484 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos 13.

0
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Cálculos. Calcular el área bajo los picos correspondientes a INTERPRETACIÓN

parahidroxibenzoato de etilo, parahidroxibenzoato de butilo y
Partículas metálicas. La prueba es satisfactoria si de acuerdo
benzofenona, en el cromatograma resultante de la solución de
a los resultados obtenidos se cumple con los siguientes
referencia, como se indica en el capítulo antes mencionado y
requisitos para partículas metálicas de más de 50 µm: que el
designarlos como A1, A2 y A3 respectivamente. Determinar de
número total de partículas encontradas no exceda al número de
igual manera las áreas correspondientes en el cromatograma de
50, considerando los 10 tubos examinados; y que no más de
la solución de la muestra y designarlas como a1, a2 y a3
una de las muestras observadas contenga más de 8 partículas;
respectivamente.
y por último, que ninguna de las partículas encontradas sea
Calcular el contenido de parahidroxibenzoato de etilo y
mayor de 90 µm.
parahidroxibenzoato de butilo en la muestra con las siguientes
Si no se cumple lo anterior, repetir la prueba con 20 muestras
fórmulas:
adicionales del producto.
P Microgramos por mililitro de parahidroxibenzoato de etilo La prueba es satisfactoria si se cumplen los requisitos
𝟏𝟎(𝑪𝒆 /𝑽)(𝒂𝟏 /𝒂𝟑 )(𝑨𝟑 /𝑨𝟏 ) siguientes: Si en el total de las 30 muestras examinadas el
número de partículas no excede de 150. Que cuando en más
Microgramos por mililitro de parahidroxibenzoato de butilo de tres de las muestras examinadas, se observen no más de
8 partículas en cada tubo.
𝟏𝟎(𝑪𝒃 /𝑽)(𝒂𝟐 /𝒂𝟑 )(𝑨𝟑 /𝑨𝟐 ) Otras partículas. Se cuenta el número de partículas de otra
naturaleza que las metálicas, que sean de 50 µm o mayores y
Donde: realmente visibles bajo las condiciones descritas en la prueba;
Ce = Concentración en microgramos por mililitro de las especificaciones se satisfacen si el número total de
parahidroxibenzoato de etilo en la solución de referencia. partículas en los 10 tubos no es mayor de 50 y si en no más de
V = Mililitros empleados de la muestra. un tubo se encuentran más de ocho de ellas.
Cb = Concentración en microgramos por mililitro de Si los resultados encontrados son mayores, la prueba se repite,
parahidroxibenzoato de butilo en la solución de referencia. empleando 20 tubos de muestra; las especificaciones se
satisfacen si el número total de partículas antes mencionadas
de 50 µm o mayores, no son más de 150 en los treinta tubos
sometidos a la prueba y si no más de tres de los tubos
MGA 0641. PARTÍCULAS EXTRAÑAS contienen ocho de ellas.
EN UNGÜENTOS OFTÁLMICOS
La prueba está diseñada para comprobar los límites del
número y tamaño de partículas metálicas o de otra naturaleza,
MGA 0651. DETERMINACIÓN DE
que puedan encontrarse en ungüentos oftálmicos. Esta prueba PARTÍCULAS EN SOLUCIONES
se basa en un proceso de calentamiento para sedimentar las INYECTABLES
partículas contenidas en un medicamento dado y en la cuenta
de aquellas que contengan un tamaño mayor de 50 μm.
INTRODUCCIÓN. Se consideran partículas a las sustancias
Procedimiento. Extraer tan completamente como sea posible
extrañas móviles, que no sean burbujas de aire, originadas en
el contenido de cada uno de 10 tubos del producto y
forma aleatoria, que no pueden ser cuantificadas por análisis
transferirlo por separado a cajas de Petri de vidrio claras de
químico por la pequeña cantidad de material que representan
fondo plano de 60 mm de diámetro que estén libres de
y por su composición heterogénea. Las soluciones inyectables,
ralladuras, extendiendo la muestra en el fondo de la caja.
incluyendo a las soluciones reconstituidas a partir de sólidos
Tapar y calentar las cajas en una estufa entre 85 y 110 °C
estériles y destinadas para uso parenteral, no deben contener
durante 2 h, para asegurar que se obtenga un estado fluido
partículas extrañas que puedan detectarse por simple
totalmente. Evitar cualquier interrupción en el proceso
inspección visual. Las pruebas que aquí se describen son
mencionado y permitir que las muestras solidifiquen a
pruebas físicas que se llevan a cabo para contar las partículas
temperatura ambiente y sin agitación. Quitar las tapas e
extrañas subvisibles dentro de intervalos específicos de
invertir las cajas y observarlas en el microscopio, con aumento
tamaño.
de 30× y medir las partículas con el micrómetro ocular (disco
En este documento se incluyen las pruebas de recuento
micrométrico de una pieza) que ha sido calibrado al aumento
microscópico de partículas y las de recuento de partículas por
usado. Observar con luz directa y adicionalmente dirigir una
obstrucción de luz para la determinación de partículas.
fuente de luz de tal manera que incida en ángulo de 45° con la
superficie de la muestra examinada. Nota: la prueba de recuento de partículas por obstrucción de
Examinar todo el fondo de la caja Petri en busca de partículas luz se considerará la prueba primaria. En caso de que en algún
metálicas, variando la intensidad de la iluminación. Dichas preparado no pueda usarse, se empleará la prueba de recuento
partículas metálicas son reconocidas por sus características de microscópico y se especificará en la monografía
reflexión a la luz. correspondiente.
Contar el número de partículas metálicas de 50 μm o mayores, Todas las soluciones inyectables de gran volumen para
en cualquier dimensión. A continuación, repetir las observaciones infusión de dosis única y las soluciones inyectables de
para otro tipo de partículas y conservar, por separado, ambos pequeño volumen en las que las monografías especifiquen que
grupos de resultados, para efectos de interpretación. se debe cumplir con dicho requisito, están sujetas a este

