Jaruizd - Guía Práctica Enterobacterias

Descargar como pdf o txt
Descargar como pdf o txt
Está en la página 1de 4

BACTERIOLOGÍA DETERMINATIVA (24981)

PRACTICA No.7
LABORATORIO DE ENTEROBACTERIAS

INTRODUCCIÓN

Se conoce como “Enterobacterias” a un grupo de bacilos


Gram negativos que pueden ser aislados de suelo, aguas y
alimentos, pero también del tracto digestivo de seres
humanos y animales tal y como su nombre indica.

Los enterobacteriales clínicamente se han identificado como


el agente etiológico detrás de cuadros tan variados como
infecciones de abscesos, diarreas agudas, neumonías,
infecciones del tracto urinario, entre otros.

Una manifestación potencialmente letal de la infección por


enterobacterias es el shock endotóxico ocasionado por una Tomado de: https://www.luciacangussu.bio.br/atlas/escherichia-coli/
toxina de polisacárido contenida en la pared celular de estas
bacterias. Su actividad biológica puede ocasionar fiebre, leucopenia, hemorragia capilar, hipotensión
y colapso circulatorio en el hospedero infectado.

Además, su permanente contacto con la clínica y la plasticidad de su código genético les ha permitido
desarrollar y diseminar una diversidad creciente de formas de resistencia a antibióticos. En los
últimos 20 años se ha visto el surgimiento de cepas resistentes a antibióticos a los que tenían previa
sensibilidad, disminuyendo las opciones terapéuticas contra estas infecciones. Usualmente, estos
bacilos Gram negativos son portadores de un plásmido R de fácil diseminación en el cual portan las
secuencias codificantes para las resistencias, como lo pueden ser la β-lactamasas, que confieren
resistencia a diferentes grupos de antibióticos de tipo β-lactámicos.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

- Observar y describir las características macroscópicas y microscópicas de las especies de


enterobacteriales.
- Identificar las diferentes especies de enterobacteriales partiendo de su morfología y
comportamiento metabólico evidenciado por un conjunto de pruebas bioquímicas y
tinciones correspondientes.

CONTENIDO DE LA PRÁCTICA

Materiales y reactivos:
- Asa recta y curva - Medios de cultivo: Agar MaConkey, Agar
- Gradilla eosina-azul de metileno (EMB), Agar
- Elementos de protección personal Salmonella-Shigella (SS), agar xilosa-lisina-
- Láminas portaobjetos desoxicolato XLD, Hecktoen entérico,
- Encendedor bismuto sulfito, agar nutritivo, triple-azúcar
- Microscopio hierro (TSI), Lisina-hierro agar (LIA), medio
- Aceite de inmersión fenilalanina (PPA).

TRABAJO DE LABORATORIO

A. MEDIOS DE CULTIVO EMB, BISMUTO SULFITO, XLD, SS, HECKTEN ENTÉRICO Y


NUTRITIVO

Procedimiento:

Sembrar los diferentes medios por agotamiento.

B. OXIDASA.

Procedimiento:

1. Sobre una lámina porta objetos ubicar una cinta para


detección del complejo citocromooxidasa. Tomado de: https://theory.labster.com/biochemical-identification-bacteria-
es/
2. Tomar una colonia con un palillo y depositarla sobre el
recuadro para pruebas de la cinta.
3. Observar el cambio de color en la colonia.
C. PRUEBA DNAsa:

Procedimiento:
1. Utilizar un medio de cultivo que contenga ADN (agar DNasa) y un colorante que interacciona con
el ADN polimerizado como el azul de toluidina.
2. Tomar varias colonias a partir de un aislamiento puro y hacer una siembra en el agarDNasa en forma
de estría gruesa.
3. Emplear S. aureus como control positivo
4. Incubar a 35°C por 24 horas.

D. PRUEBAS MRVP, MALONATO, BATERÍA DE AZÚCARES Y AMINOÁCIDOS.

Procedimiento:
Inocular por medio de transferencia de colonias.

E. TSI Y LIA

Procedimiento:
1. Tomar una colonia aislada y sembrar el medio TSI por punción centrada con un asa recta hasta tocar
el fondo del tubo y por estría en el pico de flauta (tendido).
2. Incubar 24 horas a 35°C.
3. Analizar los resultados.

F. UREASA, PPA Y CITRATO

Procedimiento:
1. Tomar una colonia e inocular con estría única en el pico de flauta
2. Incubar a 35°C por 18-24 horas.
3. Analizar los resultados.

G. MOTILIDAD E INDOL

Procedimiento:
1. Tomar una colonia aislada y sembrar por punción centrada con un asa recta a una profundidad de 1
cm de un agar de motilidad en tubo.
2. Incubar de 18-24 horas a 35°C.
Tomado de: https://es.scribd.com/document/328449270/tabla-de-identificacion-enterobacterias

BIBLIOGRAFÍA

Winn. Allen. Koneman. Prokop. Schreckenberger. Woods. “Koneman: Diagnóstico microbiológico”. Sexta
edición. Capítulo 6 “Enterobacteriaceae”.

También podría gustarte