Extraccion de ADN

UNIVERSIDAD NACIONAL DANIEL ALCIDES CARRION
FACULTAD DE CIENCIAS AGRPECUARIAS

EFP INDIUSTRIAS ALIMEMTARIAS
UNIVERSIDAD NACIONAL DANIEL

ALCIDES CARRION
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
EFP INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
TEMA:
EXTRACCION CASERA DE ADN
CATEDRA:
NUTRICION Y ALIMENTACION
CATEDRATICO:
Ing. JOLLHE WISSAR Andrea
SEMESTRE:
VI
INTEGRANTES:
BERNABE VILA Edgar
CASTILLO QUESADA Irene
CARHUAVILCA TORRES Eliane
FLORES ELIAS Nayaret
MANDARACHI ESCOBAR Ilen
VILLAR HINOSTROZA Darlene
ROJAS BERMUDO Enrique
La Merced – Chanchamayo
2019 0
TRABAJO
I. INTRODUCCIÓN
El ácido desoxirribonucleico o ADN es el material genético de los seres vivos. La extracción de
ADN se realiza con la finalidad de hacer estudios genéticos, de forense y biología molecular.
Nosotros podemos extraer ADN de forma fácil con productos caseros y un poco de cuidado.
Para los estudios genéticos más profesionales, se requieren protocolos especiales con diversos
pasos y materiales que pueden ser contaminantes. Sin embargo, podemos hacer una extracción de
ADN a partir de materiales que tenemos en casa, o que podemos hacer en el laboratorio de
biología del colegio. (Zita Ana, 2019)
La extracción de ADN se realiza como un paso previo para purificar el material genético o ADN
para realizar posteriormente estudios de análisis molecular (pruebas forenses, diagnóstico de
paternidad, diagnóstico de enfermedades, caracterización molecular, etc). El ADN de las frutas o
verduras que comemos lo utilizamos para identificar inequívocamente la especie o la variedad de
que se trata o incluso identificar los padres del individuo. (Gogorcena Yolanda, 2016)
El ADN de las frutas o verduras que comemos lo utilizamos por ejemplo para identificar
inequívocamente la especie o la variedad de que se trata o incluso los padres del individuo. En la
industria alimentaria el ADN se utiliza para detectar posibles fraudes en el caso de que se trate de
zumos o de mezclas de carnes o pescado.
La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos son
atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de
la célula. Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su
contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN. En ese momento,
el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN, carbohidratos, proteínas
y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al ADN, de gran longitud, se
habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y separadas de él por acción del detergente. Sólo
queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utiliza
alcohol isoamílico. La extracción de ADN se puede realizar de varios tejidos, en nuestro caso lo
haremos de la pulpa del melocotón, pero se puede repetir con otras frutas o verduras.
TRABAJO 1
II. OBJETIVOS
 Realizar la extracción de ADN de tejidos animales y vegetales y reflexionar sobre la simpleza
de su composición con sencillas técnicas.
 Observar la estructura fibrilar del ADN.
 Establecer la relación entre el proceso de extracción y propiedades químico - fisicas del ADN
III. MATERIALES
 Un atado de espinaca
 Agua destilada helada
 Sal
 Jabón o detergente liquido
 Alcohol 96 º (helado)
 Enzimas (bromelina, papaina)
 Licuadora
 Colador
 Tubos de ensayo
 Muestra vegetal : cebolla (refrigerada)
 Agua destilada
 Sal de mesa
 Bicarbonato sódico
 Detergente líquido
 Alcohol isoamílico a 0ºC o alcohol de 96 º
 Licuadora
 Nevera
 Colador o centrífuga
 Vaso
 Tubo de ensayo
 Varilla fina
TRABAJO 2
IV. PROCEDIMIENTO Y METODOLOGIA
Muestra: ESPINACA
1. Se licuo las hojas de espinaca, previamente heladas, sin las nervaduras con 200 ml de agua
destilada y con una pizca de sal, con impulsos de 8 segundos por velocidad. (tres
velocidades).
2. Se obtuvo el jugo molecular, el licuado duro 15 segundos.
3. Se vertió 150ml de jugo molecular en un vaso precipitado, después se agregó 2 cucharadas
de jabón líquido, se agito sin producir espuma.
4. Se pelo y se licuo la piña verde hasta obtener bromelina.
5. Se obtuvo la papaina raspando suavemente las gotas de latex de la papaya verde. v
6. Se coloco 3 ml de jugo molecular con 3ml de papaína en un tubo de ensayo y en un segundo
tubo de ensayo se coloco de 3ml de jugo molecular con 3ml de bromelina.
7. A estos tubos se le agrego 3 ml de alcohol helado.
8. Se formo una interfase entre el jugo molecular y el alcohol, y se movió lentamente con una
bagueta.
Muestra: CEBOLLA
1. Se preparo la sustancia tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en
un baño de hielo triturado:
 120 ml de agua destilada. No usar agua del grifo.
 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.
 5 g de bicarbonato sódico.
 5 ml de detergente líquido o champú.
2. La muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales es la cebolla, cortarla en
cuadraditos.
TRABAJO 3
3. Se trituro la muestra con un poco de agua en la licuadora accionando las cuchillas a impulsos
de 10 segundos. Así se rompieron muchas células y otras quedaron expuestas a la acción del
detergente.
4. Se mezclo en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular + 10 ml del tampón frío y se
agito durante al menos 2 minutos. Se separo después los restos vegetales más grandes del
caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible.
5. Se retiro 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y se agregó con pipeta 10 ml de
