Informe de Laboratorio #2 PDF
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INTEGRANTES
Blanca Susana Cujia Castro
Andrea Carolina Barraza Llamas
Vanessa Cecilia Mejía Cardiles
Herlis Yamile Trespalacios Gutiérrez
DOCENTE
Yiceth Katherine Acosta Triana
UNIVERSIDAD DE SANTANDER
INFECTOLOGÍA / V SEMESTRE
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
MEDICINA
VALLEDUPAR /CESAR
2022
RESUMEN
En esta práctica se realizarán distintos tipos de pruebas las cuales podemos diferenciar los
grupos y géneros los cuales deseamos estudiar
Los estafilococos son microorganismos aerobios Gram positivos. El más patogénico de ellos
es el Staphylococcus aureus, que típicamente causa infecciones de la piel y a veces
neumonía, endocarditis y osteomielitis. En general se lo asocia con la formación de
abscesos
ABSTRACT
In this practice different types of tests will be performed which can differentiate the groups
and genders which we want to study
Most Streptococcus species are facultative anaerobes, and some grow only in an
atmosphere enriched with carbon dioxide (carboxylic bacteria). Their nutritional requirements
are complex, and their isolation requires the use of media enriched with blood or serum.
They are capable of fermenting carbohydrates producing lactic acid and are also catalase
negative unlike staphylococci.
INTRODUCCIÓN
DESARROLLO EXPERIMENTAL
MATERIALES:
● Cultivos
● Mechero
● Microscopio
● Asa de siembra
● Portaobjetos
● Solución salina
● Cristal Violeta
● Lugol
● Alcohol acetona
● Fucsina
● Aceite de inmersión
● Cepas bacterianas: S.aureus , S.haemolyticus (estafilococos) y S.pyogenes (
estreptococos).
PROCEDIMIENTO:
MATERIALES
● 3 portaobjetos
● Peróxido de hidrógeno
● Cultivos de bacterias:S.aureus,S.faecium y S.agalactiae
● Hisopo de algodón
PROCEDIMIENTO:
➢ PRUEBA DE LA COAGULASA
MATERIALES:
● Mechero
● Asa de siembra
● Cultivos puros:S.aureus y S.epidermidis
● 2 tubos de 0,5 ml de plasma citratado
PROCEDIMIENTO:
1. Flamear asa de siembra
2. Enfriar el asa de siembra
3. Usar un cultivo de siembra para tomar una muestra de la bacteria
4. Abrir tubo que contiene el plasma citratado para flamear su boca
5. Introducir la muestra dentro del tubo que contiene el plasma
6. Flamear la boca del tubo y cerrarlo
7. Llevar el tubo a incubar a 35° por 24 h
8. Observar después de las 24h para ver si hay presencia del coágulo o no.
PROCEDIMIENTO:
1. Utilizar el mechero para flamear el asa de siembra para esterilizar.
2. Cortar a la mitad en el agar DNAsa con el asa de siembra para separar las dos
muestras bacterianas que se van a cultivar.
3. Abrir el cultivo y recoger una muestra con un hisopo de algodón.
4. Posteriormente de tomar la muestra bacteriana en el hisopo ,introducirla en el agar
DNAsa y con el hisopo que contiene las bacterias sembrar la colonia de
estafilococos en forma de estría y botón.
5. Incubar por 18 h a 35°.
MATERIALES:
● Agar sangre
● Asa de siembra
● Cepas bacterianas:S.saprophyticus y un S.epidermidis
● Hisopo de algodón
● Mechero
● 2 disco de novobiocina
● Pinzas
Discos de novobiocina
PROCEDIMIENTO:
1. Utilizar el mechero para flamear el asa de siembra para esterilizar.
2. Cortar a la mitad en el agar sangre con el asa de siembra para separar las dos
muestras bacterianas que se van a cultivar.
3. Abrir la cepa y recoger una muestra con un hisopo de algodón.
4. Posteriormente de tomar la muestra bacteriana en el hisopo ,introducirla en el agar
sangre y con el hisopo que contiene las bacterias sembrar la colonia de
estafilococos realizando un barrido.
5. Flamear las pinzas
6. Usar las pinzas para tomar los discos de novobiocina e insertarlos en cada medio de
cultivo del agar sangre.
7. Incubar a 35° por 18 horas.
MATERIALES:
● Agar- Manitol Salado
● Mechero
● Asa de siembra
● Bacterias cocos Gram (+) : S.aureus y S.haemolyticus.
● Asa de siembra
● Hisopo de Algodón
PROCEDIMIENTO:
1. Flamear el asa de siembra
2. Cortar a la mitad el agar-manitol salado con el asa de siembra para separar las dos
muestras bacterianas que se van a cultivar.
3. Abrir la cepa y recoger una muestra con un hisopo de algodón.
4. Posteriormente de tomar la muestra bacteriana en el hisopo ,introducirla en el
agar-manitol salado y con el hisopo que contiene las bacterias sembrar la colonia de
estafilococos realizando un barrido.
5. Incubar a 35° por 24 horas.
MATERIALES:
● 2 discos de bacitracina
● Un agar sangre
● Un hisopo de algodón
● Pinzas
● Cultivos:S.pyogenes y S.agalactiae.
PROCEDIMIENTO:
1. Flamear el asa de siembra para esterilizar
2. Cortar a la mitad el agar sangre con el asa de siembra para separar las dos
muestras bacterianas que se van a cultivar.
3. Abrir la cepa y recoger una muestra con un hisopo de algodón.
4. Posteriormente de tomar la muestra bacteriana en el hisopo ,introducirla en el agar
sangre y con el hisopo que contiene las bacterias sembrar la colonia de
estreptococos realizando un barrido en varias direcciones.
