02 - Métodos de Avaliação de Alimentos - Nutrição Animal

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21/11/2017 02 - Mtodos de avaliao de alimentos - Nutrio Animal

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Equipe de trabalho A anlise dos alimentos um dos principais pontos a ser
Grupo de discusso observado na nutrio animal. O objetivo principal da anlise
Infra-estrutura o de se conhecer a composio qumica, alm de verificar a
Fotos ensilagem
identidade e pureza, sejam elas de natureza orgnica ou
Pragramao de uso
inorgnica.
do LNA
Notcias atuais Um estudo mais completo dos alimentos e forragens
Ps-Graduao compreender o conhecimento das propriedades gerais:
Nutrio Ruminantes
aspecto, aroma, sabor, alteraes, estrutura microscpica e,
UESC ainda, a determinao do teor das substncias nutritivas, por
Datas das Avaliaes
intermdio das anlises aproximativas. Alm da anlise
Horrio de Aulas
aproximativa de um alimento, o nutricionista deseja conhecer
PROGRAMA DA
DISCIPLINA tambm sua digestibilidade, isto , a parte do alimento que
Resultado das estaria disponvel para o animal.
Avaliaes
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1. Valor nutritivo dos alimentos
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O conjunto de propriedades apresentadas por um
alimento relaciona-se diretamente com a qualidade dos
constituintes qumicos presentes no mesmo. Nos alimentos de
um modo geral, os constituintes qumicos podem ser agrupados
em duas categorias, conforme mostra a Tabela 1 a seguir.

Tabela 1. Constituintes qumicos dos alimentos

Constituintes qumicos

Bsicos ou nutritivos Secundrios

gua Enzimas

Protenas cidos orgnicos

Carboidratos Compostos volteis

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Gorduras Pigmentos

Minerais Pectinas

Vitaminas Substncias
aromticas

Essas substncias so responsveis pelas


caractersticas nutritivas e/ou sensoriais dos alimentos, atuando
de modo diverso, como pode ser visualizado na Tabela 2.

Tabela 2. Atuao dos compostos qumicos nas


caractersticas nutritivas e sensoriais dos alimentos

Caractersticas do Constituinte
alimento responsvel

Valor nutritivo Protenas

Carboidratos

Gorduras

Minerais

Vitaminas

Cor Enzimas

Pigmentos, etc

Sabor cidos orgnicos

Aucares

Compostos fenlicos

Odor leos essenciais

Compostos volteis,
etc

Textura Pectinas

Gomas

Protenas

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Algumas substncias so chamadas acessrios e


so importantes na organizao dos sistemas biolgicos,
conforme mostra a Tabela 3.

Tabela 3. Substncias acessrios dos alimentos

Substncias acessrios importantes na organizao


dos sistemas biolgicos

Enzimas Vitaminas Sais minerais Hormnios

2. Mtodos de avaliao dos alimentos

2.1. Anlises Qumicas e Bromatolgicas

Compreende-se como anlise qumica o conjunto de


reaes qumicas e tcnicas de laboratrio empregado para
identificar as espcies qumicas formadoras de um material,
bem como descobrir em que quantidade essas espcies esto
presentes no material. J a anlise bromatolgica identifica o
valor nutritivo dos alimentos em termos de grupos de
compostos qumicos como, por exemplo, Fibra em Detergente
Neutro (FDN): lignina, cinza insolvel, celulose, hemicelulose,
protena insolvel. Portanto, alguns componentes dos alimentos
podem ser determinados por processos qumicos diretos, outros
so determinados em conjunto, pelo fato de no haver interesse
nutricional em separ-los pela inexistncia de mtodos
especficos para sua anlise.

A. Sistema de Weende

O mtodo usado para anlise, que se faz normalmente,


chamado de Weende e foi proposto por Henneberg em 1864, na
Estao Experimental de Weende na Alemanha. Por esse
mtodo que se tem a anlise aproximativa dos alimentos,
desde 1864. As tcnicas ainda so quase as mesmas, com
exceo do nitrognio, que feito segundo o mtodo Kjeldahl
(A.O.A.C., 1970). Segundo Henneberg, o alimento composto
conforme o esquema abaixo da Tabela 4 a seguir.

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Tabela 4. Sistema de Weende proposto por Henneberg


em 1864

Alimento

Matria seca

Matria orgnica Matria


inorgnica

Compostos no Compostos
nitrogenados nitrogenados

(protena)

Carboidratos Extrato
etreo

Fibra Extratos no
nitrogenados

Baseada neste esquema, a Estao Experimental de


Weende props a Anlise Aproximativa do alimento, tambm
conhecida como Composio Centesimal. O princpio da anlise
o de agrupar componentes/nutrientes que apresentem alguma
propriedade em comum.

As anlises clssicas comumente feitas visam a obter


informaes sobre os seguintes componentes dos alimentos:

Tabela 1. Esquema da anlise proximal dos alimentos, com


especificao dos componentes qumicos das fraes.

