Técnicas Espectrofotométricas
Técnicas Espectrofotométricas
Técnicas Espectrofotométricas
Tipos de espectrofotometra:
Absorcin de Infrarrojos
Absorcin de UV-Visible
Resonancia magntica nuclear
Fluorescencia
Emisin atmica
Absorcin atmica de masas
Fluorescencia de rayos X
Espectrofotometra Infrarrojo:
Espectroscopia infrarroja (Espectroscopia IR) es la rama de la
espectroscopia que trata con la parte infrarroja del espectro
electromagntico. Esta cubre un conjunto de tcnicas, siendo la ms
comn una forma de espectroscopia de absorcin. As como otras
tcnicas espectroscpicas, puede usarse para identificar un compuesto e
investigar la composicin de una muestra. Esta se puede dividir segn el
tipo de la radiacin que se analiza, en:
Espectrofotometra UV-Visible:
La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometra ultravioletavisible (UV/VIS) es una espectroscopia de emisin de fotones y una
espectrofotometra. Utiliza radiacin electromagntica (luz) de las
regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del
espectro electromagntico, es decir, una longitud de onda entre 190nm
y 780nm. La radiacin absorbida por las molculas desde esta regin del
espectro provoca transiciones electrnicas que pueden ser
cuantificadas.
La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos grupos
funcionales de molculas, y adems, para determinar el contenido y
fuerza de una sustancia.
Se utiliza de manera general en la determinacin cuantitativa de los
componentes de soluciones de iones de metales de transicin y
compuestos orgnicos altamente conjugados.
Se utiliza extensivamente en laboratorios de qumica y bioqumica para
determinar pequeas cantidades de cierta sustancia, como las trazas de
Calibracin de un espectrofotmetro:
1. Encender el espectrofotmetro.
2. Esperar 15 minutos.
3. Calibracin: dependiendo del tipo de espectrofotmetro, algunos
tienen la tecla CAL para calibrar con un blanco; otros, por ejemplo,
tienen la tecla Mode y estn para elegir entre Absorbancia y
transmitancia.
4. Seleccionar la longitud de onda, ya sea digitalmente o con una
perilla analgica.
5. Introducir la celda con el blanco con un volumen arriba de la
mitad, pero no hasta arriba, en el portaceldas del aparato.
Presionar la tecla CAL y esperar a que la absorbancia se ponga a
cero.
6. Hacer la curva de calibracin con soluciones de concentracin
conocida.
7. Despus de hacer la curva es posible medir casi cualquier
concentracin de cualquier muestra. :D
Absorcin
Rangos de absorcin de 50 en 50 nm
1.8
Abs. Mx. a
400 nm
1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
300
350
400
450
500
Longitud de onda
550
600
650
Absorbancia
1.58
Abs. Mx.
a 410 nm
1.56
1.54
1.52
1.5
1.48
1.46
385
390
395
400
405
Longitud de onda
410
415
420
Absorbancia
1.395
1.39
1.385
1.38
1.375
1.37
1.365
1.36
0
0.5
1.5
Concentracin en mg
2.5
3.5
Refractmetro de Abbe