Tesis Aldana Barco

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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS Y


BIOQUÍMICA

TESIS

“ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DEL EXTRACTO DE LA FLOR DE


OVERO “Cordia lutea Lam” EN Staphylococcus aureus.”

PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL DE


QUÍMICO FARMACÉUTICO

AUTORES:
Bach. Aldana Juárez Luis Alberto

Bach. Barco Montalvo Hector Francisco

ASESOR:
Mg. Antonio Fernando Quezada Reyes

LÍNEA DE INVESTIGACIÓN:

Recursos Naturales

Huancayo – Perú
2021
Dedicatoria

Con todo mi amor a mi familia: Aldana Custodio


dedico esta tesis, en especial para: María Rosa
Isabel Juárez Bautista y Evaristo Aldana
Martínez, mis señores padres, por su apoyo moral
y económico razón para realizarme como
profesional. Y para quien esta siempre en mi
corazón, mi esposa.

Luis Alberto Aldana Juárez.

Con mucho cariño para mi familia en primer


lugar a mis padres, por ser uno de los pilares
fundamentales que con sus consejos y enseñanzas
fueron trazando el camino para lograrlo. A mi
esposa, gracias por su apoyo incondicional que en
los momentos difíciles me dio la fortaleza
suficiente para lograr esta meta.

Hector Fernando Barco Montalvo.

ii
Agradecimiento

En primer lugar, agradecemos a nuestro Divino


hacedor por darnos la sabiduría en nuestra
investigación y permitirnos en este espacio de la
vida alcanzar esta meta.

Así mismo a la Universidad, por darnos la


oportunidad que con sus docentes los fueron los
artífices en este proceso de nuestra formación
profesional en su inicio.

Agradecer profundamente a la Universidad

Privada de Huancayo “Franklin Roosevelt”, por

aceptar y permitirnos la culminación de la carrera

profesional recibiendo el apoyo junto al

otorgamiento de conocimientos a través de sus

docentes especializados en las diferentes carreras

profesionales en especial en la de Farmacia y

Bioquímica.

iii
iv
v
DECLARACION JURADA SIMPLE

Yo, Luis Alberto Aldana Juárez, de Nacionalidad Peruana, identificado con, DNI Nº

17537983, Tesista de la Universidad Privada de Huancayo Franklin Roosevelt,

Bachiller en Farmacia y Bioquímica, domiciliado en José Olaya N° 537 P.J. San

Martin - Lambayeque. DECLARO BAJO JURAMENTO: QUE TODA LA

INFORMACIÓN PRESENTADA ES AUTÉNTICA Y VERAZ. Me afirmo y me

ratifico en lo expresado en señal de lo cual firmo el presente documento a los 01 días

del mes de setiembre del 2021.

………………..…………………….

Luis Alberto Aldana Juárez

vi
DECLARACION JURADA SIMPLE

Yo, Hector Francisco Barco Montalvo, de Nacionalidad Peruana, identificado con,

DNI Nº 16618839, tesista de la Universidad Privada de Huancayo Franklin Roosevelt,

Bachiller en Farmacia y Bioquímica, domiciliado Av. Mariano Melgar Mz. V lote 3

San Francisco de Asis - Chiclayo, Lambayeque. DECLARO BAJO JURAMENTO:

QUE TODA LA INFORMACIÓN PRESENTADA ES AUTÉNTICA Y VERAZ.

Me afirmo y me ratifico en lo expresado en señal de lo cual firmo el presente

documento a los 01 días del mes de setiembre del 2021.

………………..…………………….

Hector Francisco Barco Montalvo

vii
ÍNDICE

Dedicatoria .............................................................................................................. ii
Agradecimiento ....................................................................................................... iii
ÍNDICE................................................................................................................. viii
RESUMEN ............................................................................................................ xii
ABSTRACT .......................................................................................................... xiii
I. INTRODUCCIÓN ........................................................................................... 14
II. MÉTODO ...................................................................................................... 22
2.1. Tipo y diseño de investigación ....................................................................... 22
2.2. Operacionalización de las variables ................................................................. 23
2.3. Población, muestra y muestreo ....................................................................... 23
2.4. Técnicas e instrumentos de recolección de datos, validez y confiabilidad ............. 24
2.5. Procedimiento .............................................................................................. 24
2.6. Método de Análisis de datos........................................................................... 26
2.7. Aspectos éticos ............................................................................................. 26
IV. DISCUSIÓN .................................................................................................... 32
V. CONCLUSIONES ............................................................................................. 34
VI. RECOMENDACIONES .................................................................................... 35
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ....................................................................... 36
ANEXOS .............................................................................................................. 39

viii
Índice de Tablas

Tabla 1. Análisis de los datos recolectados con respecto al tamaño del halo de inhibición de
los grupos experimentales y control. ......................................................................... 27
Tabla 2. Análisis de la distribución normal para cada grupo de tratamientos .................. 28
Tabla 3. Análisis de la homogeneidad de varianzas ..................................................... 29
Tabla 4. Análisis de la varianza (ANOVA) de los grupos de tratamientos ...................... 29
Tabla 5. Prueba Post Hoc de comparaciones múltiples ................................................ 30
Tabla 6. Análisis por subgrupos homogéneos de la prueba de Tukey ............................. 30
Tabla 7. Análisis de la sensibilidad de Staphylococcus aureus frente a los extractos
etanólicos de Cordia lutea Lam, según la escala de Duraffourd .................................... 31

ix
Índice de figuras

Figura 1. Análisis gráfico de los diámetros de los halos de inhibición según grupo de los
grupos experimentales y control ............................................................................... 28
Figura 2. Recolección de la muestra vegetal ............................................................... 54
Figura 3. Selección y separación de las flores ............................................................. 54
Figura 4. Desinfección y lavado de la muestra ............................................................ 55
Figura 5. Secado a temperatura ambiente ................................................................... 55
Figura 6. Secado en estufa ....................................................................................... 55
Figura 7. Secado a temperatura ambiente ................................................................... 56
Figura 8. Tamizado de la muestra pulverizada ............................................................ 56
Figura 9. Proceso de maceración 1 ............................................................................ 56
Figura 10. Proceso de maceración 2 .......................................................................... 57
Figura 11. Extracto seco obtenido luego de la evaporación del solvente ....................... 57
Figura 12. Preparación de los extractos ..................................................................... 57
Figura 13. Proceso microbiológico de activación y sembrado de la cepa ........................ 58
Figura 14. Medición de los halos de inhibición ........................................................... 58

x
Índice de anexos

Anexo 1. Matriz de consistencia ............................................................................... 47


Anexo 2. Operacionalización de las variables............................................................. 49
Anexo 3. Identificación taxonómica de la especie vegetal ............................................ 50
Anexo 4. Certificado de análisis de la cepa en estudio ................................................. 51
Anexo 5. Cuadro de registro de datos de tamaños de halo de inhibición producidos en
cepas de Staphylococcus Aureus .............................................................................. 53
Anexo 6. Fotografías que evidencian el trabajo de campo ............................................ 54

xi
RESUMEN

Objetivo: Demostrar la actividad antibacteriana el extracto etanólico de la flor de overo


“Cordia lutea Lam” frente a Staphylococcus aureus

Método: El estudio fue de tipo aplicado, prospectivo de diseño experimental con grupos
control negativo y positivo; la población de estudio fue la especie vegetal Cordia lutea
Lam. de la cual se obtuvo el extracto etanólico de las flores mediante el método de
maceración por 8 días en etanol de 96°, se empleó la cepa de Staphylococcus aureus
ATCC 25923 para determinar la actividad antibacteriana de los extractos al 100% y 75%
mediante el método de Kirby Bauer.