Frao Componente

Umidade gua livre e de cristalizao; cidos e


bases volteis (quando presentes); alguns
elementos minerais volteis (Na, Cl, F)

Matria Mineral Todos os elementos minerais presentes,


mais carbonatos formados durante a
ignio da amostra

Protena Bruta Protenas, aminocidos, aminas, nitratos,


glicosdeos nitrogenados glicolpides,
(N x 6,25)
vitaminas do complexo B, cidos nuclicos
e outras substncias nitrogenadas

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Extrato Etreo Gorduras, leos, ceras, cidos orgnicos,


pigmentos, esteris, vitaminas
lipossolveis (A, D, E, K) e qualquer
substncia solvel em ter

Fibra Bruta Celulose, hemicelulose, lignina insolvel


em lcali, protena desnaturadas pelo
calor

Extrato no Acares, amidos, pectinas, frutosanas,


Nitrogenado resinas, taninos, pigmentos, algumas
vitaminas hidrossolveis; traos de
celulose, hemicelulose e lignina solvel
em lcali

Fonte: Adaptado de Nunes, 1998

Matria seca: representa o peso do material


analisado totalmente livre de gua, extrada num processo de
secagem. um dado de extrema importncia, principalmente
quando obtido de alimentos volumosos, que normalmente
apresentam umidade varivel. Os valores de matria seca
facilitam a comparao qualitativa dos diversos nutrientes, entre
diferentes alimentos. A composio dos alimentos em tabelas, o
clculo das necessidades dos alimentos e o consumo de
alimentos so expressos em termos de matria seca.

A umidade na rao afeta o valor energtico porque h


menos matria seca na rao e conseqentemente, menos
nutrientes ela pode ter. A gua no combustvel no tecido
animal e no contribui para o valor energtico da rao.
Contudo, o consumo total de gua influencia a utilizao
alimentar, portanto ela afeta tambm o mecanismo fisiolgico,
pois h exigncia de cerca de 1 ml de gua para cada 3 calorias
ingeridas.

Cinza ou matria mineral: utilizada para


estimar a frao bruta de minerais do alimento e tambm para
verificar contaminao na amostra, atravs de compostos que
no fazem parte da frao nutritiva do alimento (solo, metais,
etc.).

O contedo de matria mineral dos alimentos tambm


importante porque a cinza no combustvel e, portanto no
produz energia. Em conseqncia quanto maior o teor de cinza
do alimento, menor ser seu valor energtico.

Protena bruta: Todas as protenas contm


nitrognio. Se tomadas em conjunto, apresentaro em mdia 16
g de nitrognio para 100 g de protena. Identificar cada protena
seria extremamente trabalhoso e mesmo desnecessrio
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interessa, numa primeira avaliao, saber quanto de protena


um alimento contm. Em avaliaes posteriores, pode ser de
interesse saber qual protena o alimento contm. Por isso, na
anlise proximal, determina-se o teor de nitrognio da amostra
(e no o teor de protena), por ser mais fcil. Sabendo-se que
100 g de protena contm 16 g de nitrognio, a regra de trs
fica assim:

16N = 100P, logo, 100/16N = P ou N x 6,25 = P

Fica implcito que toda substncia contendo nitrognio,


presente no alimento, aparecer no resultado da anlise como
protena, mesmo no o sendo da a denominao de protena
bruta. Existem mtodos para se determinar a protena
verdadeira de um alimento, mas so refinamentos que no
pertencem anlise proximal.

Gordura ou extrato etreo: determina a


percentagem de gordura dos alimentos sendo til para
quantificar energia. Os alimentos com altos teores de gorduras
tm altos valores de NDT (Nutrientes Digestveis Totais), pelo
fato das gorduras fornecerem 2,25 vezes mais energia quando
comparadas aos carboidratos e protenas.

Extrato no nitrogenado: um valor calculado a


partir da soma de PB, FB, EE e MM, expressos em termos de MS
e subtrado de 100. Deveria representar os carboidratos de mais
fcil digesto, como os acares e o amido.

Fibra bruta: quanto maior a percentagem desta


frao, menor a qualidade da forragem, podendo limitar o
consumo de matria seca e energia. O grande problema da fibra
bruta que parte dos componentes da parede celular como
celulose e lignina solubilizada, portanto ela subestima o valor
da frao de menor digestibilidade do alimento.

A determinao da Matria Seca (MS) o ponto de


partida da anlise dos alimentos. de grande importncia, uma
vez que a preservao do alimento pode depender do teor de
umidade presente no material e, alm disso, quando se
compara o valor nutritivo de dois ou mais alimentos, temos que
levar em considerao os respectivos teores de matria seca.
Por outro lado, se desejamos comparar o resultado de anlises
realizadas em diferentes pocas, locais ou regies, sempre
fazemos essa comparao em base da matria seca, isto ,
como se o alimento contivesse 100% da matria seca.
Geralmente, feita a MS pelo mtodo indireto, onde se admite
que a perda de peso corresponde ao peso da gua perdida. Na
realidade, outras substncias volteis, alm da gua, so
consideradas tambm, como gua, ocasionando algum erro, o
que vem a ser uma desvantagem do mtodo.