5. Esterilizar la pinza y tomar un disco de bacitracina para transferirlo a dentro de la
muestra de cultivo.
6. Incubar por 24 horas a 37°.
MATERIALES:
● 2 tubos de agar bilis esculina
● Cepas bacterianas:E.faecalis y S.pyogenes.
● Asa de siembra
● Mechero
PROCEDIMIENTO:
1. Flamear el asa de siembra .
2. Abrir la cepa e introducir el asa en una de sus esquinas que no contenga colonia
para enfriar la.
3. Recoger una muestra de la bacteria con el asa de siembra.
4. Abrir el tubo de agar de bilis esculina flamear la boca e introducir el asa que contiene
la muestra para cultivar las bacterias dentro del tubo.
5. Flamear la boca del tubo y cerrar.
6. Incubar por 24 h a 35°.
➢ PRUEBA DE CAMP
MATERIALES:
● Cepas de cultivo:S.agalactiae y S.pyogenes.
● Un agar sangre
● Mechero
● Asa de siembra
● Hisopo de algodón
PROCEDIMIENTO:
1. Flamear el asa de siembra para esterilizar
2. Cortar a la mitad el agar sangre con el asa de siembra para separar las dos
muestras bacterianas que se van a cultivar.
3. Abrir la cepa y recoger una muestra con un hisopo de algodón.
4. Posteriormente de tomar la muestra bacteriana en el hisopo ,introducirla en el agar
sangre y con el hisopo que contiene las bacterias sembrar la colonia de los
estreptococos realizando un estriado en forma perpendicular a una estría.
5. Incubar a 37° por 24 horas.
MATERIALES:
● Cepas bacterianas:E.faecalis y S.pyogenes.
● Asa de siembra
● Mechero
● 2 tubos de caldo salado
● Mechero
PROCEDIMIENTO:
1. Flamear el asa de siembra .
2. Abrir la cepa e introducir el asa en una de sus esquinas que no contenga colonia
para enfriar la.
3. Recoger una muestra de la bacteria con el asa de siembra.
4. Abrir el tubo de caldo salado , flamear la boca e introducir el asa que contiene la
muestra para cultivar las bacterias dentro del tubo.
5. Flamear la boca del tubo y cerrar.
6. Incubar a 35° por 24h
MATERIALES:
● Cepas de cultivo:S.pneumoniae y S.viridans.
● Un Agar sangre
● 2 discos de optoquina
● Asa de siembra
● Hisopo de algodón
PROCEDIMIENTO:
1. Utilizar el mechero para flamear el asa de siembra para esterilizar.
2. Cortar a la mitad el agar sangre con el asa de siembra para separar las dos
muestras bacterianas que se van a cultivar.
3. Abrir la cepa y recoger una muestra con un hisopo de algodón.
4. Posteriormente de tomar la muestra bacteriana en el hisopo ,introducirla en el agar
sangre y con el hisopo que contiene las bacterias sembrar la colonia de
estreptococos realizando un barrido en varias direcciones .
5. Flamear las pinzas.
6. Usar las pinzas para tomar los discos de optoquina e insertarlos en cada medio de
cultivo.
7. Incubar por 24 h a 37°.
RESULTADOS
Morfología
microscópica
Prueba de catalasa
Cepa N°1: S. Cepa N°2: E. Cepa N°3: S.
aureus faecium agalactiae
Prueba de DNAsa
Cepa N°1: S. aureus Cepa N°2: S. haemolyticus
DISCUSIÓN
En la prueba de DNAsa, luego de cubrir la placa con ácido clorhídrico 1N, después de 5
minutos se observó la formación de un halo claro, transparente alrededor del crecimiento
del S. aureus, este es un DNAsa positivo debido a que el ácido desoxirribonucleico presente
en este microorganismo es polimerizado, a diferencia del S. haemolyticus que no contiene
esta enzima, por lo que es un DNAsa negativo. Por consiguiente, al realizar el test de
susceptibilidad a la novobiocina, en la muestra de S. epidermidis se observó un halo de
inhibición alrededor del disco de novobiocina, esto muestra la sensibilidad del
microorganismo ante este antibiótico pues no puede crecer en presencia de él; en cambio,
el S. saprophyticus si es resistente a la novobiocina pero en la prueba no se pudo observar
ya que se tomó poca muestra del organismo bacteriano.
La prueba de tolerancia a la sal no se pudo observar bien debido a que se tomó poca
muestra de E. faecalis, este enterococo debía mostrar turbidez pues es capaz de crecer en
concentraciones de NaCl; la otra muestra, S. pyogenes, tampoco tuvo turbidez porque no
tiene la misma capacidad del enterococo mencionado anteriormente. Por último, en la
prueba de optoquina se evidenció que el S. viridans es resistente pues crece alrededor de la
optoquina por lo que no se muestra un halo de inhibición; por el contrario, el S. pneumoniae
es sensible debido a que no puede crecer ante la presencia de optoquina.
CONCLUSIÓN
BIBLIOGRAFÍA
1. Fariña N ; Sanabria R ; Figueredo L ; Ramos ; Samudio.2005.Staphylococcus
saprophyticus como patógeno urinario.Scielo.Mem. Inst. investigando Cienc. Salud
vol.3 no.1 Asunción Dic. 2005.Encontrado
en:http://scielo.iics.una.py/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1812-952820050
00100008#:~:text=La%20prueba%20del%20disco%20de,saprophyticus%2C%20
Infecci%C3%B3n%20urinaria%2C%20Mujeres.