Resultados: El extracto de Cordia lutea Lam (flor de overo) al 100% presentó halo de
inhibición de 14,85mm + 0,35; al 75% fue de 12,64mm + 0,42; el control negativo (etanol)
obtuvo un halo de inhibición promedio de 6,21mm + 0,32 y el control positivo
(ciprofloxacino) fue de 23,93mm + 0,41; además, Staphylococcus aureus ATCC 25923
resulto ser sumamente sensible al ciprofloxacino, ser muy sensible al extracto de la flor de
overo al 100% y sensible a la concentración del 75%, además presentó sensibilidad nula al
control negativo (etanol).

Conclusión: El extracto etanólico de Cordia lutea Lam (flor de overo) a las


concentraciones de 100% y 75% presentó actividad antibacteriana frente a Staphylococcus
aureus ATCC 25923.

Palabras clave: Cordia lutea, Staphylococcus aureus, extracto etanólico, flor de overo,
antibacteriano.

xii
ABSTRACT

Objective: To demonstrate the antibacterial activity of the ethanolic extract of the "Cordia
lutea Lam" flower against Staphylococcus aureus.

Method: The study was of an applied, prospective experimental design with negative and
positive control groups; the study population was the plant species Cordia lutea Lam. from
which the ethanolic extract of the flowers was obtained by the method of maceration for 8
days in 96 ° ethanol, the Staphylococcus aureus ATCC 25923 strain was used to determine
the antibacterial activity of the extracts at 100% and 75% by means of the Kirby Bauer
method.

Results: The 100% Cordia lutea Lam extract (flower of overo) presented an inhibition halo
of 14.85mm + 0.35; at 75% it was 12.64mm + 0.42; the negative control (ethanol) obtained
an average inhibition halo of 6.21mm + 0.32 and the positive control (ciprofloxacin) was
23.93mm + 0.41; Furthermore, Staphylococcus aureus ATCC 25923 turned out to be
highly sensitive to ciprofloxacin, to be very sensitive to the 100% extract of the flower of
the monkey, and sensitive to the 75% concentration, and it also presented null sensitivity to
the negative control (ethanol).

Conclusion: The ethanolic extract of Cordia lutea Lam (monkey flower) at concentrations
of 100% and 75% showed antibacterial activity against Staphylococcus aureus ATCC
25923.

Key words: Cordia lutea, Staphylococcus aureus, ethanolic extract, monkey flower,
antibacterial.

xiii
I. INTRODUCCIÓN

La resistencia a los antibióticos es un problema de salud pública en el mundo, en las


últimas décadas, los beneficios para la salud de estos están bajo amenaza ya que muchos
antibióticos de uso común se han vuelto cada vez menos efectivos contra ciertas
enfermedades infecciosas, debido a que se usan indiscriminadamente, lo cual es la causa
principal de la resistencia a estos antibióticos.1

La OMS, reporta que la bacterias que han presentado mayor resistencia a los antibióticos
son S. pneumoniae, Salmonella spp, Escherichia coli y Staphylococcus aureus; además
clasifica a Staphylococcus aureus como prioridad alta por manifestar resistencia creciente a
los antibióticos.2

Según el estudio de Prevalencia de las Infecciones Nosocomiales en España (EPINE)


indica que la emergencia por cepas de microorganismos multirresistentes Gran positivos es
particularmente preocupante en el espacio intra-hospitalario, donde Staphylococcus aureus
en el siglo XXI, ha presentado dos cambios claros en su epidemiología: primero, un
número cada vez mayor de infecciones asociadas a la atención médica, particularmente en
endocarditis infecciosa e infecciones de dispositivos protésicos, y segundo, una epidemia
de infecciones de la piel y tejidos blandos asociadas a cepas con ciertos factores de
virulencia y resistencia a antibióticos β-lactamasa, además también hay cepas resistentes a
la meticilina, que provocan infecciones en niños y adolescentes.3

En el año 2016, en un Hospital de Urgencias de Brasil se pudo determinar que las muestras
de sangre, orina y secreción traqueal, son las que tienen mayor presencia de bacterias
resistentes a los antibióticos donde Staphylococcus aureus (23,08%), Staphylococcus
coagulasa negativo (26,15%), Citrobacter sp. (19,23%), Enterobacter sp. (10,77%) y
Pseudomonas sp. (7,69%) son las de mayor prevalencia en estas infecciones. Y que los
antibióticos más usados fueron: Vancomicina (21,7%), Piperacilina con Tazobactam
(24,55%), Ampicilina con Sulbactam (10.4%), Cefepima (18,43%) y Meropenem
(58,5%).4

Una investigación en Colombia, realizada por la Universidad de Caldas, se recolectaron


1991 aislamientos urinarios, el microorganismo más frecuentemente aislado fue E. coli con

14
un 62%, seguido de K. pneumoniae (8%), P. mirabilis (5%) y P. aeruginosa (4%). Se
encontraron altas tasas de resistencia a cefazolina, trimetoprim/sulfametoxazol,
ciprofloxacina y ampicilina/sulbactam. La resistencia a nitrofurantoína y fosfomicina al
igual que a carbapenémicos es baja para Escherichia coli. Los aislamientos de E. coli y K.
pneumoniae presentaron un porcentaje de betalactamasas de espectro extendido (BLEE)
del 8%, con una resistencia promedio a cefalosporinas de tercera generación (C3G) del
14% y 22%, respectivamente.5

En el Hospital docente las mercedes de la ciudad de Chiclayo, se aisló principalmente de


los pacientes que se encontraban en UCI, la bacteria S. Aureus, las cepas de esta bacteria
además eran productoras de Las β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) y con un
porcentaje elevado de resistencia a ciprofloxacino.6

Siendo la aparición de enfermedades infecciosas emergentes y reemergentes y además de


la fármaco-resistencia de bacterias, problemas de salud pública actual, es donde el presente
estudio busca brindar las bases para una alternativa de tratamiento basado en plantas
medicinales, a través de un extracto de la flor de overo “Cordia lutea lam” demostrando su
actividad antibacteriana sobre S. aureus y así generar un conocimiento que pueda servir
para disminuir la resistencia bacteriana de esta bacteria.