MGA 0641. PARTÍCULAS EXTRAÑAS EN UNGÜENTOS OFTÁLMICOS

 MÉTODOS GENERALES DE ANÁLISIS 485
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método general, a menos que la monografía individual solución parenteral analizada. La variedad disponible de
especifique otro límite. aparatos de prueba va desde sistemas donde la calibración y
No todas las formulaciones inyectables pueden ser analizadas otros elementos de estandarización deben ser efectuados por
mediante la aplicación de una o ambas pruebas para la procedimientos manuales, hasta sistemas sofisticados que
determinación de partículas. Todo producto que no sea una incorporan sistemas complejos de computación para los
solución pura (como las emulsiones, coloidales y procedimientos de estandarización. Es por esto que no es
preparaciones liposomales) cuya transparencia y viscosidad se posible especificar métodos a seguir para la estandarización
aproximen a las del agua, puede proporcionar datos erróneos del instrumento, y es necesario recalcar el resultado final que
cuando se analiza por el método de recuento de partículas por se requiere para un procedimiento de estandarización en vez de
obstrucción de luz. Dichos materiales deben analizarse por el un método específico para obtener este resultado. En esta
método de recuento microscópico. Para ciertos productos sección se hace hincapié en los criterios a cumplir mediante un
pueden permitirse límites más amplios y éstos se especificarán sistema en vez de los métodos específicos a emplearse en su P
en las monografías individuales. En algunos casos, la determinación. Es responsabilidad del usuario el aplicar los
viscosidad de una solución puede ser tan alta que imposibilite diversos métodos de estandarización adecuado al instrumento
su análisis por cualquiera de los dos métodos. En este caso, específico a utilizar. Los criterios operativos críticos a
puede hacerse una dilución cuantitativa para disminuir la considerar son los siguientes:
viscosidad tanto como sea necesario para permitir la Límites de concentración del sensor. Emplear un
realización del análisis. instrumento que tenga un límite de concentración (número
Los resultados que se obtienen al examinar una pequeña máximo de partículas por mililitro), identificado por el
cantidad o un grupo de unidades de soluciones inyectables de fabricante, que sea mayor que la concentración de partículas
gran volumen o de pequeño volumen, no se pueden extrapolar que se pretende encontrar en la muestra que se va a analizar.
con certeza a otras unidades que no hayan sido analizadas; por El límite de concentración de un sensor, certificado por el
lo tanto, si se desea inferir en forma válida el nivel de fabricante, se define como el nivel de recuento en que la
partículas en un grupo mayor de unidades, a partir de los datos coincidencia de recuentos debida a la presencia simultánea de
observados, deben desarrollarse planes de muestreo estadístico dos o más partículas en el volumen del sensor, corresponde a
que se basen en factores operacionales conocidos. Estos deben menos del 10 % de los recuentos registrados para partículas
tomar en cuenta el volumen del producto, el número de de 10 µm.
partículas encontrado históricamente en comparación con los Intervalo dinámico del sensor. El intervalo dinámico del
límites, distribución de partículas presentes y la variabilidad de instrumento utilizado (intervalo de tamaños de partícula que
recuentos de partículas entre unidades. puedan clasificarse por tamaño y contarse con precisión) debe
incluir el tamaño más pequeño de partícula a ser contabilizada
MÉTODO I. PRUEBA DE RECUENTO DE en las muestras.
PARTÍCULAS POR OBSTRUCCIÓN DE LUZ. Si la
monografía individual no especifica otra cosa, la prueba se ESTANDARIZACIÓN DEL INSTRUMENTO DE
realiza en soluciones inyectables de gran volumen con un PRUEBA
contenido mayor a 100 mL. Esta prueba contabiliza las La siguiente discusión sobre la estandarización del instrumento
partículas suspendidas, ya sean sólidas o líquidas. Esta prueba hace hincapié en el rendimiento antes que en el método
también se aplica a soluciones inyectables de pequeño específico para calibrar o estandarizar el sistema de un
volumen, de dosis única o dosis múltiple, con un volumen de instrumento determinado. Este enfoque es particularmente
100 mL o menor, ya sean soluciones o soluciones evidente en la descripción de la calibración, en la cual se deben
reconstituidas a partir de sólidos estériles y a las que en la hacer concesiones según se utilicen métodos manuales,
monografía individual se especifica que debe realizarse la métodos basados en programas de cómputo, o instrumentos de
prueba para partículas. Las soluciones inyectables envasadas prueba electrónicos. La calificación del instrumento es esencial
en jeringas y cartuchos prellenados están exentas de estos para la realización y rendimiento de la prueba. Dado que en
requisitos, y del mismo modo, aquellos productos en los que una prueba pueden emplearse instrumentos de diferentes
en la monografía individual especifica que la etiqueta debe marcas, el usuario es el responsable de asegurar que el
indicar que el producto se debe emplear con un filtro terminal. contador utilizado es operado de acuerdo a las instrucciones
Instrumento de prueba. El aparato consta de un sistema de específicas del fabricante; los principios que deben seguirse
recuento electrónico de partículas, con soporte líquido, que para asegurar que los instrumentos operan dentro de rangos
emplea un sensor que detecta la obstrucción de luz por medio aceptables, se definen más adelante.
de un dispositivo para la introducción de las muestras. La siguiente información para la estandarización de los
Comercialmente están disponibles una gran variedad de instrumentos ayuda a asegurar que el volumen de la muestra,
dispositivos de este tipo. Es responsabilidad de quienes llevan la velocidad de flujo de la misma, la curva de respuesta del
a cabo la prueba de asegurarse que los parámetros operativos tamaño de partícula, la resolución del sensor y la exactitud del
del instrumental son los adecuados en cuanto a la exactitud y recuento son adecuados para el rendimiento de la prueba. Estos
precisión requeridos para el resultado de la prueba y adiestrar procedimientos deben llevarse a cabo a intervalos no mayores
a los responsables de la realización técnica de la prueba. de seis meses.
Es importante destacar que para aplicaciones farmacopeicas, el
objetivo que se busca es que el contador de partículas VOLUMEN DE LA MUESTRA. Dado que la cuenta de
reproduzca el tamaño y el número de partículas presentes en la partículas de una unidad varía en proporción directa al

MGA 0651. DETERMINACIÓN DE PARTÍCULAS EN SOLUCIONES INYECTABLES

 486 Farmacopea de los Estados Unidos Mexica_nos
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volumen de líquido muestreado, es importante conocer que debe dividirse en partes iguales, es la ventana de recuento.
exactamente el tamaño de muestra para trabajar dentro de La ventana está limitada por el ajuste del umbral fijado que
un intervalo seguro. Para determinar el volumen de muestra, define un umbral de ventana de voltaje correspondiente al
hay que determinar el volumen de la tara en el dosificador de ± 20 % del diámetro medio de las esferas de prueba. La
la muestra con agua destilada o desionizada, filtrada, que se ha ventana se concibe para que incluya a todas las esferas
pasado a través de un filtro de una porosidad de 1.2 µm o individuales, considerando la desviación estándar de las
menor. Transferir un volumen de agua destilada o desionizada, esferas y la resolución del sensor, mientras se excluye el ruido
filtrada, que sea mayor que el volumen de la muestra a un y agregados de esferas. El valor del 20 % se eligió sobre la
recipiente y pesar. Con el dispositivo de muestreo tomar un base del 10 %del caso de peor resolución del sensor más el
volumen adecuado y pesar nuevamente el recipiente. 10 % de la desviación estándar del peor caso de las esferas.
Determinar el volumen de muestreo restando el volumen de Como los umbrales son proporcionales al área de las esferas y
P tara de la combinación del volumen de tara más la muestra. no al diámetro, los ajustes de voltajes inferiores y superiores
Verificar que el valor obtenido esté dentro del 5 % del se determinan mediante las ecuaciones:
volumen de la muestra para la prueba. Alternativamente, 𝑽𝑰 = 𝟎. 𝟔𝟒 𝑽𝒔
el volumen de la muestra puede determinarse empleando una
Donde:
probeta graduada.
Vl = Ajuste del voltaje inferior.
Nota: los instrumentos de este tipo requieren un volumen de
Vs = Voltaje en el centro máximo.
tara variable. Esta es la cantidad de muestra tomada antes del
recuento. Este volumen puede determinarse para los 𝑽𝒖 = 𝟏. 𝟒𝟒 𝑽𝒔
muestreadores operados con jeringa fijando el volumen de la
muestra en cero e iniciando la toma de muestra, para que el Donde:
único volumen de solución tomado sea la tara. Restar el Vu = Ajuste del voltaje superior.
volumen de tara del volumen total de solución tomada en el Vs = Voltaje en el centro máximo.
ciclo de muestreo para determinar el volumen de muestra
tomado. Una vez que se determinan los umbrales máximos, emplearlos
para los estándares para crear una regresión del logaritmo del
VELOCIDAD DE FLUJO DE LA MUESTRA. Verificar voltaje en función del logaritmo del tamaño de partícula desde
que la velocidad de flujo esté dentro de las especificaciones el cual se puedan determinar los ajustes del instrumento para
del fabricante para el sensor utilizado. Esto se logra los tamaños de 10 y 25 µm.
empleando un cronómetro calibrado para medir el tiempo
requerido por el instrumento para retirar y contar un volumen Método automatizado. La curva de calibración (respuesta al
de muestra específico (es decir, el tiempo entre el comienzo y tamaño) puede determinarse para el sistema instrumento-
el final del ciclo de recuento determinado por medio del sensor mediante el uso de rutinas validadas de software
indicador luminoso del instrumento u otro medio). Los ofrecidas por los proveedores de instrumentos; estas pueden
sensores pueden operarse con precisión sobre un intervalo de incluirse como parte del programa (software) del instrumento
velocidades de flujo. Llevar a cabo el procedimiento de prueba o emplear una microcomputadora conectada al contador. El
a la misma velocidad de flujo que se seleccione para la uso de estos métodos automatizados es apropiado si el
calibración del instrumento. proveedor certifica por escrito que el software provee una
curva de respuesta equivalente a la obtenida por el método
CALIBRACIÓN. Utilizar uno de los siguientes métodos: manual y si la calibración automatizada se valida de acuerdo a
las necesidades del usuario.
Método manual. Calibrar el instrumento con un mínimo de
tres calibradores, cada uno de ellos conteniendo esferas de Método electrónico. Empleando un analizador multicanal de
poliestireno con diámetros uniformes de aproximadamente altura de picos, determinar el canal del centro de respuesta del
10; 15; y 25 µm, en un vehículo acuoso. Las esferas calibradoras pulso del contador de partículas para cada suspensión
deben tener un diámetro medio dentro del 5 % de sus estándar. Este ajuste de voltaje máximo se convierte en el
diámetros nominales (10; 15; y 25 µm) y estandarizarse contra umbral empleado para el cálculo de la curva de respuesta del
materiales de referencia. El número de esferas contado debe voltaje para el instrumento. Las suspensiones estándar a
estar dentro del límite de concentración del sensor. Preparar emplearse para la calibración se procesan en orden y se
suspensiones de las esferas calibradoras en agua, a una determinan los voltajes de pulso medio para cada calibración.
concentración de 1 000 a 5 000 partículas/mL, determinar el Estos umbrales se emplean para generar manualmente la curva
canal de lectura que corresponda al ajuste del recuento más de respuesta de tamaño o por medio de rutinas de software.
alto para la distribución de las esferas. Esto se determina Los umbrales determinados mediante los datos del analizador
mediante el empleo de la lectura umbral del recuento más alto multicanal se transfieren entonces al contador para completar
para dividir la distribución en dos fracciones que contengan la calibración. Si se emplea éste procedimiento con un
igual número de recuentos, con el instrumento puesto en la instrumento basado en un comparador, éste deberá ajustarse
modalidad de recuento diferencial (método de semirrecuento previamente con precisión.
por ventana móvil). Emplear sólo la porción central de la
distribución en este cálculo para evitar la inclusión de RESOLUCIÓN DEL SENSOR. La resolución del tamaño de
porciones asimétricas del pico. La porción de la distribución, partícula del contador depende del sensor empleado y puede