alcohol enfriado a 0ºC. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del
recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre el tampón.
6. Se introdujo la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el
alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán
enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto se retiró la varilla
atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedando adherido a su extremo con el
aspecto de un copo de algodón mojado.
V. RESULTADOS Y DISCUSI ÓN
5.1. Resultados de la Espinaca (Figura Nº1)
Al momento de mover la varilla se pudo observar el ADN de la Espinaca de un color
verde.
Resultados de la Cebolla (Figura Nº2)
Al momento de mover la varilla se pudo observar el ADN de la cebolla de color blanco.
5.2. Discusión
Según Cardozo y Giménez (2018), en su práctica de “EXTRACCION DE ADN DE LA
FRESA”. Usaron en su procedimiento el mortero en vez de la licuadora para la fresa, y
utilizaron un desengrasante de cocina para ayudar a romper las membranas celulares de
la fruta.
En la práctica: En ambas muestras de la Espinaca y la cebolla se licuo y se filtró lo que
también es lo recomendable para este método, pero se utilizó jabón líquido, que al igual
TRABAJO 4
que el desengrasante cumple con la misma función de ayudar a romper las membranas
celulares y liberar el ADN del núcleo.
Según Coronado Garceres (2014). En su práctica de “EXTRACCION DE ADN DE
VEGETAL”, nos dice que en caso de los vegetales como la espinaca y entre otros
vegetales se utiliza la Bromelina y Papaina para la extracción del ADN. La piña contiene
una enzima conocida con el nombre de bromelina o bromelaína. Ésta es una enzima
proteolítica, lo que quiere decir que es capaz de "romper" las proteínas dejando libres las
unidades que las forman, los aminoácidos. Analizando lo expuesto anteriormente, se
puede decir que se emplea en la extracción del material genético porque contribuye a
eliminar las proteínas que puedan contaminar el ADN de estas maneras puede obtener las
fibras.
En la práctica: En el procedimiento de la práctica para la extracción del ADN de la
Espinaca también se utiliza la Bromelina y Papaina lo que nos garantizó poder obtener
los resultados. Por la misma razón que Coronado Garceres nos fundamenta.
VI. CONCLUSIONES
Se logro obtenidos las fibrillas del ADN celular del tejido vegetal, por su fácil método de
extracción, siendo para estudiantes en formación una práctica de fácil realización. De la misma
forma, gracias a la extracción se observo de forma exitoso las fibrillas ADN celulares siendo de
mas notoriedad con aquella que se trabajó con papaína.
Gracias a la ruptura de la estructura celular y la combinación con ácidos, se logro obtener el ADN
de los tejidos, demostrando en práctica la sencilla de extracción de la estructura celular.
VII. RECOMENDACIONES
Realizar la presente practica con diferentes ácidos, para poder verificar si la extracción es de igual
resultado.
TRABAJO 5
VIII. BIBLIOGRAFIA
Cardozo y Giménez (2018). “PRACTICA DE EXTRACCION DE ADN”. Consultado el 21 de
diciembre del 2019. Recuperado de: http://www.colegioceualicante.es/blog/wp-
content/uploads/2018/02/practica-adn-fresa.pdf
Coronado, P. (2014). “EXTRACCION DE ADN VEGETAL”. Consultado el 21 de diciembre del
2019. Recuperado de: https://es.scribd.com/document/226069549/Informe-5-
Extraccion-Adn
Gogorcena Y. (2016). “DESCUBRE EL ADN DE LAS FRUTAS QUE COMEMOS”. España:
Ministerio De Ciencias Innovación Y Universidades. Consultado el 21 de diciembre del
2019. Recuperado de http://www.eead.csic.es/spreading/showspreading?Id=478
Zita A. (2019). “EXTRACCIÓN DE ADN (EXPERIMENTO CASERO)”. Consultado el 21 de
diciembre del 2019. Recuperado de https://www.todamateria.com/extraccion-adn-
experimento/
IX. CUESTIONARIO
1. ¿Qué componentes tiene el jabón líquido o detergente líquido, y como actúa en el
proceso de extracción del ADN?
Se utiliza detergente para romper la pared celular y la membrana plasmática, a
continuación, sirve para romper la membrana nuclear y llegar al núcleo donde se
encuentra el material genético o ADN y liberarlo.
2. ¿Por qué se trabaja en frio?
El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua pero que al encontrarse
con alcohol éste se desenrolla y cae hasta quedarse entre el agua y el alcohol, dos líquidos
con distintas densidades.
TRABAJO 6
3. ¿Que función tiene las enzimas en los enlaces proteicos?
Las enzimas son moléculas orgánicas que actúan como catalizadores de reacciones
químicas, es decir, aceleran la velocidad de reacción. Comúnmente son de naturaleza
proteica, pero también de ARN. Las enzimas modifican la velocidad de reacción, sin
afectar el equilibrio de la misma, ya que una enzima hace que una reacción química
transcurra a mayor velocidad, siempre y cuando sea energéticamente posible (ver energía
libre de Gibbs). En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas
denominadas sustratos, las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas
productos. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a
unas tasas significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina
reacciones enzimáticas.
4. ¿Qué tipo de Aminoácidos encontraríamos en las muestras utilizadas en la práctica?
 En la Espina aminoácidos como: la valina, la Metionina.
 En la Cebolla aminoácidos como: la Cisteína.
TRABAJO 7
X. ANEXOS
FIGURA Nº1 “ADN de la espinaca.
FIGURA Nº2 “ADN de la cebolla.