Teniendo como propósito la búsqueda de antecedentes respecto a las variables de análisis


se muestra los estudios a nivel nacional de Crisólogo G. (2020), en su investigación
titulada “Estudio comparativo del efecto cicatrizante de los geles de la flor de overo
(Cordia lutea), hoja de llanten (Plantago major) y mixto (Cordia lutea, Plantago major),
en herida inducida de mucosa palatina en conejo (Oryctulagus cuniculus). En la cual el
investigador presentó el objetivo de comparar el efecto cicatrizante de geles de Cordia
lutea y Plantago major en heridas inducidas en Oryctulagus cuniculus. En la ejecución del
trabajo presentaron la siguiente metodología en donde después de obtener los extractos de
las especies vegetales de Cordia lutea y Plantago major, procedieron a preparar los geles a
base de dichos extractos para luego colocar en la mucosa palatina de los Oryctulagus
cuniculus a quienes se les indujeron una herida para lo cual, luego colocaron los geles
durante 10 días y en una ficha de recolección de datos se observaron los progresos cada dos
días. Los resultados que encontraron después de los 10 días de tratamiento, fue que el
grupo correspondiente a los extractos de Cordia lutea no presentaron herida alguna y el
grupo correspondiente a Plantago major lo hicieron en 0.2 mm por lo que el autor

15
finalmente concluyo que los geles de Cordia lutea y Plantago major si tuvieron efecto
cicatrizante, especialmente el de Cordia lutea.7

Casio O. (2018), en su tesis titulada “Actividad antioxidante y contenido de polifenoles en


flor de Cordia lutea Lam (flor de overo)” estableció como objetivo indicar la propiedad
antioxidante y cantidad de polifenoles en flor de Cordia lutea Lam (Flor de Overo). En su
metodología se realizó una extracción metanólica de la flor de overo y se determinaron
polifenoles por el método de Follin Ciocalteu, su propiedad antioxidante según la técnica
de secuestro de radicales libres DPPH. Los resultados que el investigador obtuvo fue que el
contenido de polifenoles en flores de Cordia lutea Lam es de 50.80 ± 1.56 mg de catequina
Equivalente/g de flor seca, y para la propiedad antioxidante en las flores de Cordia lutea
Lam se obtuvo 150 ±12.99 mM con respecto al Trólox Equivalente/g de flor seca. El autor
concluyó que las flores de Cordia lutea Lam presentaron polifenoles y característica
antioxidante.8

Castro I. (2016), elaboró una tesis “Aislamiento biodirigído y caracterización de


compuestos Anti-Helicobacter Pylori a partir de una planta usada en la medicina
tradicional peruana”, el objetivo planteado fue realizar el aislamiento biodirigído y
caracterización de uno a más compuestos anti-Helicobacter Pylori a partir de las flores de
Cordia lutea Lam. Para su metodología elaboró un extracto etanólico de Cordia lutea
Lam. y el fraccionamiento dirigido para evaluar la actividad anti-Helicobacter Pylori se
realizó por el método de microdilución en caldo, para la caracterización de compuestos
químicos presentes en las fracciones se realizó por cromatografía liquida acoplada a
espectrometría de masas (HPLC-MS). Se aislaron tres fracciones purificadas y su CMI fue
31.3µg/ml sobre Helicobacter Pylori; las tres fracciones presentaron actividad anti-
Helicobacter Pylori y el análisis de HPLC evidenció la presencia de saponinas
esteroidales y 6 compuestos con núcleo esteroidal en común (4α,14α-dimetilesterol). Las
conclusiones fueron que las tres fracciones de los extractos etanólicos de Cordia lutea L.
tienen buena actividad in vitro anti Helicobacter Pylori y los compuestos encontrados en
cada extracto fueron saponinas con núcleo esteroidal.9

A nivel Internacional se presenta el estudio de Debiasi B., Raiser A., Dourado S., Torres
M., Andrighetti C. et al. (2021), “Cribado fitoquímico de extractos de Cordia glabrata y
sus posibles actividades antioxidantes, fotoprotectoras, antimicrobianas y antivirales”,
tuvo por objetivo evaluar el perfil en extractos etanólicos de las hojas de Cordia glabrata

16
su efecto antioxidante, fotoprotector, antimicrobiano y antiviral. Para la metodología se
obtuvo el extracto por maceración en frio con etanol, la actividad antimicrobiana se
verificó por el método de microdilución en caldo sobre cepas de Staphylococcus aureus y
los resultados se leyeron en un espectrofotómetro a 630nm. el cribado fitoquímico se
realizó mediante TLC (Cromatografía de Capa Fina), HPLC y Cromatografía de gases,
para evaluar el poder antioxidante se utilizaron los radicales DPPH y ABTS. En los
resultados se comprobó la presencia de flavonoides, taninos, terpenos, ácido cafeico, hubo
actividad antioxidante y fotoprotectora, no se observó actividad sobre Staphylococcus
aureus, con una CMI de 2000μgmL, sin embargo, el ensayo antiherpético contra el virus
Herpes simplex tipo 2 (HSV-2) mostró una potente actividad viricida. Se concluyó que los
extractos mostraron una potencial acción fotoprotectora, antioxidante y viricida.10

Araujo O. (2019), en su investigación “Potencial antibacteriano de cordiaquinonas


obtenidas de Cordia polycephala”, el objetivo planteado fue evaluar la actividad
antibacteriana de las cardioquinonas obtenidas de Cordia polycephala. En su metodología
se determinó la CMI y la CMB y se aplicó la mitad, la cuarta y octava parte de la CMI para
evaluar el porcentaje de inhibición el cual fue aplicado en las células bacterianas por
microscopia de fuerza atómica. La mayoría de las cepas Gram-positivas fueron sensibles a
las cardioquinonas, siendo el valor más bajo de la CMI 7,8µM inhibiendo hasta un 90% la
formación de biopelículas para S. aureus ATCC 29213, S. saprophyticus y S. aureus
resistente a meticilina. Se concluyó que las cardioquinonas presentes en Cordia
polycephala tienen potencial antibacteriano tanto para bacterias ATCC como resistentes.11

Castro M. (2019), titulado “Caracterización de propiedades físicas y antimicrobianas in


vitro de un recubrimiento comestible a base de muyuyo (Cordia lutea lam.) y quitosano”,
su objetivo fue caracterizar las propiedades físicas y antimicrobianas de recubrimientos
comestibles de quitosano y goma de Cordia lutea. Para su metodología se utilizó la goma
de los frutos de Cordia lutea extraídos por compresión manual y se preparó una solución
en concentraciones de 40 y 60% y se adicionó el quitosano; para la actividad
antimicrobiana sobre los hongos Rhizopus spp, Aspergillus spp y Penicillium spp se utilizó
el método de difusión en disco. Los resultados indicaron que en las concentraciones de
60% de Cordia lutea y 1.5% de quitosano se evidenció un halo de 2.98mm para Rhizopus
spp, 2.29mm para Aspergillus spp y 1.79mm para Penicillium spp; se evidenció que a
mayor concentración aumenta el poder antimicrobiano de la solución de recubrimiento. Se