MGA 0651. DETERMINACIÓN DE PARTÍCULAS EN SOLUCIONES INYECTABLES

 MÉTODOS GENERALES DE ANÁLISIS 487
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variar utilizando sensores individuales aún del mismo modelo. por escrito que el programa (software) proporciona una
Determinar la resolución del contador de partículas de 10 µm determinación de resolución equivalente al método manual y si
utilizando esferas calibradoras de 10 µm. El coeficiente de la determinación automatizada de resolución se valida de
variación de la distribución de tamaños de partícula estándar acuerdo a las necesidades del usuario.
empleada no debe ser mayor del 5 %. Los métodos aceptables
para determinar la resolución de tamaños de partícula son: (1) Método electrónico. Registrar la distribución del voltaje de
determinar manualmente el grado de ensanchamiento del pico salida del sensor de partículas empleando un analizador
debido a la respuesta del instrumento; (2) emplear un método multicanal mientras se toma la muestra de una suspensión
electrónico para medir y ordenar el voltaje de salida del sensor estándar de tamaño de partícula de 10 µm. Para determinar la
de partículas con un analizador multicanal; y (3) emplear resolución, mover el cursor del analizador multicanal hacia
métodos automatizados. arriba y hacia abajo en la escala del potencial eléctrico del
Método manual. Ajustar el contador de partículas para operar voltaje medio de pulso para identificar un canal a cada lado del P
en la modalidad acumulativa o modalidad de recuento total. pico de 10 µm que contenga aproximadamente el 61 % de los
Referirse a la curva de calibración obtenida previamente y recuentos observados en el canal del centro. El empleo de la
determinar el umbral de voltaje para las esferas calibradoras de curva de respuesta de tamaño del contador para convertir los
10 µm. Ajustar 3 canales del contador a emplear en el valores de milivoltaje de estos dos canales a tamaños de partícula
procedimiento de calibración como se indica a continuación: proporciona el tamaño de partícula dentro de un coeficiente de
El canal 1 se fija para 90 % del voltaje umbral. variación del estándar de 10 µm. Emplear estos valores para
El canal 2 se fija para el voltaje de umbral. calcular la resolución según se describe en el método manual.
El canal 3 se fija para 110 % del voltaje umbral.
Hacer pasar una muestra a través del sensor, observando el EXACTITUD DEL RECUENTO DE PARTÍCULAS.
recuento en el canal 2. Cuando el recuento de partículas en ese Determinar la exactitud del instrumento en el recuento de
canal haya llegado aproximadamente a 1 000, detener el partículas, empleando el Método 1 (para soluciones
recuento y observar los recuentos en los canales 1 y 3. inyectables de pequeño volumen) o el Método 2 (para
Controlar si el recuento en el canal 1 y en el canal 3 son soluciones inyectables de gran volumen).
1.68 ± 10 % y 0.32 ± 10 %, respectivamente, del recuento en
el canal 2. Si éste no es el caso, ajustar los umbrales de los Método 1
canales 1 y 3 para cumplir con estos criterios. Cuando éstos se Procedimiento. Preparar la suspensión y el blanco empleando
hayan cumplido, hacer pasar una muestra de la suspensión a Solución de Referencia para conteo de partículas. Con el
través del contador hasta que los recuentos en el canal 2 hayan instrumento ajustado para contar en la modalidad acumulativa
alcanzado aproximadamente 10 000, o hasta que se haya (total), registrar los recuentos a no menos de 10 µm y no
contado un volumen adecuado (p. ej. 10 mL) de la suspensión menos de 15 µm. Mezclar el blanco invirtiéndolo 25 veces
de esferas. Comprobar que los recuentos en los canales 1 y 3 durante 10 s y desgasificar la mezcla sometiéndolo a un baño
sean de 1.68 ± 3 % y 0.32 ± 3 %, respectivamente, del de ultrasonido (de 80 a 120 W) durante 30 s o dejar reposar.
recuento en el canal 2. Registrar el tamaño de partícula para Retirar la tapa del envase y agitar suavemente el contenido por
los umbrales determinados para los canales 1, 2 y 3. Restar el rotación a mano o por medios mecánicos, teniendo cuidado de
tamaño de partícula para el canal 2 del tamaño para el canal 3. no introducir contaminación o burbujas de aire. Agitar
Restar el tamaño de partícula para el canal 1 del tamaño para continuamente durante todo el análisis. Tomar directamente
el canal 2. Los valores determinados de ésta manera son las del envase, tres alícuotas de no menos de 5.0 mL cada una,
desviaciones estándar observadas en el lado positivo y obtener los recuentos de partículas y descartar los datos de la
negativo del recuento medio para el estándar de 10 µm. primera alícuota.
Calcular el porcentaje de resolución del sensor mediante la Nota: completar el procedimiento en 5 min.
fórmula: Repetir el procedimiento, empleando la suspensión en lugar
del blanco. A partir de los promedios de los recuentos
𝟏𝟎𝟎 (√(𝑺𝒐𝟐 − 𝑺𝒊𝟐 /𝑫)) resultantes del análisis de las dos porciones de la suspensión a
no menos de 10 µm y del análisis de las dos de porciones del
Donde: blanco a no menos de 10 µm, calcular el número de partículas
So = Desviación estándar mayor determinada para la esfera. en cada mililitro mediante la fórmula:
Si = Desviación estándar proporcionada por el proveedor de
las esferas. 𝑷𝒔 − 𝑷𝒃 / 𝑽
D = Diámetro en micrometros, de las esferas tal como lo
especifica el proveedor. Donde:
La resolución no es mayor del 10 %. Ps = Recuento de partículas promedio obtenido a partir de la
suspensión.
Método automatizado. Para algunos contadores existen Pb = Recuento de partículas promedio obtenido a partir del
programas que permiten la determinación automatizada de la blanco.
resolución de sensor. Estos programas pueden estar incluidos V = Volumen promedio en mililitros, de las 4 porciones
en el instrumento o emplearse conjuntamente con una analizadas.
microcomputadora conectada al contador. El uso de estos Repetir los cálculos, empleando los resultados obtenidos a no
métodos automatizados es apropiado si el proveedor certifica menos de 15 µm.