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O esquema de anlise proposto por Weende, apesar de


fornecer uma idia de valor nutritivo do alimento, falho em
vrios aspectos bem conhecidos pelos que esto familiarizados
com este esquema: a anlise de fibra bruta (FB), alm do
empirismo de sua tcnica, composta de celulose e parte da
lignina insolvel. O extrato no nitrogenado (ENN) calculado
por diferena, conseqentemente, todos os erros cometidos nas
anlises anteriores iro refletir nesta frao, e, portanto, no
representa muito bem a frao de carboidratos solveis ou
digestveis. importante chamar a ateno tambm, que
normalmente o valor do extrato etreo (EE) superestimado, j
que alm das gorduras o ter extrai tambm compostos
intimamente ligados ou associados s gorduras, tais como:
fosfatdeos, esteris (colesterol), clorofila, xantofila, leos
volteis, resina etc.; se estiverem presentes na amostra. No
caso dos capins e outros volumosos comete-se grande erro na
determinao do extrato etreo porque eles so relativamente
ricos nestes compostos no lipdicos quando comparados com a
frao lipdica.

O mtodo de Weende no satisfatrio para se obter


informaes sobre os carboidratos, pois inclui no grupo da fibra
bruta a celulose e apenas a lignina insolvel em lcali. Por outro
lado, no grupo dos extratos no nitrogenados, encontram-se
fraes de naturezas diversas, como: amido, hemicelulose,
pectina, lignina solvel em lcali e os carboidratos solveis em
gua. Para os nutricionistas, a solubilizao da lignina dos
alimentos, em propores variveis, um srio defeito no
mtodo da FB, pois esta lignina torna-se parte do contedo do
ENN, que deveria ser o componente mais digestvel do alimento.
A incluso da lignina no ENN resulta, no caso de volumosos, em
digestibilidades do ENN freqentemente menores do que as
digestibilidades da FB.

Esta diviso parece insatisfatria do ponto de vista


nutricional, pois conhecido que a hemicelulose, pectina e
lignina solvel em lcali no apresentam as mesmas
caractersticas nutricionais dos outros componentes englobados
sob o termo extratos no nitrogenados. Uma separao qumica
dos polissacardeos somente seria til se descermos aos
pormenores do peso molecular, posio das ligaes glicosdeas,
etc. Portanto, uma anlise extremamente sofisticada seria
necessria para separar os vrios componentes do alimento sob
os aspectos qumicos e nutricionais.

B. Van Soest

Para resolver o problema da fibra bruta descrito no


tpico anterior, tem sido proposto ultimamente o mtodo de Van
Soest (1967), o qual divide os componentes da amostra
analisada em carboidratos no fibrosos (erroneamente

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conhecido como contedo celular), que compreende as fraes


solveis em detergente neutro, conforme preconiza o mtodo.
Engloba uma srie de compostos qumicos e nutricionalmente
definidos, tais como: lipdeos, compostos nitrogenados, amido,
pectina e outros compostos solveis em gua. A segunda parte,
que compreende os carboidratos fibrosos (erroneamente
chamado de parede celular), chamada de fibra em detergente
neutro (FDN) inclui a protena insolvel, a hemicelulose e a
lignocelulose que engloba principalmente, as fraes de lignina
e celulose. Sob o aspecto nutricional, o mtodo Van Soest
separa melhor os diversos componentes da frao fibrosa.
Portanto, desejvel a substituio da tradicional fibra bruta
pela fibra em detergente neutro (FDN) do ponto de vista
nutricional.

Na realidade os mtodos de Weende e de Van Soest nos


fornecem informaes suficientes sobre a composio qumica
de determinado alimento.

C. Nutrientes digestveis totais

O sistema proposto por Weende no leva em


considerao os demais componentes dos alimentos, conforme
foi visto no tpico anterior. Sendo apenas qumico, no leva em
considerao o animal e sua capacidade de transformar
alimentos. Tentando suprir esta falha, Henry e Morrison
desenvolveram, em 1910, o sistema NDT, que calculado como
segue:

Caixa de texto: % NDT = % Protena Digestvel + % Extrato Etreo Diges


Extrato No Nitrogenado Digestvel

A determinao do NDT na prtica morosa e cara.


Atualmente calcula-se o NDT a partir da energia digestvel,
tomando-se por base que 1 kg de NDT produz cerca de 4400
Kcal de energia digestvel.

D. Determinao de minerais

A anlise de minerais, tanto os macros como os micros,


atualmente realizada com grande preciso pela tcnica de
absoro atmica. Os macrominerais so expressos em % dos
ingredientes e os microminerais na base de mg/kg de alimento
ou ppm. As anlises mais comuns so para determinao de
clcio e fsforo.