17
concluyó que existe efecto antimicrobiano de la solución de recubrimiento en
concentraciones del 60% para Cordia lutea y 1.5% de quitosano para las cepas de
Rhizopus spp, Aspergillus spp y Penicillium spp.12

Así mismo, con respecto las bases teóricas de las variables en estudio sabemos que
"Cordia lutea Lam", también conocida como "flor de overo", "violeta amarilla" o
"muyuyo", se originó en las Islas Galápagos, Ecuador, Perú y la familia de la arbórea de la
Polinesia (rosa Sección). Se utiliza para aliviar la tortura de los riñones, la distracción
gastrointestinal, la hepatitis.19

Sus semillas son duras y leñosas, no dispersables, es un producto adhesivo natural con
efecto elástico o adhesivo. "Los adhesivos orgánicos se utilizan en ungüentos y jarabes
externos que se debilitan en agua a alta temperatura. Los adhesivos y la cocción de las
hojas se utilizan como agentes hemostáticos". 20 Las hojas crujientes o secas se utilizan
como expectorante en la decocción, pero el uso más famoso es para infecciones hepáticas
y el dolor de los riñones.20 En sus propiedades medicinales tiene actividad cicatrizante que
es atribuido a los flavonoides y taninos, hemostático, analgésico, antiséptico y
antiinflamatorio, además presenta la alantoína, una sustancia con propiedad de estimular el
crecimiento de células de la epidermis13.

Los metabolitos opcionales son combinaciones dinámicas o mezclas de mezclas presentes


en fuentes vegetales, por lo que ha habido un entusiasmo lógico extraordinario por aclarar
sus capacidades. Se han separado de los concentrados o partes claras de las plantas para
las pruebas orgánicas de estas sustancias y ecuaciones de fármacos entre estos
antioxidantes, flavonoides, taninos, entre otros.22

Con respecto a Staphylococcus aureus sabemos que este microorganismo se encuentra


dentro de los primeros diez, agentes patógenos en infecciones en el ámbito hospitalario, las
manifestaciones clínicas son de las más extendidas que hay, desde cuadros leves hasta
graves y que coloniza principalmente la piel, (axilas, pliegues inguinales, región del
periné), en el aparato respiratorio coloniza las fosas nasales, faringe y zona nasofaringe. 24

Es un microorganismo de tamaño de 0.5 a 1.0 µm, al realizar una tinción Gram y ser
observados al microscopio óptico, se pueden ver cocos Gram positivos con una disposición
de que asemeja los racimos de uvas (agrupados), presenta una pared celular gruesa
formada principalmente por el polisacárido peptidoglicano, esta biomolécula es la

18
responsable de darle dureza a la pared celular y hacerla resistente a la presión osmótica.
Este peptidoglicano es el que desencadena los procesos de inflamación en la célula por
activación del complemento, siendo capaz de atraer leucocitos polimorfonucleares (PMN),
estimulando la producción de inmunoglobulinas opsonizantes. Además, en la pared celular
también podemos encontrar ácido teicoico, que es un biopolímero de glicerol, ribitol
fosfato, azucares y aveces D-alanina, el ácido teicoico que está unido a la membrana
celular se le conoce con ácido lipoteicoico.24,25

Los factores de patogenicidad que presenta S. aureus son toxinas estafilocócicas,


polisacáridos presentes en la pared celular y enzimas que pueden provocar intoxicaciones
alimentarias y también infecciones de piel y que se pueden dividir a nivel de tres grupos:

A nivel de pared celular: están los peptidoglicanos los cuales activan a las proteínas del
complemento, los ácidos teicoicos que tienen actividad antifagocítica, la cápsula mucoide
que le confiere la adherencia a la célula y la y proteína A que tiene la propiedad de unirse a
la porción FC de las moléculas de inmunoglobulinas G (IgG), la cual le confiere la
virulencia, activando de igual manera al complemento 25,26.

A nivel de enzimas: Presenta coagulasa lo que le permite la formación de absceso, las


estafiloquinasas cuya función es la de destrucción del coagulo, la hialuronidasa lo que le
ayuda a invadir el tejido, y las lipasas presentes en la colonización. 27

A nivel de toxinas: Encontramos a las hemolisina como la leucocidina, la cual actúa como
perforador de luecocitos, eritrocitos, macrófagos, plaquetas y fibroblastos, además tenemos
la toxina exfoliativa (ETA Y ETB) la cual produce la epidermólisis, la toxina del síndrome
del shock tóxico (TSST-1), encargada de producir extravasación o destrucción de las
células endoteliales y la enterotoxina muy común en intoxicación por alimentos 24,27.

Así mismo contamos con los siguientes enfoques conceptuales que ayudarán aclarar
algunos términos empleados en el estudio:

- Agar: Es un tipo de medio empleado para producir crecimiento bacteriano.


- Antimicrobianos: Fármacos cuyo objetivo principal es destruir las bacterias por
distintos mecanismos.
- Caldo: Combinación de sustancias que contienen los nutrientes necesarios para el
desarrollo de microorganismos.

19
- Cepa: Grupo de microorganismos provenientes de una misma descendencia
agrupados en colonias con características distintas que las hacen identificables.
- Enzimas: Moléculas orgánicas generalmente de naturaleza proteica cuya función
principal es facilitar o acelerar las reacciones químicas en nuestro organismo.
- Extracto: Proceso físico mediante el cual se extraen los principios activos de una
muestra
- Multirresistente: Se refiere a la resistencia que poseen ciertas bacterias a la acción
lesiva o destructiva por parte de varios fármacos.
- Placas: Material de vidrio o plástico empleado en laboratorio para el crecimiento de
microorganismos.
- Toxinas: Sustancias emitidas por ciertas bacterias que causan daño al huésped.

Luego del análisis de la información precedida nos formulamos el siguiente problema


general ¿Presentará actividad antibacteriana el extracto etanólico de la flor de overo
“Cordia lutea lam” frente a Staphylococcus aureus?, así mismo, se formularon los
siguientes problemas específicos, ¿Presentará actividad antibacteriana el extracto etanólico
al 100% de la flor de overo “Cordia lutea lam” frente a Staphylococcus aureus?,
¿Presentará actividad antibacteriana el extracto etanólico al 75% de la flor de overo
“Cordia lutea lam” frente a Staphylococcus aureus? y ¿Cuál será la actividad
antibacteriana el extracto etanólico de la flor de overo “Cordia lutea lam” frente a
Staphylococcus aureus comparada con ciprofloxacino?

La realización de este proyecto permitirá demostrar las propiedades Cordia lutea lam”,
con respecto a su actividad antibacteriana “in vitro” frente a cepas S. aureus, estos
resultados además nos permitirán formar nuevo conocimiento que se empleará para
realizar alternativas de tratamiento para infecciones resistentes a los antimicrobianos.

Así mismo, los resultados del estudio permitirán a otros investigadores realizar estudios
complementarios sobre las propiedades antimicrobianas de esta planta nativa del Perú (flor
de overo). Además, la actividad antibacteriana del extracto de Cordia lutea lam, daría
alternativas de tratamientos por la gran resistencia a los antibióticos que se está
presentando en este siglo y servir a las entidades de salud como herramienta para el
tratamiento de enfermedades.