MGA 0651. DETERMINACIÓN DE PARTÍCULAS EN SOLUCIONES INYECTABLES

 488 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos 13.0
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Interpretación. El instrumento cumple los requisitos de Colocar en el recipiente un volumen de 50 mL de agua

exactitud del recuento de partículas, si el recuento obtenido a destilada o desionizada, filtrada y agitar la muestra en el
no menos de 10 µm y la relación entre el recuento obtenido material de vidrio limpio por inversión o rotación.
a no menos de 10 µm con el obtenido a no menos de 15 µm se Desgasificar mediante un baño de ultrasonido (de 80 a 120 W)
ajusta a los valores que acompañan a la SRef de recuento de durante 30 s o dejar reposar. Agitar por rotación
partículas. Si el instrumento no cumple con los requisitos de (manualmente) el envase que contiene la muestra de agua o
exactitud del recuento de partículas, recalibrar con la mecánicamente para suspender las partículas. Tomar las
suspensión y el blanco restantes. Si los resultados de la alícuotas y obtener los recuentos de partículas para tres muestras
segunda prueba están dentro de los límites establecidos consecutivas de no menos de 5.0 mL cada una, descartando el
anteriormente, el instrumento cumple con los requisitos de la primer recuento. Si se observan más de 10 partículas de 10 µm
prueba para la exactitud del recuento de partículas. Si en el o de mayor tamaño, o más de 2 partículas de 25 µm o de mayor
P segundo intento el sistema no cumple con los requisitos de la tamaño en la muestra combinada de 10 mL, el medio ambiente no
prueba, determinar y corregir la causa de las fallas y probar es el adecuado para el análisis de partículas: el agua destilada
nuevamente el instrumento. o desionizada, filtrada, y los materiales de vidrio no se han
preparado adecuadamente o el contador está generando
Método 2 recuentos erróneos. En este caso, habrá que repetir el
Procedimiento. Empleando esferas calibradoras estándar con procedimiento descrito anteriormente hasta que las condiciones
un diámetro nominal de 15 a 30 µm, preparar una suspensión de análisis sean las adecuadas para la realización de la prueba.
que contenga entre 50 y 200 partículas por mililitro. Preparación de prueba. Proceder según se indica en
Desgasificar la suspensión sometiéndola a un baño de preparación de prueba en el Recuento microscópico de
ultrasonido (de 80 a 120 atts) durante 30 s o dejar reposar. partículas comenzando desde Preparar las muestras en la
Suspender las partículas agitando suavemente y llevar a cabo secuencia siguiente , hasta donde dice: Para in ectables de
cinco recuentos en volúmenes de 5.0 mL de suspensión, gran olumen se prueban las unidades indi iduales . Para
empleando un contador con umbral para partículas de 10 µm inyecciones de gran volumen o de pequeño volumen donde el
de tamaño. Obtener el recuento medio de partículas por volumen de la unidad es de 25 mL o más, se pueden analizar
mililitro. Colocar un volumen de esta suspensión que contenga menos de 10 unidades individuales, sobre la base de la
de 250 a 500 partículas en un embudo filtrante preparado definición de un plan de muestreo adecuado.
según se describe en Aparatos de filtración en recuento
microscópico de partículas. Secar la membrana, contar el DETERMINACIÓN DE PRODUCTO. Dependiendo de la
número total de esferas estándar retenidas en el filtro de forma farmacéutica a analizar, proceder según se indica en la
membrana. Este recuento debe estar dentro del 20 % del categoría que le corresponda de acuerdo a lo que se describe a
recuento instrumental medio por mililitro para la suspensión. continuación.
a) Preparaciones líquidas donde el volumen individual es
Condición ambiental para la prueba. Realizar la prueba en menor de 25 mL. Preparar los envases según se indica en
un medio ambiente que no contenga una cantidad significativa preparación de prueba. Mezclar y suspender las partículas de
de partículas. Las muestras se deben limpiar de tal modo que cada unidad invirtiendo la unidad 20 veces.
cualquier nivel de partículas extrañas agregadas no influya de Nota: debido al pequeño volumen de algunos productos,
manera significativa sobre el resultado de la prueba. La puede ser necesario agitar la solución más vigorosamente para
muestra, los materiales de vidrio, los tapones y cualquier otro suspender las partículas completamente.
equipo requerido deben prepararse, de preferencia, en un En un recipiente limpio, abrir y combinar el contenido de 10 o
medio ambiente protegido por filtros de aire de alta eficiencia más unidades para obtener un volumen de no menos de 20 mL.
( PA). Durante la preparación de las muestras el personal Desgasificar la solución combinada por un baño de ultrasonido
debe usar guantes que no tengan polvo y vestimenta de la cual (de 80 a 120 W) durante 30 s o dejar reposar hasta que la
no se desprendan partículas. Limpiar los materiales de vidrio, solución no presente burbujas de aire. Agitar ligeramente el
los tapones y cualquier otro equipo requerido sumergiendo y contenido del recipiente por rotación, a mano o
tallando con una solución de detergente no iónico caliente. mecánicamente, teniendo cuidado de no introducir burbujas de
Enjuagar bajo un chorro de agua potable y posteriormente con aire o contaminación. Tomar un mínimo de tres alícuotas, cada
agua destilada o desionizada filtrada. También pueden una no menor de 5.0 mL y colocarlas en el sensor del sistema
emplearse solventes orgánicos para facilitar la limpieza. de recuento por obstrucción de luz. Descartar los datos de la
primera alícuota.
Nota: estos pasos describen una manera de limpiar el equipo. b) Preparaciones líquidas donde el volumen individual es
De forma alternativa se pueden obtener comercialmente de 25 mL o mayor. Preparar los envases según se indica en
equipos libres de partículas que resultan adecuados para estas preparación de prueba. Mezclar y suspender las partículas de
pruebas. Finalmente, enjuagar el equipo con agua desionizada cada unidad invirtiendo la unidad 20 veces. Desgasificar la
o destilada, filtrada, empleando una piseta con un filtro en el solución combinada por un baño de ultrasonido (de 80 a 120 W)
extremo u otra fuente de agua filtrada, como por ejemplo, agua durante 30 s o dejar reposar hasta que la solución no presente
destilada o desionizada pasada a través de un filtro con una burbujas de aire. Retirar el tapón, e insertar la sonda del
porosidad de 1.2 µm o menor. contador en el centro de la solución. Agitar ligeramente el
Para obtener los recuentos del blanco, emplear un recipiente contenido del envase por rotación, a mano o mecánicamente,
limpio del tipo y volumen empleado en la prueba. teniendo cuidado de no introducir burbujas de aire o

