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SEMINARIO TALLER DE ENFERMEDADES ECUATORIALES
LEISHMANIASIS
REALPE MORA EDWIN ZAMIR FANDIO JUAN FELIPE
UNIVERSIDAD SANTIAGO DE CALI FACULTAD DE SALUD DEPARTAMENTO DE MEDICINA CURSO DE ECOLOGA CALI 2014 2
SEMINARIO TALLER DE ENFERMEDADES ECUATORIALES LEISHMANIASIS
REALPE MORA EDWIN ZAMIR FANDIO JUAN FELIPE
LUIS ANTONIO GONZLEZ E.
UNIVERSIDAD SANTIAGO DE CALI FACULTAD DE SALUD DEPARTAMENTO DE MEDICINA CURSO DE ECOLOGA CALI 2014 3
INTRODUCCION
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ANTECEDENTES:
HISTORIA: La enfermedad es reconocida desde la antigedad, en el viejo mundo (Europa, Asia, frica) desde el ao 100 DC y en el nuevo mundo (amrica) entre los aos 400 y 900 D.C. Las primeras descripciones en Amrica Latina datan de la poca precolombina y estn antiguamente representados por las cermicas de Nasca en Per de lesiones mutilantes de la nariz y los labios, especialmente. Las primeras descripciones americanas datan del siglo XVI poca de la invasin espaola son: Fernando de Oviedo (1535) y Pedro Pizarro (1571) quienes describen una enfermedad que afecta a los indgenas en la ladera Este de la cordillera de los Andes, en los Valles calientes y hmedos donde se cultiva la coca; la Enfermedad que destruye la nariz y las cavidades nasales. En el siglo XVIII se reconoce el papel de los Flebtomos en la transmisin (Cosme Buneo 1764), en el ao de 1901 se le atribuyo el nombre de leishmaniasis por el apellido del mdico escoces William boog leishman, oficial del ejrcito. Antes de leishman la enfermedad era conocida como kala azar, que en hind significaba fiebre negra. Su apellido dio nombre al gnero de protozoos que la originan, leishmania, porque en el mismo tiempo otro mdico militar britnico destacado en la india, charles donovan, haba publicado resultados similares, por lo que el protozoo se llam con el nombre de los dos, leishmania donovani, pero, al ser leishman el que dio nombre al gnero y donovan a la especie, prevaleci el de leishman. La enfermedad es acuada con diversos nombres en el viejo mundo: Fornculo de Bagdad, Ulcera Oriental, Leishmaniasis Tropical, Botn de Biskra, Fornculo de Delhi, Fornculo de Alepo, Ulcera de Kandahal y en el nuevo mundo: Leishmaniasis Americana, Ulcera del Chiclero, Ulcera Bauru, Espundia, Uta. En Colombia, la enfermedad es comn entre las tropas insurgentes que operan al sur del pas, lo mismo que entre las tropas oficiales que combaten a las primeras. Se sabe que casi todos los secuestrados por la guerrilla tienen o han sufrido la enfermedad, inclusive varias veces.
DEFINICION:
Las leishmaniasis pertenecen a un grupo de enfermedades parasitarias zoonticas, producidas por diferentes especies de protozoarios hemoflagelados 5
del gnero Leishmania. La enfermedad es transmitida por insectos dpteros hematfagos, que corresponden a diferentes especies de flebtomos o lutzomyias, y el reservorio son animales vertebrados. Estas enfermedades se caracterizan por comprometer la piel, mucosas y vsceras, segn la especie de leishmania y la respuesta inmune del husped. Son enfermedades crnicas de patogenicidad baja y morbilidad relativa. La Leishmaniasis afecta inicialmente a vertebrados domsticos como los perros, considerados como su principal reservorio y animales salvajes como osos hormigueros, roedores, monos, zarigeyas, marsupiales, etc. La enfermedad es muy comn en climas tropicales hmedos, como zonas boscosas y selvticas, con temperaturas por encima de los 25 grados centgrados.