20
El objetivo general planteado en el estudio es Demostrar la actividad antibacteriana el
extracto etanólico de la flor de overo “Cordia lutea lam” frente a Staphylococcus aureus,
así mismo, los objetivos específicos son, Determinar la actividad antibacteriana el extracto
etanólico al 100% de la flor de overo “Cordia lutea lam” frente a Staphylococcus aureus,
Determinar la actividad antibacteriana el extracto etanólico al 75% de la flor de overo
“Cordia lutea lam” frente a Staphylococcus aureus y Comparar la actividad antibacteriana
del extracto etanólico de la flor de overo “Cordia lutea lam” frente a Staphylococcus
aureus con ciprofloxacino

La hipótesis que se plantea el estudio es el extracto etanólico de la flor de overo “Cordia


lutea lam” presenta actividad antibacteriana frente a Staphylococcus aureus, así mismo, las
hipótesis específicas son, el extracto etanólico al 100% de la flor de overo “Cordia lutea
lam” presenta actividad antibacteriana frente a Staphylococcus aureus, el extracto
etanólico al 75% de la flor de overo “Cordia lutea lam” presenta actividad antibacteriana
frente a Staphylococcus aureus y la actividad antibacteriana del extracto etanólico de la
flor de overo “Cordia lutea lam” frente a Staphylococcus aureus es superior que al
ciprofloxacino

21
II. MÉTODO

2.1. Tipo y diseño de investigación

2.1.1 Tipo de investigación


En cuanto a su finalidad: aplicada, experimental y prospectivo.

2.1.2. Diseño de investigación


Es experimental, debido a que se manipulara las variables independientes y
luego se analizara el efecto producido sobre la variable dependiente. Se
realizará según el siguiente esquema:

G1 X1 O1
G2 + O2
G3 -- O3
G1, G2 y G3: Grupos de cepas de Staphylococcus aureus ATCC 25923
X1: Tratamiento con extracto etanólico de flor de overo “Cordia lutea lam”
O1, O2 y O3: Efecto observado.
-- Control negativo, sin tratamiento.
+ control positivo

22
2.2. Operacionalización de las variables

Definición
Variables Unidad de
Conceptual Dimensiones Indicadores
dependient medida/
e punto de
corte

Producto
obtenido
mediante la
Extracto 100%
percolación al
etanólico de la
exponer la
flor de Cordia Concentración Porcentaje
planta o
lutea Lam
plantas a
etanol

durante un
tiempo
75%
determinado
Variables Unidad de
Definición Dimensiones Indicadores
independie medida/
Conceptual
nte punto de
corte
Capacidad de < 8mm Nula
inhibir el Tamaño del
8mm a < 14mm Sensible
Actividad
crecimiento o halo de
Medio
antibacteriana 14mm a 20mm
matar las inhibición
Muy sensible
bacterias ˃ a 20mm

2.3. Población, muestra y muestreo

2.2.1. Población
Cordia lutea Lam
2.2.2. Muestra
 Extracto etanólico de Cordia lutea Lam
Criterios de inclusión
 Muestras identificadas
 Muestras frescas y libres de pesticidas
Criterios de exclusión

23
 Muestras con plagas
 Muestras secas y en descomposición
 Muestras de diferente especie

2.2.3. Muestreo
No probabilistico por conveniencia.
2.4. Técnicas e instrumentos de recolección de datos, validez y confiabilidad

2.3.1. Técnicas

EXTRACCIÓN ALCOHÓLICA: Técnica que permite obtener los productos


denominados principios activos de la planta, mediante la percolación o maceración con
etanol de 70° durante un tiempo

DIFUSIÓN EN AGAR (KIRBY - BAUER): Método usado para poder medir la


actividad antibacteriana mediante el uso de discos de papel impregnados con la sustancia
que tiene la propiedad antibacteriana deseada; el tamaño del halo de la inhibición que
producen estos discos serán los indicadores de tal actividad.

2.3.2. Instrumentos de recoleccion de datos

Bases de datos en Excel: Los datos obtenidos en el cuadro de registro se


ingresarán a una base de datos en Excel para poder obtener medidas de
tendencia central y dispersión.

Vernier digital: Instrumento de alta precisión y exactitud recomendado para la


determinación de medidas de menor tamaño.

2.5. Procedimiento

Recolección de Cordia lutea lam

La flor de overo se recogió en el distrito de Olmos, provincia de Lambayeque,


departamento de Lambayeque, sin manchas, picaduras de insectos o señales de
contaminación o deterioro. Luego de la recolección se utilizó agua del grifo para eliminar
el polvo y otras partículas no deseadas de las muestras recolectadas, luego se lavó con agua
destilada y se secaron al medio ambiente, y posteriormente en estufa a 45°C para

24
deshidratación y secado total de la muestra.
Preparación del extracto alcohólico de Cordia lutea lam.

Se pesaron 500 g de flores Cordia lutea lam, las que se trituraron, pulverizaron, tamizaron
y agregó 500 ml de etanol de 96° en un frasco ámbar de capacidad de 2,5L, luego se dejó
en maceración por 8 días, agitándolo por espacio de 10 minutos diarios para favorecer la
extracción. Luego de este tiempo el sobrenadante se filtró a través del papel de filtro
Whatman No. 1. Los filtrados se concentraron en estufa a 45ºC hasta obtener un extracto
pastoso. Los extractos brutos se recogieron y se dejaron secar a temperatura ambiente hasta
su utilización.36,37

Reactivación de la cepa de Staphylococcus aureus.

La reactivación de la cepa de Staphylococcus aureus se realizó según las especificaciones


técnicas del proveedor de la cepa con apoyo del laboratorio microbiológico que brindó la
cepa. Se colocó el liofilizado en un caldo nutritivo (TSA) en incubación a 37 °C por un
periodo de 24 horas, luego se realizó el sembrado en estrías en agar Baird-Parker por 24
horas hasta observar la formación de colonias oscuras.
Sembrado en placa de cepas bacteriológicas.

Para realizar el sembrado en placa el cultivo obtenido fue estandarizado con el


nefelómetro de McFarland, específicamente con el tubo 0.5, para esto se tuvo que hacer
diluciones con agua destilada. A continuación, se tomó con un hisopo, y se presionó
levemente contra las paredes del tubo y luego se aplicó hisopado en toda la placa en agar
Miüller Hinton, se realizaron 15 repeticiones para cada grupo de trabajo.
Evaluación del extracto etanólico de Cordia lutea Lam. frente a Staphylococcus
aureus.
Con pinzas estériles se colocaron en cada placa cuatro discos de papel de filtro de la
manera siguiente: Un disco con 10 ul de etanol 96° (control negativo) y se aplicó en todas
las placas. Un disco de ciprofloxacino (100mg/ml) y dos discos con 10 ul de extracto
etanólico de Cordia lutea Lam. al 75% y 100% respectivamente, colocando todos los
discos mencionados en la placa.
Las placas se incubaron por 24 horas a 37°C, después se procedió a tomar las medidas
directas de los halos de inhibición, mediante un pie de rey digital.39,40

25
2.6. Método de Análisis de datos

Los datos que se obtuvieron se analizaron mediante un programa estadístico llamado SPSS
versión 26, el cual ayudó a determinar la estadística descriptiva de cada variable, a su vez
se realizaron pruebas de normalidad y pruebas de homogeneidad de varianzas y
posteriormente las pruebas inferenciales mediante ANOVA y Tukey. Para cada caso se
empleó un nivel de significancia de 0.05.