MGA 0651. DETERMINACIÓN DE PARTÍCULAS EN SOLUCIONES INYECTABLES

 MÉTODOS GENERALES DE ANÁLISIS 489
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contaminación. Tomar un mínimo de tres alícuotas, cada una Vt = Volumen de muestra combinada en mililitros.
no menor de 5.0 mL, y colocarlas en el sensor del sistema de Va = Volumen en mililitros de cada porción analizada.
recuento por obstrucción de luz. Descartar los datos de la N = Número de envases combinados.
primera alícuota.
Rc) Preparaciones secas o liofilizadas. Preparar los envases Cálculos para muestras individuales (Soluciones
según se indica en preparación de prueba. Abrir el envase, inyectables de pequeño volumen). Promediar los recuentos
teniendo cuidado de no contaminar el contenido o el tapón. obtenidos para las porciones de las alícuotas de 5.0 mL o
Reconstituir según se indica en preparación de prueba, mayores de cada unidad separada analizada y calcular el
utilizando el volumen especificado de agua destilada o número de partículas en cada envase mediante la fórmula:
desionizada, filtrada, o el diluyente específico filtrado, en caso
de que el agua no sea el indicado para la reconstitución. 𝑷 𝑽/ 𝑽𝒂
Colocar el tapón y agitar manualmente el envase hasta la
Donde: P
completa disolución del medicamento.
P = Recuento promedio de partículas promedio obtenido a
Nota: para algunos productos secos o liofilizados, puede ser
partir de las porciones analizadas.
necesario dejar en reposo las unidades durante un intervalo de
V = Volumen, en mililitros, de la unidad probada.
tiempo y luego agitar nuevamente hasta su disolución
Va = Volumen, en mililitros, de cada porción analizada.
completa.
Mezclar y suspender las partículas presentes en cada unidad
Cálculos para muestras de unidades individuales
invirtiendo 20 veces su contenido antes de la prueba. Proceder
(Soluciones inyectables de gran volumen). Promediar los
según se indica para el volumen indicado de la unidad en
recuentos obtenidos para dos o más alícuotas de 5.0 mL
preparaciones líquidas y analizar tomando un mínimo de tres
tomadas de la unidad de solución. Calcular el número de
alícuotas, cada una no menor de 5.0 mL y colocarlas en el
partículas en cada mililitro tomado mediante la fórmula:
sensor del sistema de recuento por obstrucción de luz.
Descartar los datos de la primera alícuota. 𝑷/ 𝑽
d) Productos envasados en compartimentos duales Donde:
diseñados para contener el medicamento y el solvente por P = Recuento de partículas promedio para una muestra
separado. Preparar las unidades a analizar según se indica en individual de 5.0 mL o de mayor volumen.
preparación de prueba. Mezclar cada unidad de acuerdo a lo V = Volumen en mililitros, de la porción tomada.
indicado en la etiqueta, agitando cada unidad para asegurar un
mezclado perfecto de los componentes separados y la Para todos los tipos de producto, si el material analizado ha
disolución del medicamento. Desgasificar las unidades a sido diluido para que disminuya la viscosidad, el factor de
analizar por un baño de ultrasonido (de 80 a 120 W) durante dilución debe tomarse en cuenta para el cálculo del resultado
30 s o dejar reposar hasta que la solución no presente burbujas final de la prueba.
de aire. Proceder según se indica para el volumen adecuado de Interpretación. El inyectable cumple con los requisitos de la
la unidad en preparaciones líquidas y analizar tomando un prueba si el número promedio de partículas presente en las
mínimo de tres alícuotas, cada una no menor de 5.0 mL y unidades analizadas no excede el valor correspondiente
colocarlas en el sensor del sistema de recuento por obstrucción indicado en la tabla 0651.1. Si el número promedio de
de luz. Descartar los datos de la primera alícuota. partículas excede el límite, probar el producto aplicando la
e) Productos etiquetados como producto farmacéutico a Prueba de recuento microscópico de partículas.
granel no para infusión directa. Proceder según se indica en
preparaciones líquidas cuando el volumen es de 25 mL o Tabla 0651.1. Recuento de partículas por obstrucción de luz.
mayor. Calcular el resultado de la prueba en base al volumen Inyectables ≥ 10µm ≥ 25µm
de una porción que sea equivalente a la dosis máxima
De pequeño volumen 6 000 por envase 600 por envase
declarada en la etiqueta. Por ejemplo, si el volumen total del
De gran volumen 25 por mL 3 por mL
envase a granel es de 100 mL y el volumen de la dosis máxima
es 10 mL, el promedio del recuento de partículas por obstrucción
de luz por mililitro deberá ser multiplicado por 10 para obtener MÉTODO II. PRUEBA DE RECUENTO MICROSCÓPICO
el resultado de la prueba en base a la dosis máxima de 10 mL. DE PARTÍCULAS. Se puede aplicar a las soluciones
Nota: para los cálculos siguientes, considerar que el volumen inyectables de pequeño y de gran volumen. Esta prueba cuenta
de dosis máxima es el equivalente al contenido del envase total. las partículas subvisibles, esencialmente sólidas, en base al
Cálculos para las muestras combinadas (Soluciones volumen o al envase después de su recolección sobre una
inyectables de pequeño volumen). Promediar los recuentos membrana filtrante microporosa. Algunos productos no
de dos o más porciones de la alícuota analizada. Calcular el pueden ser analizados de manera satisfactoria por el método
número de partículas en cada envase mediante la fórmula: por obstrucción de luz. En tales casos, las monografías
individuales especifican solamente esta valoración
𝑷 𝑽𝒕 / 𝑽𝒂 𝑵 microscópica. Las soluciones que quedan exentas de éste
análisis microscópico, se identifican en base a la monografía.
Donde: Se pueden citar como ejemplos las soluciones de viscosidad
P = Recuento de partículas promedio obtenido a partir de las demasiado alta para filtrar fácilmente (ej. dextrosa
porciones analizadas. concentrada, soluciones de almidón, o dextranas).

MGA 0651. DETERMINACIÓN DE PARTÍCULAS EN SOLUCIONES INYECTABLES

 490 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos 13.0
_________________________________________________________________

Cuando se lleva a cabo la valoración microscópica, no se debe aumento nominal, acromático planar o de mejor calidad, con
intentar la medición o la enumeración de materiales amorfos, una abertura numérica mínima de 0.25, y compatible con un
semilíquidos o morfológicamente indistintos que tengan la iluminador episcópico. Los oculares deben dar un aumento de
apariencia de una mancha o decoloración sobre la superficie 10×. Además, el ocular debe estar diseñado para aceptar y
de la membrana. Estos materiales muestran poco o ningún enfocar en un ocular cuadriculado. El microscopio debe tener
relieve en su superficie y presentan un aspecto gelatinoso o una platina mecánica capaz de sostener y recorrer el área de
similar al de una película. Debido a que este material en filtración en su totalidad o un filtro de membrana de 25 o 47 mm.
solución consta de unidades que están en el orden de 1 µm o Iluminadores. Se requieren dos iluminadores. Uno es
menores y sólo pueden contarse después de su aglomeración o un iluminador auxiliar externo, de foco ajustable, para dar
deformación en una membrana analítica, puede ser de utilidad iluminación oblicua en un ángulo de incidencia de 10 a 20°.
el analizar una muestra de la solución por el método de El otro es un iluminador episcópico interno y pueden estar
P recuento de partículas por obstrucción de luz para la equipados con filtros de luz diurna de color azul para reducir
interpretación del resultado. la fatiga del operador durante el uso.

APARATO DE PRUEBA Cuadrícula para la medición del diámetro de las

Microscopio. Utilizar un microscopio binocular compuesto partículas. Emplear un ocular cuadriculado circular (véase
que corrija los cambios en la distancia interpupilar mediante figura 0651.1) adecuado para el modelo del objetivo y ocular
el mantenimiento de una longitud de tubo constante. del microscopio, en que los círculos de clasificación por
La combinación de lentes del objetivo y el ocular debe dar un tamaño estén dentro del 2 % del tamaño establecido en el
aumento de 100 ± 10×. El objetivo debe ser de 10× de plano de la platina del instrumento.