MANIFESTACIONES CLINICAS Y DIAGNOSTICO
MANIFESTACIONES CLINICAS: Las manifestaciones clnicas son variables y estn relacionadas a la cepa de leishmania infectante, el medio ambiente y a la respuesta inmune del hospedero. Se describen cuatro formas clnicas:
1) leishmaniasis cutnea La aparicin de las lesiones cutneas algunas veces se encuentra asociada con la picadura del insecto vector en sujetos que viven en reas endmicas, penetran y permanecen en el nicho ecolgico por breves das y, luego, presentan la enfermedad. En promedio, se puede hablar de un periodo de incubacin entre 2 y 3 semanas (de 2 semanas a 2 meses o ms). Despus aparece una pequea lesin inicial frecuentemente visible, pero no siempre, que tiene asiento en las partes descubiertas, principalmente en la cara y en las piernas. El aspecto tpico de la lesin inicial es un leve enrojecimiento circunscrito, frecuentemente pruriginoso, seguido, a los pocos das, por una leve infiltracin papulosa de unos 3 mm de dimetro y con mucha frecuencia con una o dos diminutas vesculas; puede dar lugar a una diminuta excoriacin por el rascado, que se transforma en una exulceracin y posible punto de partida de un proceso ulcerativo. Pero, algunas veces, la lesin hace una regresin espontneamente y origina una fase 6
de silencio sintomtico algo prolongado. Un trauma local puede activar una infeccin latente. Se ha observado como signo precoz en los casos de leishmaniasis cutnea la aparicin de ndulos linfticos, en la regin correspondiente. El inicio de los signos linfticos puede aparecer antes, al mismo tiempo o despus de la ulceracin, y, en casos muy raros, puede ser el nico signo de infeccin de leishmaniasis. Ms raros, son diminutos cordones linfticos infiltrados, perceptibles a la palpacin, entre la lesin primaria y el ganglio infartado. Esto puede considerarse como un 'complejo primario' que la mayora de veces pasa desapercibido por su escasa intensidad, o sea una verdadera, pero diminuta, lcera primaria acompaada por la infiltracin linftica regional correspondiente. Algunas veces se ha observado una lesin modular de tipo subdrmico, sin lesin cutnea visible como punto de partida de un infarto ganglionar manifiesto. Esto indica que el complejo ganglionar es la regla en la enfermedad, aunque no siempre pueda ser evidenciable. Despus de varios das, la lesin inicial se ulcera espontneamente y se cubre de un exudado amarillento y adherente, que dar lugar a la costra. Debajo de la costra, la lesin se extiende en superficie y profundidad. Pueden aparecer lesiones satlites que al unirse a la inicial, originan una lcera grande. La lcera caracterstica de la leishmaniasis es redondeada, indolora, con bordes bien definidos levantados y cortados en forma de sacabocado e indurada que recuerda la imagen de un crter. Cuando se desprende la costra se observa un fondo granulo matoso, limpio, con exudado seroso no purulento, sin tendencia al sangrado, de color rojizo, a veces amarillento cuando hay depsito de fibrina. No hay signos inflamatorios, como edema o calor local. Si hay una infeccin bacteriana sobre agrega dable, la lcera se torna dolorosa, exudativa y purulenta. La piel alrededor de la lesin presenta aspecto y coloracin normales. Su tamao oscila entre los 0.5 a 3cm.