E. Determinao de vitaminas
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A anlise de vitaminas que antigamente era feita por


mtodos microbiolgicos, hoje est sendo efetuada por
espectrofotometria e por cromatografia. As vitaminas A, D e F
so expressas em unidades internacionais (UI), as demais so
expressas em miligrama.

F. Determinao de aminocidos

Os aminocidos que antigamente foram determinados


por mtodo microbiolgico, hoje so analisados
quantitativamente por cromatografias. Na anlise de
aminocidos necessrio, inicialmente, hidrolisar as protenas,
o que feito com cido clordrico a 6 N. Com hidrlise cida,
muitos aminocidos podero ser destrudos e, para contornar
este fato, usa-se a hidrlise cida para certos aminocidos e a
hidrlise alcalina para outros.

Posteriormente, o hidrolisado pode ser analisado por


cromatografia gasosa ou separado por cromatografia em coluna,
e analisado por calorimetria, usando ninidrina como reagente. O
analisador de aminocidos separa e analisa os aminocidos.

G. Outras anlises e testes

Teste de Eber

Reao de Kreis

Testes de perxidos

ndice de Urase

Teste de Gossipol

Determinao do nitrognio no protico

Determinao da digestibilidade in vitro

Determinao da presena de pesticidas

Determinao do contedo de NaCl

Determinao do teor de caroteno

Determinao do teor de xantofilas

Determinao de micotoxinas

Determinao do pH

2.2 Anlises Fsicas

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Existe uma grande quantidade de testes que ainda


podero ser feitos para o controle de qualidade dos alimentos e
da prpria rao balanceada. Entre eles esto:

A. Testes microscpicos

Atravs dos testes microscpicos, determina-se o


formato das clulas e dos gros de amido dos ingredientes. Em
funo destes parmetros possvel detectar-se falsificaes.

B. Determinao do valor energtico

A energia bruta de um alimento pode ser avaliada


atravs do calor produzido durante sua combusto em uma
bomba calorimtrica. A determinao da energia bruta
bastante usada em pesquisas para avaliar os valores de energia
metabolizvel do alimento.

C. Granulometria

A determinao da granulometria de moagem dos


alimentos, principalmente das sementes de milho e soja,
bastante importante na fabricao de raes balanceadas. Sabe-
se que a digestibilidade da rao bastante influenciada pelo
tamanho das partculas dos alimentos que a constitui.

D. Secagem

O grau de secagem dos gros importante para fazer


seu armazenamento, evitando-se o desenvolvimento de fungos
e perda do material. Alm disso, o teor de matria seca dos
ingredientes da rao influencia no total dos nutrientes e da
energia da rao.

E. Torrao

A avaliao do grau de cozimento, tostagem ou torrao


bastante importante para avaliar a qualidade do alimento. O
excesso de torrao pode desnaturar as protenas do alimento,
tornando-o de baixa qualidade. Muitas vezes observado
excesso de torrao no farelo de soja.

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F. Excesso de escamas, ossos, chifres, plos,


sangue, cartilagens, materiais estranhos, etc

Estes tipos de determinaes so bastante usados para


avaliar produtos e sub-produtos de origem animal.

As farinhas de pescados no de vem conter excessos de


escamas, cartilagens, ossos e sangue. Estes materiais, apesar
de conter nveis elevados de protenas, clcio e fsforo, possue
baixa qualidade e aproveitamento pelos animais.

comum observar a adio fraudulenta de ossos,


sangue, chifres, plos, cascas e contedo do aparelho digestivo
nas farinhas de carne. Estes resduos possuem elevados teores
de protenas, mas de qualidade e aproveitamento muito baixo.

G. Densidade, cor e odor

A determinao destes caractersticas tambm


bastante importante para avaliar a qualidade da matria prima
de uma rao. So usadas constantemente para ajudar no
diagnstico de fraudes.

2.2. Anlises Bacteriolgicas

As anlises bacteriolgicas so usadas para verificar o


grau de contaminao com microorganismos e presena de
toxinas. A aspergilose bastante comum nos concentrados de
origem vegetal, principalmente no farelo de amendoim, e
precisa ser avaliada antes do uso destes alimentos.

As farinhas de origem animal so freqentemente


contaminados com microrganismos que diminui o desempenho
dos animais, provocando diarrias e em casos mais graves, a
morte. As determinaes mais comuns so:

Contagem e tipificao de microrganismos

Aspergilos

Salmonelas

Coliformes

Fungos, etc.

2.3. Testes biolgicos

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Vrios testes podem ser realizados, entre eles esto a


determinao do valor biolgico das protenas e o valor
energtico dos alimentos.

As forragens constituem, freqentemente, a principal


fonte de nutrientes para os bovinos e, s vezes, so o nico
alimento oferecido, sob a forma de pasto verde picado, silagens
ou feno. De todos os nutrientes necessrios s exigncias dos
bovinos, a energia constitui a principal contribuio das
forragens. Por isto, torna-se importante conhecer a
digestibilidade de cada uma das forragens que compe a
alimentao destes animais.