2.7. Aspectos éticos

La investigación no representa ningún riesgo ya sea para el ser humano o algún otro
espécimen ya que no se trabajará ni manipulara con estos, en el mismo sentido cumple
con los principios de ética y deontología en todo su desarrollo. Durante la ejecución
del proyecto se mantuvo un alto nivel de bioseguridad especialmente en la
manipulación de microorganismos patógenos y con una correcta forma de eliminación
de los desechos intrahospitalarios.

26
III. RESULTADOS

Tabla 1. Análisis de los datos recolectados con respecto al tamaño del halo de inhibición de
los grupos experimentales y control.

95% Intervalo de
confianza de la media
Std. Std.
N Media Mínimo Máximo
Desviación Error
Límite Límite
Grupos inferior superior
E. Cordia Lutea (100%) 15 14,85 0,35 0,09 14,65 15,04 13,90 15,30
E. Cordia Lutea (75%) 15 12,64 0,42 0,11 12,41 12,87 11,70 13,40
Control negativo 15 6,21 0,32 0,08 6,03 6,38 5,70 6,80
(etanol)
Control positivo 15 23,93 0,41 0,10 23,70 24,15 22,90 24,40
(ciprofloxacino)

Fuente: SPSS ver. 26

En la tabla 1 se observa el análisis estadístico realizado a los datos de los halos de


inhibición obtenidos en los grupos experimentales y control donde se obtiene sus
parámetros de media, desviación estándar, intervalos de confianza y valores máximo y
mínimo mediante el programa estadístico SPSS versión 26, donde se observa que el valor
promedio de los halos de inhibición para el extracto etanólico de Cordía lutea Lam. al
100% fue de 14,85mm + 0,35 y de 12,64mm + 0,42 para el 75%, así mismo, el control
negativo (etanol) obtuvo un halo promedio de 6,21mm + 0,32 y el control positivo
(ciprofloxacino) de 23,93mm + 0,41.

27
Figura 1. Análisis gráfico de los diámetros de los halos de inhibición según grupo de los
grupos experimentales y control

Fuente: SPSS ver. 26

En la figura 1, podemos observar el comportamiento según el diámetro de los halos de


inhibición obtenidos por los grupos control y experimentales sobre Staphylococcus aureus,
donde se puede apreciar un mayor efecto antibacteriano por parte del control positivo
(ciprofloxacino) con respecto a los grupos experimentales, se observa así mismo, que
efecto antibacteriano creciente con respecto a la concentración de los extractos, por otro
lado, no observa diámetros similares de los grupos trabajo con el control negativo.

Tabla 2. Análisis de la distribución normal para cada grupo de tratamientos

Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Grupos de trabajo Statistic df Sig. Statistic df Sig.
E. Cordia Lutea (100%) 0,203 15 0,095 0,881 15 0,050
E. Cordia Lutea (75%) 0,131 15 0,200* 0,955 15 0,600
Diámetro del halo de Control negativo (etanol) 0,119 15 0,200 *
0,945 15 0,448
inhibición (mm) Control positivo (ciprofloxacino) 0,154 15 0,200 *
0,899 15 0,091
*. This is a lower bound of the true significance.
a. Lilliefors Significance Correction
Fuente: SPSS ver. 26

28
En la tabla 2, se observa el análisis de las pruebas de distribución normal de Kolmogorov-
Smirnov y Shapiro-Wilk realizada mediante el programa estadístico SPSS versión 26, se
observa valores de significancia superior al 0,05 establecido en el estudio, por lo que se
confirma la hipótesis de que los grupos de datos analizados presentan una distribución
normal.

Tabla 3. Análisis de la homogeneidad de varianzas

Levene p-
Statistic df1 df2 valor
Basado en la media 0,547 3 56 0,652

Basado en la mediana 0,511 3 56 0,676


Diámetro del halo Basado en la media y ajustado con df 0,511 3 53,814 0,676
de inhibición 0,557 3 56 0,646
Basado en la media recortada

Fuente: SPSS ver. 26

La tabla 3, del mismo se puede apreciar el análisis realizado mediante la prueba de Levene
o de varianzas homogéneas a los grupos de datos analizados; así mismo, se observa un
valor p > 0.05, por lo tanto, se confirma que los grupos de datos estudiados tienen
varianzas homogéneas.

Tabla 4. Análisis de la varianza (ANOVA) de los grupos de tratamientos

Diámetro del halo de inhibición


Suma de cuadrados df Media al cuadrado F p-valor.
Entre grupos 2417,777 3 805,926 5675,532 0,000

Dentro de los grupos 7,952 56 0,142

Total 2425,729 59

Fuente: SPSS ver. 26

En la tabla 4 se muestra la prueba de ANOVA o de análisis de la varianza realizados a los


grupos de tratamiento experimental y control, donde se observa un p < 0,05, por lo tanto,
se confirma que existe diferencias estadísticamente significativas en al menos uno de los
grupos de datos analizados.

29
Tabla 5. Prueba Post Hoc de comparaciones múltiples

Múltiple Comparisons
Dependent Variable: Diámetro del halo de inhibición (mm)
Tukey HSD
95% Confidence
Interval
Mean Difference Std. Lower Upper
(I) Grupos de trabajo (J) Grupos de trabajo (I-J) Error Sig. Bound Bound
*
E. Cordia Lutea (100%) E. Cordia Lutea (75%) 2,20667 0,13760 0,000 1,8423 2,5710
*
Control negativo (etanol) 8,64000 0,13760 0,000 8,2757 9,0043
Control positivo -9,08000* 0,13760 0,000 -9,4443 -8,7157
(ciprofloxacino)
E. Cordia Lutea (70%) E. Cordia Lutea (100%) -2,20667* 0,13760 0,000 -2,5710 -1,8423
*
Control negativo (etanol) 6,43333 0,13760 0,000 6,0690 6,7977
*
Control positivo -11,28667 0,13760 0,000 -11,6510 -10,9223
(ciprofloxacino)
Control negativo (etanol) E. Cordia Lutea (100%) -8,64000* 0,13760 0,000 -9,0043 -8,2757
*
E. Cordia Lutea (75%) -6,43333 0,13760 0,000 -6,7977 -6,0690
*
Control positivo -17,72000 0,13760 0,000 -18,0843 -17,3557
(ciprofloxacino)
Control positivo E. Cordia Lutea (100%) 9,08000* 0,13760 0,000 8,7157 9,4443
(ciprofloxacino) E. Cordia Lutea (75%) 11,28667* 0,13760 0,000 10,9223 11,6510
*
Control negativo (etanol) 17,72000 0,13760 0,000 17,3557 18,0843
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

En la tabla 5 se aplicó la prueba post hoc por comparaciones múltiples en grupo de a dos
para determinar las diferencias significativas, el análisis se realizó por pares y se observo p
valor < 0,05 en cada en el análisis por lo que indica que los grupos no son homogéneos o
que el efecto antibacteriano que muestran es diferente entre ellos.