Figura 0651.1. Cuadriculado para la medición del diámetro de partículas. El círculo grande dividido por cortes capilares
en cuadrantes se denomina Campo Cuadriculado de Visión (CCV). Los artículos transparentes y de color negro, con diámetros de
10 y 25 µm en 100× se proporcionan como elementos de comparación para clasificar las partículas por tamaño.

Micrómetro. Emplear un micrómetro de platina con capacidad suficiente para separar el área donde se lleva a cabo
graduaciones de 10 µm, certificado por el Sistema Nacional de el análisis, con aire filtrado por filtros de aire de alta eficiencia
Certificación (SNC). (HEPA) con no más de 3 530 partículas (0.5 µm o mayores)
Aparatos de filtración. Emplear un embudo filtrante por metro cúbico. Para la determinación del blanco, tomar un
adecuado para el volumen que vaya a ser analizado, que tenga volumen de 50 mL de agua destilada o desionizada, filtrada.
un diámetro mínimo aproximado de 21 mm . El embudo puede Aplicar el vacío, y extraer el volumen total de agua a través
ser de plástico, de vidrio o de acero inoxidable. Colocar el del filtro de membrana. Retirar la membrana de la base del
filtro sobre una criba de acero inoxidable o una placa de vidrio embudo y colocarla sobre una cinta con adhesivo en ambas
sinterizado para que actúe como difusor del filtrado. El aparato caras, en un portaobjetos o una caja Petri. Después de dejar
de filtración se equipa con una fuente de vacío, un dispensador secar la membrana, examinar microscópicamente a una
de solvente capaz de entregar solvente filtrado a través de un ampliación de 100×. Si no más de 20 partículas de 10 µm o
filtro con capacidad para retener partículas de 1.2 µm o mayores y 5 partículas de 25 µm o mayores están presentes
menores, a un intervalo de presiones de 68.94 a 551.58 kPa, y dentro del área de filtración, el nivel de partículas del ambiente
membranas filtrantes (de 25 o 47 mm , cuadriculadas o no, de es lo suficientemente bajo para la realización de la valoración
color negro o gris oscuro, o de un material adecuado microscópica. Durante todo éste procedimiento es conveniente
compatible con el producto, con una porosidad de 1.0 µm o emplear guantes libres de polvo, así como materiales de vidrio
menor). Emplear pinzas de punta roma para manipular los y equipo completamente limpios. Antes de realizar la prueba,
filtros de membrana. limpiar todas las superficies del área de flujo laminar con un
Condición ambiental de la prueba. Una campana de flujo solvente apropiado. Los materiales de vidrio y los equipos
laminar u otro dispositivo con flujo de aire laminar con una deben haber sido enjuagados sucesivamente con una solución

MGA 0651. DETERMINACIÓN DE PARTÍCULAS EN SOLUCIONES INYECTABLES

 MÉTODOS GENERALES DE ANÁLISIS 491
_________________________________________________________________

de detergente libre de residuos, agua caliente, agua destilada o Preparación del aparato de filtración. Lavar
desionizada, filtrada, y 2-propanol filtrado. preferentemente, el embudo de filtración, la base y el difusor,
Nota: antes de usar, filtrar el agua destilada o desionizada y el con una solución de detergente líquido y agua caliente;
2-propanol empleando filtros que tengan una porosidad de 1.2 enjuagar con agua caliente. Después de este enjuague, realizar
µm o menor. un segundo enjuague con agua destilada o desionizada,
Realizar los enjuagues bajo un flujo laminar equipado con filtrada, empleando un chorro presurizado de agua sobre todas
filtros HEPA. Dejar secar los materiales de vidrio y los las superficies exteriores e interiores del aparato de filtración.
aparatos de filtración bajo la campana, separados de todas las Repetir el procedimiento del enjuague a presión utilizando
otras operaciones. De preferencia, la campana debe estar 2-propanol filtrado. Finalmente, empleando el líquido de
ubicada en un cuarto separado provisto con aire filtrado y enjuague a presión, enjuagar el aparato con agua destilada o
acondicionado y mantenido bajo presión positiva con respecto desionizada, filtrada. Tomar un filtro de membrana de su
a las áreas adyacentes. envase empleando una pinza limpia de punta roma. Emplear un
Preparación del microscopio. Colocar el iluminador auxiliar chorro a baja presión, de agua destilada o desionizada, filtrada, P
cerca de la platina del microscopio, enfocar el iluminador para para lavar ambos lados del filtro a fondo, comenzando por la
dar un área concentrada de iluminación sobre una membrana parte superior, barriendo de atrás hacia delante, hasta el fondo.
filtrante colocada en la platina del microscopio. Ajustar la Armar el aparato de filtración limpio con el difusor en la base
altura del iluminador para que el ángulo de incidencia de la luz de filtración, y colocar el filtro sobre el difusor. Colocar el en
sea de 10 a 20° con respecto a la horizontal. Utilizando el la parte superior de la base de filtración, y fijarlo en su lugar.
iluminador episcópico interno de campo brillante, abrir
PROCEDIMIENTO DE PRUEBA
totalmente el campo y la abertura de los diafragmas. Centrar el
Preparaciones de prueba. Preparar las muestras en la
filamento de la lámpara, y enfocar el microscopio en un filtro
siguiente secuencia. Fuera de la campana de flujo laminar,
que contenga partículas. Ajustar la intensidad de iluminación
retirar los tapones exteriores, bandas de sellado, y cualquier
reflejada hasta que las partículas sean claramente visibles y
etiqueta de papel desprendida o rota. Enjuagar el exterior de
muestren sombras pronunciadas. Ajustar la intensidad de
los envases con agua destilada o desionizada, filtrada, según se
iluminación episcópica al grado más bajo y enseguida
describe en condición ambiental para la prueba. Proteger los
aumentar la intensidad de iluminación episcópica hasta que las
envases de la contaminación ambiental hasta que se analicen.
sombras producidas por las partículas muestren la disminución
Tomar las alícuotas de prueba de tal manera que se evite la
menos perceptible de contraste.
posibilidad de generar partículas que puedan contaminar la
muestra. Los envases con tapones removibles pueden
Operación de la retícula para la medición del diámetro de
muestrearse directamente en el momento de quitar el tapón.
partículas. El error relativo de la retícula empleada debe
También pueden emplearse dispositivos con aguja que penetre
medirse inicialmente con un micrómetro de platina certificado
los tapones de las unidades. Los productos envasados en
por el SNC. Para determinarlo, alinear la escala micrométrica
envases plásticos flexibles pueden muestrearse haciendo un
de la cuadrícula con la del micrómetro de la platina, de manera
corte en el tubo de administración o cortando un vértice de la
que queden paralelas (comparar las escalas, empleando el
unidad de prueba con un elemento cortante limpio.
mayor número posible de graduaciones). Leer el número de
Los productos secos o liofilizados se pueden reconstituir ya sea
divisiones de la escala del ocular cuadriculado (DEO),
quitando el tapón para añadir el diluyente o inyectando el
comparado con las divisiones del micrómetro de la platina
diluyente mediante una jeringa hipodérmica que posea un filtro
(DMP). Calcular el error relativo mediante la fórmula:
de 1.2 µm o menor. Si las muestras se van a combinar, quitar
𝟏𝟎𝟎[(𝑫𝑬𝑶 − 𝑫𝑴𝑷)⁄𝑫𝑴𝑷] el tapón y vaciar el contenido en un recipiente limpio. El
número de muestras debe ser el adecuado para proporcionar
Se acepta un error relativo del ± 2 %. La técnica básica de
una evaluación estadísticamente válida de que un lote
medición aplicada en el uso de la cuadrícula para la medición
completo o un grupo grande de unidades, representado por las
del tamaño de partícula consiste en transformar mentalmente
muestras, cumple o excede los límites. Si el volumen en el
la imagen de cada partícula en un círculo y luego compararlo
envase es menor, realizar la prueba con una solución
con los círculos de referencia de la retícula de 10 y 25 µm. El
combinada de diez o más unidades. Las unidades de
proceso de medición por tamaño se lleva a cabo sin sobreponer
inyectables de pequeño volumen pueden analizarse
la partícula en los círculos de referencia; las partículas no se
individualmente si el volumen de la unidad individual es de
mueven de sus lugares dentro del campo de la cuadrícula (el
25 mL o mayor. Para inyectables de gran volumen, se analizan
círculo grande) para compararlas con los círculos de
unidades individuales. Para las inyectables de pequeño
referencia. Emplear el diámetro interno de los círculos claros
volumen que contienen un volumen de 25 mL o más, probadas
de referencia de la cuadrícula clara para clasificar por tamaño
individualmente, y para inyectables de gran volumen, se
a las partículas blancas y transparentes. Emplear el diámetro
prueba todo el volumen de la unidad. Para inyectables de gran
exterior de los círculos de referencia de color negro de la
volumen o para inyectables de pequeño volumen donde el
cuadrícula para clasificar por tamaño a las partículas obscuras.
volumen de la unidad individual es de 25 mL o mayor, se
Rotar la cuadrícula en el ocular derecho del microscopio para
pueden probar menos de 10 unidades individuales, en base a la
que la escala lineal quede localizada en la parte inferior del
definición de un plan de muestreo adecuado.
campo, enfocando rápida y definidamente la cuadrícula
mediante el ajuste del anillo derecho de la dioptra del ocular DETERMINACIÓN DE PRODUCTO. Dependiendo de la
mientras se observa la muestra fuera de foco. Enfocar el forma farmacéutica que se esté analizando, proceder según se
microscopio sobre la muestra, mirando únicamente a través del indica en la categoría más apropiada que se enuncia a
ocular derecho. Enseguida, mirando a través del ocular continuación.
izquierdo, ajustar la dioptra del ocular izquierdo para enfocar Productos líquidos. Mezclar perfectamente las unidades a
con definición la muestra. analizar invirtiéndolas 20 veces. Abrir las unidades de manera