Resumindo, podem-se citar os seguintes testes


biolgicos:

Valor biolgico de protenas

Digestibilidade in vivo

Valor energtico dos alimentos

Biodisponibilidade de nutrientes

Avaliao do valor nutricional de alimentos


atravs do desempenho dos animais

Avaliao dos efeitos dos fatores anti-nutricionais


presentes em alimentos, etc.

Fracionamento de
protena e carboidrato pelo
CNCPS

1. Introduo

As determinaes de protena e energia no levam em


considerao a dinmica da fermentao ruminal e as perdas.
Para solucionar estes problemas os sistemas modernos de
adequao de dietas para ruminantes enfatizam a necessidade
da sincronizao da degradao de nitrognio e carboidrato no
rmen, para que se obtenha a mxima eficincia de sntese de
protena microbiana, bem como a reduo das perdas
energticas e nitrogenadas decorrentes da fermentao ruminal.
Com base neste princpio o sistema Cornell Cornell Net
Carbohydrate and Protein System (CNCPS) criou o
fracionamento dos carboidratos e protenas para poder predizer
com maior preciso o desempenho dos animais a partir dos

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ingredientes da dieta. O CNCPS, por intermdio de modelos


mecanicistas, estima a quantidade de protena microbiana
sintetizada, o escape ruminal de nutrientes e, com isso, a
protena metabolizvel, a partir dos dados relativos s fraes
de carboidratos e protenas, bem como de suas taxas de
degradao. Estas informaes podem ser utilizadas como base
para predizer a EM e protena absorvida.

2. Fracionamento dos alimentos

O CNCPS assume que os alimentos so compostos de


protena, carboidratos, gorduras, minerais e gua. A matria
seca (MS) da protena e dos carboidratos so novamente
subdivididos pela composio qumica, caractersticas fsicas,
degradao ruminal e caractersticas de digestibilidade ps-
ruminal. As fraes de protena, carboidrato, mineral, gordura e
gua nos alimentos pode ser originada das seguintes anlises
qumicas laboratoriais padro (SNIFFEN et al., 1992):

a) MS dos alimentos;

b) Fibra detergente neutro (FDN) e lignina (VAN


SOEST et al., 1991);

c) Nitrognio total como analisado atravs do macro


ou micro Kjeldahl;

d) Protena solvel como determinado pelo


procedimento de KRISHNAMOORTHY et al.
(1983);

e) Nitrognio que insolvel em detergente


neutro (NIDN) (sem sulfito de sdio) e detergente
cido (NIDA) (VAN SOEST et al., 1991);

f) Minerais (MM);

g) Gordura solvel em extrator (EE); e

h) Clculo do carboidrato no fibroso (CNF)


pela determinao do FDN, protena, gordura, e
minerais ou diretamente (VAN SOEST et al.,
1991): 100 [(FDN PIDN) + EE + MM].

3. Fracionamento da protena dos alimentos

Importncia As exigncias em protena metabolizvel


dos ruminantes so atendidas pela protena microbiana
sintetizada no rmen e pela protena diettica digestvel que
escapa fermentao ruminal, o que torna a nutrio protica
do ruminante bastante complexa. Portanto, qualquer mtodo
para determinao da qualidade da protena dos alimentos

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deve, necessariamente, considerar a contribuio do alimento


para a sntese de protena microbiana e para a protena que
escapa do rmen.

A protena dividida em trs fraes: nitrognio no


protico (NNP), protena verdadeira, e nitrognio indisponvel.
Isto tem sido descrito como frao A (NNP), B (protena
verdadeira), e C (protena indisponvel), respectivamente. A
protena verdadeira novamente fracionada em trs subfraes
(B1, B2 e B3) baseada nas suas taxas inerentes de degradao
ruminal.

Fator de Converso O fator 6,25 normalmente usado


para se transformar a % de nitrognio em protena, levando-se
em conta que as protenas contm, em mdia, 16% de
nitrognio.

Quando o teor da frao A dos alimentos estiver alto,


pode resultar em perdas nitrogenadas ruminais na forma de
amnia NH3. Isto porque, esta frao esta prontamente
disponvel no rmen de tal forma que os microorganismos no
podem utilizar, quando em excesso, todos os aminocidos e NH3
liberados. Em tais situaes, a adio de fontes energticas de
rpida degradao pode reduzir as perdas nitrogenadas e
melhorar o desempenho animal, em virtude do aumento da
sntese de protena microbiana no rmen. (MALAFAIA, 1997).

A taxa de digesto da frao B1 de 150 a 300%/h


(SNIFFEN et al., 1992).

O nitrognio associado com o FDN normalmente a


protena ligada parede celular que tambm inclui o nitrognio
indisponvel encontrado no resduo de detergente cido. A
protena insolvel em soluo de detergente neutro, mas solvel
em detergente cido digestvel, porm lentamente degradvel
e tem sido definida como a frao B3 no CNCPS. Geralmente a
protena associada parede celular est amplamente ligada aos
carboidratos hemicelulolticos (glicoprotenas) que esto
envolvidos na ligao ramificada de cadeias de carboidratos na
parede celular da planta (Fry, 1988, citado por LICITRA et al.,
1996). O aquecimento desnatura a frao B2 das protenas e
pode aumentar a protena indisponvel e assim aumentar a
frao B3 bem como a frao C obtida como NIDA.