Tabla 6. Análisis por subgrupos homogéneos de la prueba de Tukey

Diametro del halo de inhibición (mm)


a
Tukey HSD
Subset for alpha = 0.05
Grupos de trabajo N 1 2 3 4
Control negativo (etanol) 15 6,2067
E. Cordia Lutea (75%) 15 12,6400
E. Cordia Lutea (100%) 15 14,8467
Control positivo (ciprofloxacino) 15 23,9267
Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000
Fuente: SPSS ver. 26

30
La tabla 6 muestra la prueba de Tukey por subgrupos homogéneos la cual complementa la
información del análisis por sub grupos homogéneos y establece jerarquías o niveles de
clasificación de acuerdo a la media de los halos de inhibición de cada grupo de trabajo,
donde se puede apreciar mayor efecto antibacteriano contra Staphylococcus aureus para el
control positivo con halo de 23,92; seguido por el extracto etanólico de Cordia lutea al
100%, 75% y finalmente sin efecto antibacteriano sobre este microorganismo al control
negativo.

Tabla 7. Análisis de la sensibilidad de Staphylococcus aureus frente a los extractos


etanólicos de Cordia lutea Lam, según la escala de Duraffourd

Sensibilidad Muy Sumamente


Sensible
Tratamiento nula sensible sensible
8–<14 mm
< 8 mm 14-<20 mm > 20 mm
E. Cordia Lutea (100%) 14,85

E. Cordia Lutea (75%) 12,64

Control negativo (etanol) 6,21

Control positivo
23,93
(ciprofloxacino)

En la tabla 7, se muestra la escala valorativa de Duraffourd para la determinación de la


sensibilidad del Staphylococcus aureus frente a los extractos etanólicos de Cordia lutea
Lam al 100% y 75%, se observa que Staphylococcus aureus es sumamente sensible al
ciprofloxacino el cual muestra un halo superior a 20mm, además es muy sensible al
extracto etanólico al Cordia lutea Lam al 100% y sensible al extracto al 75% y mostro
sensibilidad nula al control negativo empleado con la formación de un halo de inhibición
menor a 8 mm.

31
IV. DISCUSIÓN

Cordia lutea Lam es una planta que crece comúnmente en los jardines de la ciudad de
Chiclayo, presenta propiedades medicinales generalmente por su efecto diurético,
hepatoprotector y pocos estudios muestran su efecto antibacteriano; por otro lado,
Staphylococcus aureus es una bacteria que causa muchas infecciones y resistencia al
tratamiento con antibióticos; por tal razón, se expuso los extractos de Cordia lutea Lam
“Flor de Overo” con la finalidad determinar su actividad antimicrobiana sobre esta
bacteria.

De los resultados obtenidos con respecto al tamaño del halo de inhibición formado por los
extractos etanólicos de Cordia lutea Lam “Flor de Overo” sobre cultivos de
Staphylococcus aureus ATCC 25923 se observo que a la concentración del 100% obtuvo
halos de inhibición de 14,85mm + 0,35 y al 75% fue de 12,64mm + 0,42, al respecto se
observa de manera similar un efecto antihacteriano de Cordia lutea Lam. en el estudio
realizado por Castro I. (2016), en su estudio “Aislamiento biodirigído y caracterización de
compuestos Anti-Helicobacter Pylori a partir de una planta usada en la medicina
tradicional peruana” determinó que H. Pylori era sensible a los extractos etanólicos de las
flores de Cordia Lutea Lam, con un CMI de 31,3 ug/ml, además el estudio identificó la
presencia de saponinas esteroidales y 6 compuestos con núcleo esteroidal en común
(4α,14α-dimetilesterol).

Debiasi B., Raiser A., Dourado S., Torres M., Andrighetti C. et al. (2021), estudiaron a una
especie de la misma familia que Cordia lutea Lam., llamada Cordia glabrata, para
determinar sus posibles actividades antioxidantes, fotoprotectoras, antimicrobianas y
antivirales a partir de los extractos etanólicos de la planta, la actividad antimicrobiana de la
planta se identificó mediante la técnica de microdilución en caldo sobre Staphylococcus
aureus, los resultados mostraron que esta planta presenta flavonoides, taninos, terpenos,
ácido cafeico además presentó capacidad antioxidante y fotoprotectora, pero no se llegó a
demostrar su efectividad antimicrobiana y antiviral, estos resultados son contrarios a los
obtenidos pero la planta del estudio no fue diferente.

Por otro lado, Araujo O. (2019), en su investigación “Potencial antibacteriano de


cordiaquinonas obtenidas de Cordia polycephala” estudio también la actividad
antibacteriana de las cardioquinonoas extraidas de esta planta observando que estas

32
presentan actividad contra la mayor parte de las bacterias gran-positivas estudiadas entre
ellas Staphylococcus aureus.

Castro M. (2019), en su estudio titulado “Caracterización de propiedades físicas y


antimicrobianas in vitro de un recubrimiento comestible a base de muyuyo (Cordia lutea
am.) y quitosano” determinaron de manera similar las propiedades físicas y
antimicrobianas de recubrimientos comestibles de quitosano y goma de Cordia lutea
obtenida de los frutos observando que presenta actividad antimicótica contra Rhizopus spp,
Aspergillus spp y Penicillium spp.

Se determino de manera comparativa la actividad antibacteriana de esta planta al


compararlo con los grupos control; el negativo (etanol) que obtuvo un halo promedio de
6,21mm + 0,32 y el control positivo (ciprofloxacino) que obtuvo un halo de 23,93mm +
0,41; se realizaron pruebas de normalidad y homogeneidad de varianzas y posteriormente
las pruebas inferenciales de ANOVA y Tukey, las que determinaron con un nivel de
confianza del 95% que existe diferencia significativa en todos los grupos de datos
analizados, demostrando actividad antibacteriana comparado con el grupo control; sin
embargo, los extracto no demostraron la misma actividad que el grupo control de
ciprofloxacino.

Del mismo modo, se empleo la escala de Duraffourd para determinar la sensibilidad de


Staphylococcus aureus a los extractos etanólicos de las flores de Cordia lutea Lam, y los
grupso control, mostrando ser altamente sensible al control positivo (ciprofloxacino) con
halo superior a 20mm, ser muy sensible al extracto etanólico de Cordia lutea Lam al
100%, se sensible al extracto al 75% y presentar sensibilidad nula al control negativo
empleado (etanol).