MGA 0651. DETERMINACIÓN DE PARTÍCULAS EN SOLUCIONES INYECTABLES

 492 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos 13.0
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tal que se evite la mínima generación de partículas por parte Nota: para los cálculos, considerar que ésta porción es el
del ambiente. Para productos con menos de 25 mL de equivalente del contenido de un envase lleno.
volumen, abrir y combinar el contenido de 10 o más unidades
en un recipiente limpio. Filtrar las unidades de inyectables de CONTEO DE PARTÍCULAS. La prueba microscópica
gran volumen en forma individual. Se pueden filtrar descrita en esta sección es flexible con respecto al modo de
individualmente las unidades de inyectables de pequeño recuento, ya que pueden contar partículas por mililitro tanto en
volumen de 25 mL o más mediante el empleo del embudo de muestras que contengan 1 partícula por mililitro como en
filtración. Transferir el volumen total de una solución muestras que contengan números significativamente mayores
combinada o de una unidad individual, y aplicar vacío. Si el de partículas por miililitro. Este método puede emplearse
volumen de la solución a ser filtrada excede el volumen del cuando se cuentan todas las partículas en la superficie de la
embudo de filtración, verter poco a poco porciones de la membrana de análisis o cuando solamente se cuentan aquellas
solución hasta filtrar el total del volumen. partículas en un área fraccionada de la superficie de la
P Si se emplea el procedimiento de recuento parcial (véase membrana.
Procedimiento de recuento parcial en conteo de partículas),
PROCEDIMIENTO DE RECUENTO TOTAL. En el
no permitir que el volumen del líquido en el embudo de
rendimiento de un recuento total, se ignora el campo
filtración baje más allá de la mitad del volumen del embudo
cuadriculado de visión (CCV) definido por el círculo grande de
entre cada uno de los llenados.
la cuadrícula, y se emplea el cruce capilar vertical. Barrer la
Nota: emplear un embudo filtrante adecuado para el volumen
membrana totalmente de derecha a izquierda en una trayectoria
de solución si se emplea el procedimiento de recuento parcial,
que colinde pero no se sobreponga a la primera trayectoria.
para asegurar la distribución homogénea de partículas sobre la
Repetir este procedimiento, moviéndose de izquierda a
membrana.
derecha, y nuevamente hacia la izquierda, hasta que todas las
Después de agregar la última porción de la solución, comenzar
partículas de la membrana hayan sido contadas. Registrar el
a enjuagar las paredes del embudo filtrante aplicando en forma
número total de partículas de 10 µm o mayores y de 25 µm o
circular un chorro a baja presión de agua destilada o
mayores. Para inyectables de gran volumen, calcular el
desionizada, filtrada, y dejar de enjuagar antes que el volumen
recuento de partículas, en partículas por mililitros, para la
llegue por debajo de un cuarto del nivel de llenado. Mantener
unidad analizada, mediante la fórmula:
el vacío hasta haber filtrado todo el líquido. Retirar el embudo
de filtración de la base mientras se mantiene el vacío, cerrar el 𝑷/𝑽
vacío, y quitar la membrana del filtro con pinzas de punta Donde:
roma. Colocar la membrana sobre una caja Petri u otro objeto P = Número total de partículas contadas.
similar, fijarla con una cinta con adhesivo en ambas caras y V = Volumen, en mililitros, de la solución.
etiquetar para identificar la muestra. Secar el filtro al aire en la Para inyectables de pequeño volumen, calcular el recuento de
campana de flujo laminar dejando la tapa del envase semiabierta. partículas, en partículas por envase, mediante la fórmula:

Productos secos o liofilizados. Para analizar un vial con 𝑷/𝑵

polvo seco o un envase similar de medicamento en polvo, Donde:
reconstituir el material con un diluyente filtrado adecuado, P = Número total de partículas contadas.
empleando el método con menor probabilidad de introducir N = Número de unidades combinadas (1 en el caso de una sola
contaminación extraña, según se indica en preparación de unidad).
prueba en recuento de partículas por obstrucción de luz.
Empleando una solución combinada de 10 unidades o más, o PROCEDIMIENTO DE RECUENTO PARCIAL. Si se
el número deseado de unidades individuales, proceder como realizara un recuento parcial de partículas sobre una membrana,
se indica en preparaciones líquidas. el analista debe asegurar inicialmente que existe una
Productos envasados en compartimentos duales diseñados distribución homogénea de partículas en la membrana. Esto se
para contener el medicamento y el solvente por separado. comprueba barriendo rápidamente para buscar agregados
Preparar cada unidad según se indica en la etiqueta, agitando de partículas, los cuales no deben estar presentes. Contar las
el contenido vigorosamente y de tal manera que se asegure la partículas de 10 µm o mayores en un CCV en el borde del área
disolución completa de los componentes; proceder según se de filtración así como en el centro de la membrana. El número
indica en Preparaciones líquidas. de partículas 10 µm o mayores en el CCV con el recuento total
Productos en envases a granel no para infusión directa, o más alto de partículas, no debe ser más del doble del CCV con
envases multidosis. Proceder según se indica en Preparaciones el recuento más bajo de partículas. Rechazar un filtro que no
líquidas, filtrando el volumen total de la unidad. cumpla con estos criterios, y preparar otro si se emplea un
Calcular el resultado de la prueba en base al volumen de una procedimiento de recuento parcial, o sino, analizar esta
porción que sea equivalente a la dosis máxima declarada en la membrana por el método de recuento total. El número normal
etiqueta. Considerar que ésta porción es el equivalente al de CCV contado para un recuento parcial es de 20. Si se desea
contenido del envase total. Por ejemplo, si el volumen total un intervalo de confianza más pequeño con respecto al
del envase a granel es de 100 mL y el volumen de la dosis resultado, puede contarse un número de campos y partículas de
máxima es de 10 mL, el resultado de la prueba de recuento del mayor tamaño. Contar todas las partículas que tengan un diámetro
volumen total deberá ser multiplicado por 0.1 para obtener el de área circular de 10 µm o mayor y de 25 µm mayor dentro
resultado de la prueba en base a la dosis máxima de 10 mL. del CCV y aquellas que estén en contacto con el lado derecho