Essas protenas esto quimicamente ligadas


parede celular vegetal, apresentando as funes de defesa
contra patgenos, de elasticidade, no processo de lignificao e
na rigidez da parede celular vegetal (Showalter, 1993, citado por
MALAFAIA e VIEIRA, 1997).

No possvel uma completa extrao de todo


nitrognio da parede celular da planta. A parte central do

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resduo parece ser resistente, indigestvel e est associada com


a lignina em forragens tenras que no contm tanino. O tanino
quando presente, um dos fatores possivelmente responsvel
por aumentar a protena insolvel associada com a parede
celular da planta. Outro fator a reao de Maillard ou
caramelizao enzimtica causada pelo aquecimento e secagem.
Estas fraes tm baixa disponibilidade biolgica e tende a ser
reconsiderada na FDA (VAN SOEST and MASON, 1991).

O nitrognio insolvel em
detergente cido (NIDA) considerado
como indigestvel durante sua permanncia
no trato gastrintestinal. Esta frao
denominada frao C no Sistema de Cornell.

Para determinar o NIDA necessrio fazer a fibra


detergente cida (FDA). A FDA entendida como uma
preparao para a determinao da celulose, lignina, NIDA,
cinza insolvel em detergente cido (CIA) e slica. Ela no
uma frao fibrosa vlida para uso nutricional ou para a
predio de digestibilidade.

As anlises seqenciais para as fraes fibrosas so


atrativas porque interferncias importantes podem ser
encontradas e porque o uso de amostra mais econmico. A
principal vantagem que estimam com maior preciso o
contedo de hemicelulose e celulose por diferena. A
hemicelulose estimada pela subtrao da FDA pela FDN ser to
baixa quando a pectina for precipitada dentro do FDA. A slica
biognica tem um efeito semelhante porque ela solvel em
soluo de detergente neutro e insolvel em soluo de
detergente cido (VAN SOEST et al., 1991).

A anlise seqencial de FDA determinada a partir


do resduo da anlise de FDN. Devido o fato da soluo de
detergente neutro solubilizar pectinas, cinzas e outros
compostos no removidos por detergente cido, a FDA
seqencial menor que a FDA direta na maioria dos alimentos.
Todos os mtodos para FDA isolam principalmente celulose e
lignina com alguma contaminao por pectina, cinza e
compostos nitrogenados (principalmente produtos da reao de
escurecimento no-enzimtico (MERTENS, 1992)).

Mediante a diferena entre os teores de NIDN e os de


NIDA, pode-se determinar a frao B3 (SNIFFEN et al., 1992).

A frao B3 degradada lentamente no rmen e,


portanto, apresenta elevado escape, sendo potencial fonte de
aminocidos no intestino delgado (CABRAL, 1999). A taxa de
digesto da frao B3 de 0,1 A 1%/h (SNIFFEN et al., 1992).

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A frao B2, a qual degradada em taxa


intermediria no rmen, serve tanto como fonte de aminocidos
e peptdeos no rmen, quanto no intestino delgado (CABRAL,
1999). A taxa de digesto da frao B2 de 5 a 15%/h
(SNIFFEN et al., 1992).

A determinao do NIDN e do NIDA segue


inicialmente os mesmos protocolos para obteno da fibra em
detergente neutro (FDN) descritos por VAN SOEST et al. (1991).

Consideraes do fracionamento de protena

A taxa de degradao dos alimentos influenciada


pela taxa de passagem que varia devido ao tamanho da
partcula, densidade, hidratao e nvel de alimentao. A frao
A e B1, por apresentar elevada degradao, sendo pouco
afetada pelo aumento da taxa de passagem. Dessa forma,
pode-se inferir que a principal fonte de nitrognio no rmen
nas primeiras horas aps a ingesto de alimentos, e sua
contribuio no duodeno muito pequena. Entretanto, as
fraes B2 e B3, por apresentar taxa intermediria e lenta de
digesto no rmen, respectivamente, tendem a escapar em
maior proporo e serem mais afetadas pelo aumento da taxa
de passagem, contribuindo com a maior parte da protena
potencialmente digestvel no intestino delgado.

Os alimentos que contribuem com maior proporo


de PNDR digestvel no intestino delgado (PNDRd) so aqueles
com maior percentagem das fraes B2 e B3.

Portanto, constata-se a importncia da


determinao das fraes que compem a PB dos alimentos e
de suas taxas de digesto, pois, dessa forma torna-se possvel
estimar a degradao ruminal e o escape protico, que, aliados
aos dados de digestibilidade intestinal, permitem estimar a
protena metabolizvel de cada alimento (CABRAL, 1999).