TRABAJO 8

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UNIVERSIDAD NACIONAL DANIEL

El ácido desoxirribonucleico o ADN es el material genético de los seres vivos. La extracción de

biología del colegio. (Zita Ana, 2019)

para realizar posteriormente estudios de análisis molecular (pruebas forenses, diagnóstico de

paternidad, diagnóstico de enfermedades, caracterización molecular, etc). El ADN de las frutas o

verduras que comemos lo utilizamos para identificar inequívocamente la especie o la variedad de

zumos o de mezclas de carnes o pescado.

 Realizar la extracción de ADN de tejidos animales y vegetales y reflexionar sobre la simpleza

de su composición con sencillas técnicas.

 Observar la estructura fibrilar del ADN.

 Agua destilada helada

 Jabón o detergente liquido

 Enzimas (bromelina, papaina)

 Muestra vegetal : cebolla (refrigerada)

 Alcohol isoamílico a 0ºC o alcohol de 96 º

IV. PROCEDIMIENTO Y METODOLOGIA

2. Se obtuvo el jugo molecular, el licuado duro 15 segundos.

3. Se vertió 150ml de jugo molecular en un vaso precipitado, después se agregó 2 cucharadas

de jabón líquido, se agito sin producir espuma.

4. Se pelo y se licuo la piña verde hasta obtener bromelina.

5. Se obtuvo la papaina raspando suavemente las gotas de latex de la papaya verde. v

6. Se coloco 3 ml de jugo molecular con 3ml de papaína en un tubo de ensayo y en un segundo

tubo de ensayo se coloco de 3ml de jugo molecular con 3ml de bromelina.

7. A estos tubos se le agrego 3 ml de alcohol helado.

1. Se preparo la sustancia tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en

un baño de hielo triturado:

 120 ml de agua destilada. No usar agua del grifo.

 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.

 5 ml de detergente líquido o champú.

2. La muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales es la cebolla, cortarla en

4. Se mezclo en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular + 10 ml del tampón frío y se

caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible.

5. Se retiro 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y se agregó con pipeta 10 ml de

recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre el tampón.

aspecto de un copo de algodón mojado.

5.1. Resultados de la Espinaca (Figura Nº1)

Al momento de mover la varilla se pudo observar el ADN de la Espinaca de un color

Resultados de la Cebolla (Figura Nº2)

Al momento de mover la varilla se pudo observar el ADN de la cebolla de color blanco.

Según Cardozo y Giménez (2018), en su práctica de “EXTRACCION DE ADN DE LA

FRESA”. Usaron en su procedimiento el mortero en vez de la licuadora para la fresa, y

utilizaron un desengrasante de cocina para ayudar a romper las membranas celulares de

En la práctica: En ambas muestras de la Espinaca y la cebolla se licuo y se filtró lo que

celulares y liberar el ADN del núcleo.

Según Coronado Garceres (2014). En su práctica de “EXTRACCION DE ADN DE

unidades que las forman, los aminoácidos. Analizando lo expuesto anteriormente, se

En la práctica: En el procedimiento de la práctica para la extracción del ADN de la

mas notoriedad con aquella que se trabajó con papaína.

de los tejidos, demostrando en práctica la sencilla de extracción de la estructura celular.

Cardozo y Giménez (2018). “PRACTICA DE EXTRACCION DE ADN”. Consultado el 21 de

diciembre del 2019. Recuperado de: http://www.colegioceualicante.es/blog/wp-

Coronado, P. (2014). “EXTRACCION DE ADN VEGETAL”. Consultado el 21 de diciembre del

2019. Recuperado de: https://es.scribd.com/document/226069549/Informe-5-

Gogorcena Y. (2016). “DESCUBRE EL ADN DE LAS FRUTAS QUE COMEMOS”. España:

Ministerio De Ciencias Innovación Y Universidades. Consultado el 21 de diciembre del

2019. Recuperado de http://www.eead.csic.es/spreading/showspreading?Id=478