33
V. CONCLUSIONES

1. Se determinó la actividad antibacteriana del extracto etanólico al 100% de la flor de


overo “Cordia lutea lam” frente a Staphylococcus aureus mostrando halos de
inhibición de 14,85mm + 0,35.
2. Se determinó la actividad antibacteriana del extracto etanólico al 75% de la flor de
overo “Cordia lutea lam” frente a Staphylococcus aureus mostrando halos de
inhibición de 12,64mm + 0,42.
3. Se determinó que la actividad antibacteriana del extracto etanólico de la flor de overo
“Cordia lutea lam” frente a Staph.ylococcus aureus comparada con ciprofloxacino es
menor

34
VI. RECOMENDACIONES

- “Cordia lutea lam” ha mostrado tener actividad antibacteriana contra Staphylococcus


mutans; sin embargo, no existen muchos estudios que evidencien su efecto sobre otros
tipos de microorganismos, por lo que se recomienda se realicen investigación que
complementen el conocimiento en este aspecto.
- Se recomienda a las instituciones educativas promover investigaciones de este tipo o
complementar los estudios realizados con la finalidad de lograr conclusiones que
sirvan en beneficio de la población.
- El uso de las plantas medicinales como tratamiento para las enfermedades ha sido
dejado de lado con el uso de medicamentos; sin embargo, esta situación a ocasionado
otros problemas mayores, se hace un llamado a la población a retomar el uso de
plantas para el tratamiento de enfermedades o dolencias de menor complicación, sin
recurrir al uso de fármacos.

35
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38
ANEXOS

39
Anexo 1. Matriz de consistencia

Autor (es): Aldana Juárez, Luis Alberto; Barco Montalvo, Hector Francisco

Tema: ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DEL EXTRACTO ETANOLICO DE LA FLOR DE OVERO “Cordia lutea lam”
FRENTE A Staphylococcus aureus

Problema general Objetivo general Hipótesis general Variables y dimensiones Metodología

¿Presentará actividad Demostrar la actividad Hi: El extracto etanólico Variable Independiente Alcance de la
antibacteriana el extracto antibacteriana del extracto de flor de overo “Cordia (x) investigación:
etanólico de la flor de Aplicada
etanólico de la flor de lutea lam” tiene actividad X1: Extracto etanólico de Método
overo “Cordia lutea lam” de la
frente a Staphylococcus overo “Cordia lutea lam” antibacteriana frente a la “flor de overo” “Cordia investigación:
aureus? frente a Staphylococcus Staphylococcus aureus lutea lam” Prospectivo
Diseño de la investigación:
aureus Ho: El extracto etanólico
Experimental
Indicadores:
de flor de overo “Cordia
Concentración; 100% y
lutea lam”no tiene Población: La especie
75%
vegetal Cordia lutea lam
actividad antibacteriana
“flor de overo
frente a Staphylococcus
Variable Dependiente (y)
aureus Técnicas de procesamiento
Actividad antibacteriana de información:
ANOVA
Indicadores: Tukey
- Sensibilidad nula

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Problemas específicos Objetivos específicos Hipótesis específicas - Sensible
- Muy sensible
El extracto etanólico al - Sumamente sensible
¿Presentará actividad Determinar la actividad 100% de la flor de overo
antibacteriana el extracto antibacteriana el extracto “Cordia lutea lam”
etanólico al 100% de la etanólico al 100% de la presenta actividad
flor de overo “Cordia flor de overo “Cordia antibacteriana frente a
Staphylococcus aureus
lutea lam” frente a lutea lam” frente a
Staphylococcus aureus? Staphylococcus aureus, El extracto etanólico al
¿Presentará actividad 75% de la flor de overo
antibacteriana el extracto Determinar la actividad “Cordia lutea lam”
etanólico al 75% de la flor antibacteriana el extracto presenta actividad
etanólico al 75% de la flor antibacteriana frente a
de overo “Cordia lutea
de overo “Cordia lutea Staphylococcus aureus
lam” frente a
Staphylococcus aureus? lam” frente a La actividad antibacteriana
¿Cuál será la actividad Staphylococcus aureus y del extracto etanólico de la
antibacteriana el extracto flor de overo “Cordia
Comparar la actividad lutea lam” frente a
etanólico de la flor de
antibacteriana del extracto Staphylococcus aureus es
overo “Cordia lutea lam” superior que al
etanólico de la flor de
frente a Staphylococcus ciprofloxacino
overo “Cordia lutea lam”
aureus comparada con
frente a Staphylococcus
ciprofloxacino?
aureus con ciprofloxacino

48
Anexo 2. Operacionalización de las variables

Definición
Variables Unidad
Conceptual Dimensiones Indicadores
dependiente de
medida/
punto de
corte

Producto obtenido
mediante la
Extracto 100%
percolación al
etanólico de la
exponer la planta o Porcentaje
flor de Cordia Concentración
plantas a etanol
lutea Lam 75%
durante un tiempo
determinado
Unidad
Definición
Variables de
Conceptual Dimensiones Indicadores
independiente medida/
punto de
corte
Capacidad de < 8mm Nula
inhibir el Tamaño del
8mm a < 14mm Sensible
Actividad
crecimiento o halo de
Medio
antibacteriana 14mm a 20mm
matar las inhibición
Muy
bacterias ˃ a 20mm sensible

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Anexo 3. Identificación taxonómica de la especie vegetal

50
Anexo 4. Certificado de análisis de la cepa en estudio

51
52
Anexo 5. Cuadro de registro de datos de tamaños de halo de inhibición producidos en
cepas de Staphylococcus Aureus

Staphylococcus aureus
vs
Extracto Cordia lutea lam
Placa «flor de overo»
Control Control 75% 100%
(-) (+) (mm) (mm)
1 6,80 24,40 13,00 14,70

2 5,90 22,90 12,30 14,40

3 6,20 24,30 12,60 15,10

4 6,20 24,10 12,30 15,00

5 5,90 24,30 12,80 14,90

6 6,80 23,90 12,20 15,00

7 5,90 23,70 12,90 15,10

8 6,40 23,60 12,30 14,70

9 6,10 23,50 12,90 14,80

10 6,00 24,00 13,00 15,00

11 6,10 23,80 11,70 15,20

12 6,30 24,30 12,90 13,90

13 6,30 23,70 12,70 14,90

14 5,70 24,30 12,60 14,70

15 6,50 24,10 13,40 15,30

53
Anexo 6. Fotografías que evidencian el trabajo de campo

Figura 2. Recolección de la muestra vegetal

Figura 3. Selección y separación de las flores

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Figura 4. Desinfección y lavado de la muestra

Figura 5. Secado a temperatura ambiente

Figura 6. Secado en estufa


55
Figura 7. Secado a temperatura ambiente

Figura 8. Tamizado de la muestra pulverizada

Figura 9. Proceso de maceración 1


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Figura 10. Proceso de maceración 2

Figura 11. Extracto seco obtenido luego de la evaporación del solvente

Figura 12. Preparación de los extractos


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Figura 13. Proceso microbiológico de activación y sembrado de la cepa

Figura 14. Medición de los halos de inhibición

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