Segundo VALADARES FILHO (2000), nem todo


fracionamento protico feito pelo CNCPS deveria ser adotado no
Brasil, em relao avaliao protica dos alimentos para
ruminantes. Apenas deveriam ser obrigatrias, alm da anlise
de PB, pelo menos a determinao da frao dos compostos
nitrogenados no proticos, da frao insolvel em detergente
cido (NIDA) e insolvel em detergente neutro (NIDN), isto as
fraes A, C e por diferena (NIDN NIDA) a frao B3,
respectivamente. Porm, dependendo da finalidade da pesquisa,
o fracionamento conforme descrito pelo CNCPS, se torna
necessrio, principalmente, quando se pretende calcular o
escape ruminal de protena oriundo de cada uma dessas
fraes.

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Como a quantificao e a estimativa das taxas de


degradao dessas fraes de protena so responsveis pelo
maior ou menor escape de nitrognio ruminal e pelo
atendimento dos requerimentos de nitrognio dos
microorganismos ruminais, fica implcito que alimentos com
teores de PB similares, mas com diferenas nestas fraes e nas
suas taxas de degradao, resultaro em predies incorretas
sobre o desempenho animal se na formulao das raes no
for considerada a dinmica destas fraes no rmen e nos
intestinos (MALAFAIA, 1997).

Tabela 01 Percentagem de protena bruta (PB), protena no-degradada no


rmen e digestvel no intestino delgado (PNDRd) e das fraes nitrogenadas

Alimentos PB PNDRd

(%MS) (%PB)

K=3%/h K=6%/h C

C. Tifton-85 (30cm) 14.67 47.45 54.04 8.26

C. Tifton-85 (50cm) 9.96 32.59 39.33 11.40

Feno de alfafa 18.75 28.32 37.48 9.49

Feno de coast-cross 10.40 52.09 55.54 12.59

Silagem de milho 7.09 17.81 21.84 15.74

Farelo de algodo 31.90 25.82 38.07 5.06

Farelo de trigo 17.44 29.21 38.91 2.06

Gro de soja 46.83 18.97 24.31 4.40

Farelo de soja 50.88 32.60 46.83 0.98

Fub de milho 8.54 39.24 51.39 0.82

Fonte: CABRAL, 1999.

4. Fracionamento de carboidrato dos alimentos

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Importncia Se baseia na classificao das bactrias


ruminais quanto utilizao dos carboidratos que constituem a
parede celular vegetal e daqueles que se localizam no contedo
celular com funo no-estrutural. A caracterizao das fraes
que constituem os carboidratos dos alimentos obtidos nas
condies tropicais e a determinao das taxas de degradao
de cada frao sero instrumentos valiosos para formulao de
raes que visem maximizao do crescimento microbiano
ruminal e, consequentemente, a melhor predio do
desempenho dos animais.

Determinao do contedo de carboidratos totais

Os carboidratos so a principal reserva da energia


fotossinttica nas plantas, constituindo 50 a 80% da matria
seca das plantas forrageiras e dos cereais. Para os ruminantes,
representam a principal fonte de energia para manuteno de
suas funes fisiolgicas, que, devido fermentao
microbiana, a qual altera a natureza dos componentes da dieta,
tornam-se disponveis principalmente na forma de cidos graxos
volteis (CABRAL, 1999).

Depois de determinado a PB, EE e MM contido no


alimento, expressando-os como percentagem da MS, o contedo
de carboidrato total (CHO) no alimento pode ser estimado,
calculando por diferena (100 PB EE MM) (SNIFFEN et al.,
1992).

4.1 Determinao qumica das fraes de


carboidratos dos alimentos

Os carboidratos podem ser classificados como


carboidratos fibrosos (CF) e no fibrosos (CNF), de acordo com
o seu comportamento no trato gastrintestinal (TGI). Os
primeiros compreendem basicamente a celulose e hemicelulose,
que, juntamente com a lignina, desempenham funes de
sustentao e proteo e so lenta e parcialmente disponveis,
alm de ocuparem espao no TGI. J os CNF, representados
pelos acares solveis em gua (mono e dissacardeos), amido
e pectina, so rpida e completamente digerveis no TGI.
Entretanto, o CNCPS classifica os carboidratos de acordo com a
taxa de degradao (frao A rpida e acar solvel; frao
B1 intermediria e amido + pectina; frao B2 lenta e a
parede celular disponvel; e a frao C a parede celular
indisponvel). Estas fraes so calculadas de alimentos
contendo carboidratos no fibroso (CNF), carboidrato fibroso
(CF) e frao indigestvel (C).

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Devido variao na contaminao de solo nas


forragens e alimentos, o contedo de cinzas deve ser informado
ou excludo da FDN. A soluo de detergente neutro dissolve
pectina e slica biognica, mas no os minerais do solo
silicatados (VAN SOEST et al., 1991).