MGA 0651. DETERMINACIÓN DE PARTÍCULAS EN SOLUCIONES INYECTABLES

 MÉTODOS GENERALES
________________________________________ DE ANÁLISIS 493
_________________________

del círculo del CCV. No contar las partículas fuera del CCV.
Ignorar aquellas que toquen el lado izquierdo del círculo del
MGA 0661. DETERMINACIÓN DE
CCV. La línea divisora entre el lado derecho y el izquierdo del PENICILINA G
círculo del CCV es el filamento vertical.
Nota: emplear el mejor juicio posible sobre el tamaño de la Este procedimiento es utilizado para determinar el contenido
partícula sin cambiar la amplificación o la iluminación del de la molécula de penicilina G en una sustancia antibiótica
microscopio. cuando sea requerido en la monografía individual. Preparar todos
Para realizar un recuento parcial de partículas sobre una los reactivos en un periodo no mayor a tres días antes de su uso.
membrana, comenzar en el borde derecho del centro del área de Saturar los siguientes reactivos con penicilina G-N-etil-piperidina
filtración y empezar a contar los CCV adyacentes. Cuando se (puede usarse el material recuperado de análisis previos) usando
llegue al borde izquierdo del área de filtración, mover a un CCV las cantidades siguientes para cada reactivo: acetato de amilo,
hacia la parte superior del filtro y continuar contando los CCV 2 mg/mL; acetona 3 mg/mL; solución de N-etilpiperidina (1 en
avanzando en la dirección opuesta. El movimiento de un CCV al 5 en acetato de amilo), 3 mg/mL. Enfriar los reactivos de 0 a 8 °C, P
próximo puede ser realizado por cualquiera de los dos métodos filtrar a través de un filtro de vidrio poroso inmediatamente
que se indican a continuación. Un método es definir un punto de antes de usarlos y mantenerlos entre 0 y 8 °C.
referencia (partícula o irregularidad de la superficie del filtro) y Procedimiento. A menos que se especifique otra cosa en la
mover sobre un CCV en relación al punto de referencia. Un segundo monografía individual, pesar exactamente de 60 a 70 mg de la
método es emplear el vernier de la platina del microscopio para sustancia problema y transferir a un tubo de vidrio con tapón,
mover un milímetro entre los CCV. Para facilitar esto, ajustar la disolver con 2 mL de agua y enfriar entre 0 y 8 °C. Adicionar
posición de los controles x, y en la platina del microscopio a un 2 mL de acetato de amilo y 0.5 mL de solución de ácido
número entero en la posición inicial del borde derecho del centro fosfórico (1:5) a la misma temperatura, tapar el tubo y agitar
del área de filtración; luego entonces cada CCV será una división vigorosamente durante 15 s. Centrifugar durante 20 s para
completa del movimiento del control x de posición de la platina. obtener una separación de las capas. Usando una jeringa y
Si se llega a la parte superior del área de filtración antes de aguja adecuadas, tomar la capa superior del acetato de amilo y
obtener el número deseado de CCV, comenzar nuevamente en filtrarla a través de un embudo con filtro de vidrio poroso y
el borde derecho del centro del área de filtración, un CCV por aproximadamente 0.5 g de gel de sílice seco (malla 6 a 16).
debajo del utilizado la primera vez. Esta vez mover hacía abajo Dejar el acetato de amilo en contacto con el gel de sílice durante
en la membrana cuando se llegue al final de una fila de los CCV. 20 s, hacer vacío y colectar el filtrado en un tubo de ensayo
Continuar como antes hasta que el número de CCV esté completo. rodeado de hielo dentro de un matraz Kitasato. Después de 3 min
Para inyectables de gran volumen, si se emplea un procedimiento de la acidificación con el ácido fosfórico, transferir 1 mL del
de recuento parcial para los intervalos de tamaño de 10 µm y 25 µm, filtrado hacia un tubo de fondo plano de 15 × 50 mm tarado,
calcular las partículas por mililitro mediante la fórmula: conteniendo 1.0 mL de acetona y 0.5 mL de solución de
𝑷𝑨𝒕 / 𝑨𝒑 𝑽 N-etilpiperidina. Colocar el tubo tapado en un recipiente más
Donde: grande, tapar y enfriar en refrigerador durante 2 h. Eliminar el
P = Número de partículas contadas. líquido del precipitado en el tubo utilizando una jeringa provista
At = Área total de filtración de la membrana, en milímetros de un filtro previamente tarado. Lavar el filtro con 1 mL de acetona
cuadrados. usando una jeringa y una aguja fina. Colocar el filtro en el tubo
Ap = Área parcial contabilizada en milímetros cuadrados en de vidrio, secar a temperatura ambiente en un desecador durante
base al número de campos cuadriculados contados. 1 h y pesar.
V = Volumen, en mililitros, de solución filtrada. Determinar la cantidad de precipitado y calcular el contenido
Para una solución combinada (para unidades de inyectables de de penicilina G, en % en la muestra con la fórmula siguiente:
pequeño volumen que contengan menos de 25 mL) o para una
(𝟑𝟑𝟒. 𝟑𝟗 ⁄ 𝟒𝟒𝟕. 𝟓𝟗) (𝟐𝟎𝟎 𝑵) ⁄ (𝑴)
sola unidad de un inyectable de pequeño volumen, calcular el
número de partículas por unidad mediante la fórmula: Donde:
𝑷𝑨𝒕 / 𝑨𝒑 𝑵 334.39 = Peso molecular de la penicilina G.
Donde: 447.59 = Peso molecular de la sal N-etilpiperidina de la
N = Número de unidades contadas (1 en el caso de una sola penicilina G.
unidad). Los demás términos están definidos anteriormente. Para N = Peso del precipitado en miligramos.
todos los tipos de producto, si el material analizado se ha diluido M = Peso de la muestra en miligramos.
para que disminuya la viscosidad, el factor de dilución debe
tomarse en cuenta para el cálculo del resultado final de la prueba.

INTERPRETACIÓN. El inyectable cumple con los MGA 0670. PÉRDIDA POR IGNICIÓN
requisitos de la prueba si el número de partículas promedio
presente en las unidades probadas no excede los valores Este procedimiento tiene la finalidad de determinar el
enumerados en la tabla 0651.2. porcentaje de la muestra en estudio que se volatiliza bajo las
condiciones especificadas.
Tabla 0651.2. Recuento de partículas
Llevar a cabo la prueba con material en polvo fino; si hay
por el método microscópico.
grumos romperlos con la ayuda de un mortero antes de pesar
Inyectables ≥10µm ≥ 25µm la muestra. Hacer la pesada sin ninguna preparación de la
De pequeño volumen 3 000 por envase 300 por envase muestra, a menos que la monografía individual indique un
De gran volumen 12 por mL 2 por mL secado preliminar a una temperatura más baja, o cualquier otro

MGA 0661. DETERMINACIÓN DE PENICILINA G