que se desee de esterilizar encontraremos diversas
preparaciones:
- Las cucharas y los utensilios de metal se empaquetan en bolsas adecuadas y se
termosellan por los bordes con una termoselladoras. Estas bolsas presentan
unos indicadores químicos de esterilización que cambian de color si se ha
alcanzado la temperatura de esterilización
- Los tubos eppendorf se meten en tarros de cristal sin cierre hermético, es decir,
dejaremos la tapa puesta y con media vuelta de tuerca con el objetivo de que
penetre el vapor en el interior
- Las puntas de micropipetas se meten en sus respectivas cajas transparentes y
se precinta con cinta, un indicador químico de esterilización, sin cerrar
herméticamente.
Para la preparación del autoclave se deben de seguir el siguiente procedimiento:

- Nos aseguramos que la llave del agua esté cerrada y se llena agua destilada
hasta la zona inferior a la cestilla, lugar donde se encuentra la resistencia.
- Se colocan los instrumentos en la cestilla del autoclave siguiendo las
instrucciones previamente explicadas.
- Se cierra la tapa y se programa la temperatura a 121ºC y el tiempo 20 min a
103 KPa.
- Abrimos la llave del vapor para purgar, ponemos en marcha el autoclave y
dejamos que salga algo de vapor por el conducto y se cierra la llave de vapor.
- La temperatura y la presión subirán rápidamente hasta alcanzar el máximo.
- Transcurrido el tiempo marcado, se puede abrir un poco la llave de vapor, para
que se iguale la presión y la temperatura baje.
- Cuando llegue a la temperatura por debajo de 90ºC y la presión del autoclave
se iguale a la presión atmosférica se podrá abrir el autoclave.
- Con unos guantes de seguridad se saca los materiales del autoclave y se
verifica que los indicadores químicos hayan cambiado de color, confirmando
que el proceso de esterilización ha sido realizado.
5. Observaciones
Para asegurarnos que se alcance la temperatura indicada y alcance las condiciones de
esterilización, se incorporan unas cintas adhesivas a los objetos que se han de
esterilizar. Estas cintas son unos indicadores químicos que cambian a color negro si se
llega a la temperatura y presión adecuada. Sin embargo, no garantiza que estas
condiciones se hayan producido durante el periodo de tiempo suficiente como para
esterilizar el material
La zona inferior de la cestilla se deberá de llenar con agua destilada para así impedir
la formación de cal.
Técnicas generales Procedimiento Normalizado de Trabajo (PNT) 03/11/22
de Laboratorio
Práctica nº 8: Limpieza de los equipos del laboratorio
1. Objetivos
Conocer los métodos de limpieza para asegurar una correcta limpieza de los distintos
equipos del laboratorio.
2. Responsabilidad de aplicación y de alcance

Recae sobre mí mismo, Raúl Martín Marín y del profesor Francisco Solano Jiménez
Guzmán.
3. Fundamento teórico
Baño termostático: proporcionan un calentamiento indirecto: el equipo calienta un
elemento intermedio (agua, aceite o arena) en el que se ha colocado un recipiente con
el producto.
Loción:
Desinfección:
Tensioactivo: se unen a la suciedad y facilitan la eliminación de estos.
Secuestradores iónicos: se une a los iones para permitir la máxima efectividad de los
tensioactivos. Se usan principalmente en aguas duras.
4. Materiales
Materiales y reactivos
EPI: bata y guantes
3 bayetas (húmeda con detergente,

húmeda y seca)
Brocha
Baño termostático
Detergente
Agua
5. Procedimiento
Limpieza del baño termostático por loción
- Colocalos el papel de filtro sobre la superficie de trabajo donde se va a colocar
el aparato para su limpieza
- Limpiar el polvo de la superficie exterior mediante el uso de una brocha
- Desenchufar el equipo antes de proceder a limpiarlo. Si es posible, separar los
componentes eléctricos.
- La superficie exterior se limpiará con un bayeta húmeda con detergente.
Posteriormente se la pasará una bayeta húmeda y se finalizará con el secado
con una bayeta
- Una vez limpiado el instrumento, se debe comprobar si funciona
correctamente, enchufar a la corriente eléctrica.
6. Observaciones e incidencias
Previamente se deberá limpiar el polvo del equipo para facilitar la limpieza por
loción. En nuestro caso no ha sido necesario la comprobación posterior del aparato ya
que implicaría el llenado de este con agua.

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Práctica nº 7: Esterilización en autoclave

- KPa: unidad de medición de la presión

EPI: bata y guantes (térmicos y normales)

Para la preparación del autoclave se deben de seguir el siguiente procedimiento:

Práctica nº 8: Limpieza de los equipos del laboratorio

2. Responsabilidad de aplicación y de alcance

EPI: bata y guantes

3 bayetas (húmeda con detergente,

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