O contedo de lignina nas forragens varia de 5 a 25% da


parede celular da planta; as leguminosas tm um maior
contedo do que as gramneas. Porm as leguminosas so
tipicamente mais digestveis do que as gramneas pelo fato de
conterem menos FDN, mesmo que elas contenham mais lignina
e que a digestibilidade de sua fibra seja menor que as das
gramneas (MERTENS, 1992).

Com o aumento da maturidade, principalmente das


gramneas tropicais, implica no aumento da sntese de
constituintes da parede celular, bem como do seu espessamento
e da deposio de lignina, o que tende a aumentar a frao
indigervel, reduzindo, dessa forma, a frao potencialmente
digervel (WILSON, 1994).

Determinao da frao C A estimativa da frao C


a partir da frmula proposta por SNIFFEN et al. (1992), a qual
se baseia na concentrao de lignina dos alimentos (lignina x
2,4) tende a subestimar a respectiva frao em volumosos
tropicais, quando comparada aos valores encontrados a partir
da determinao do resduo indigervel aps 144 horas de
digesto, contudo isso somente ser correto se esse resduo for
corrigido para protena e cinzas. Nessas gramneas, outros
fatores alm da concentrao de lignina tm sido
correlacionados negativamente sua digestibilidade.

A incubao ruminal por sete dias resultou em valores


menores para o resduo da FDN. Dessa forma, para se ter idia
da real extenso da degradao ruminal da FDN, as forrageiras
obtidas em condies tropicais devero ser incubadas por
perodos superiores a 96 horas (MALAFAIA, 1997).

Tem-se recomendado atualmente que a frao seja


determinada atravs do material remanescente aps 144 horas
de digesto in situ ou in vitro.

O aumento da frao C e a reduo dos CNF podem


implicar em reduo da disponibilidade de energia para os
microorganismos que fermentam carboidratos fibrosos e no-
fibrosos o que poderia influir na eficincia de sntese de protena
microbiana e, ainda, conduzir a perdas de nitrognio no rmen,
se porventura forem utilizados suplementos proticos de mdia
ou rpida degradao (CABRAL, 1999).

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Consideraes do fracionamento de carboidrato

As diferenas nas fraes de carboidratos (B2 e CNF)


entre os alimentos, bem como a sua alterao com o avano da
maturidade das plantas, podem afetar a disponibilidade de
energia no rmen para crescimento microbiano, o que, por sua
vez, influencia o fluxo de protena microbiana para o intestino
delgado (CABRAL, 1999).

Os alimentos com elevada frao de CNF so boas fontes


de energia para crescimento dos microorganismos que utilizam
carboidratos no fibrosos. Dessa forma, seria benfica a
incluso de fontes proticas de rpida e mdia degradao no
rmen, quando estes alimentos compem a base da dieta,
objetivando a sincronizao entre a liberao de energia e
nitrognio, uma vez que a liberao de energia de maneira mais
rpida que a sua utilizao para crescimento microbiano pode
levar ao processo de dissipao de energia por parte dos
microorganismos, conhecido como Energy Spilling.

Quando expressos em percentagem dos carboidratos


totais, os valores dos carboidratos no-fibrosos (CNF), obtidos
pela diferena MO (PB+ EE + FDNcp), revelaram-se como
adequados para aferir a obteno da frao A + B1 por meio
das anlises seqenciais da FDN, utilizando-se a frmula 100
(C + B2). Notou-se que, em ambos os casos, os valores foram
semelhantes. Esta proposta de caracterizao das fraes A e
B1 se fundamenta no aspecto da praticidade para clculo de
raes para ruminantes e no aspecto analtico, uma vez que as
metodologias de determinao do amido no resultam em
valores verossmeis e no apresentam boa repetibilidade em
funo da natureza heterognea dos tecidos vegetais
(MALAFAIA, 1997). A frao B2 constitui basicamente de parede
celular digestvel (FDN) (MALAFAIA, 1997).

As taxas de degradao das fraes A, B1 e B2 variam


entre 200-300,20-40 e 5-10%/h, respectivamente (SNIFFEN et
al., 1992).

Tabela 02 Fraes de carboidratos nos volumosos e nos


concentrados

Alimentos Fraes de carboidratos(%CHT)

C B2 A+B1

Tifton-85 20.17 74.38 5.45

Elefante 20.84 69.31 9.85


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Brizanta 18.76 69.99 11.25

Decumbens 16.32 72.06 11.62

Soja 36.79 33.92 29.29


perene

Gordura 15.84 76.79 7.37

Silagem de 17.62 60.66 21.72


milho

Feno de 22.68 76.58 0.74


coast-cross

Feno 25.20 73.15 1.65


decumbens

Farelo de 26.91 8.10 64.99


soja

Farelo de 25.95 25.47 48.58


algodo

Fub de 3.90 8.12 87.98


milho

Sorgo 6.63 21.97 71.41


modo

Farelo de 16.22 40.29 43.49


trigo

Fonte: MALAFAIA, 1997.

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Mtodos de
12 ver 18 de jun de Jos
65 s
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Anlises dos k o1
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