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2) leishmaniasis mucocutnea
Las manifestaciones clnicas de la forma mucocutnea se presentan muchos meses o aos despus haber cicatrizado la forma cutnea; ocasionalmente aparecen cuando todava existen las manifestaciones en la piel. Frecuentemente el enfermo ya no se encuentra en la zona donde contrajo la enfermedad. Se describe aparicin de lesiones mucosas entre los 20 y 30 aos despus de la resolucin de la lesin primaria. En un tercio de los casos, las manifestaciones mucosas son primarias, sin antecedente de lesin cutnea. Posiblemente la infeccin primaria ha sido inaparente o se ha manifestado como una lesin mnima que pas desapercibida para el paciente. Las lesiones mucosas se inician principalmente a nivel del tabique nasal cartilaginoso (septum cartilaginoso) y, raramente, en el piso de la nariz. Pero, pueden comenzar en otras partes de las vas areas superiores. Al inicio solo se aprecia una discreta secrecin de moco, como si el enfermo tuviera una rinitis o un resfriado. Luego, se produce la inflamacin de la mucosa, que se vuelve eritematosa, edematosa y dolorosa; la lesin se profundiza y produce una pericondritis. Hay hipertrofia vascular y de los orificios pilosebceos, que produce abundante seborrea. Cuando las lesiones estn avanzadas, se presenta exudacin y ulceracin de la mucosa. Luego, se compromete el cartlago y se produce la perforacin del tabique, que si destruye parcial o totalmente el tabique determinar la cada de la punta de la nariz. El eritema, edema y la infiltracin producen aumento del volumen de la punta de la nariz y el ala, que puede sobrepasar el surco nasogeniano. A esta nariz grande de la leishmaniasis se la conoce con el nombre de 'nariz de tapir'. La perforacin del tabique nasal y el achatamiento de la nariz sin ulceracin son propias de la leishmaniasis mucocutnea (espundia) y no son observadas en la leishmaniasis cutnea andina, en la que, de preferencia, las alas de la nariz son carcomidas. La leishmaniasis mucocutnea, en los primeros aos de su evolucin, no afecta el estado general del paciente, el puede realizar su labor normalmente. Sin embargo, cuando las lesiones mucosas estn muy avanzadas y comprometen la mucosa de la boca y la laringe, la respiracin y la alimentacin, el estado general del enfermo se altera. 8
3) leishmaniasis visceral
La leishmaniasis visceral es una enfermedad parasitaria sistmica que compromete la vida, causada por el complejo L. donovania y transmitida por mosquitos flebtominos. La enfermedad es endmica en muchas regiones tropicales y subtropicales del mundo. El complejo Leishmania donovani incluye a la L. donovani en el subcontinente Indio, Asia y frica; a la L. infantum, en el mediterrneo y L. chagasi, en Sudamrica. En el Oriente medio se han encontrado cepas de L. trpica que causan enfermedad visceral. La leishmaniasis visceral ocurre espordicamente en reas endmicas rurales, pero epidemias en gran escala se han asociado al hambre, migraciones en masa y alteraciones ecolgicas, las que han propiciado interacciones entre los reservorios, mosquitos y seres humanos. Despus de la picadura del vector, existe un periodo de incubacin que vara de 4 a 10 meses. En muy pocos casos se encuentran lesiones en la puerta de entrada, ya que la mayora de las veces pasa desapercibida y tiene una evolucin crnica. La progresin a leishmaniasis visceral tpica usualmente ocurre entre los 3 y 8 9
meses despus de la infeccin; aunque se han reportado casos tempranos, como de dos semanas. Sin embargo, despus de la infeccin la mayora de los casos permanece asintomtica o est asociada con sntomas leves que, eventualmente, se resuelven en forma espontnea. Las manifestaciones clnicas de la leishmaniasis visceral tpica estn asociadas con fiebre, la que casi siempre es progresiva y elevada, remitente o intermitente, que dura semanas y se alterna con periodos febriles, que tambin duran semanas. Posteriormente, la fiebre se torna persistente y ondulante. Existe progresivo deterioro del husped, palidez y hepatoesplenomegalia. En la fase crnica, la esplenomegalia es muy marcada y puede llegar hasta la fosa iliaca derecha, con abultamiento considerable del abdomen. Existe una linfadenopata generalizada, en especial de los ganglios mesentricos, epistaxis, hemorragia gingival, edema y ascitis. La leishmaniasis visceral a menudo es fatal si no se efecta tratamiento adecuado. La piel se encuentra hiperpigmentada.
DIAGNOSTICO:
La aproximacin diagnstica ms exacta considera tres criterios que debern abordarse en el siguiente orden: 1) Antecedentes epidemiolgicos: 10
Es importante conocer el lugar de procedencia del paciente, las residencias anteriores, la permanencia o la visita a reas endmicas de leishmaniasis, los antecedentes ocupacionales relacionados, como el trabajo en los lavaderos de oro, la recoleccin de caf o de cacao en la selva del Per. Adems, es importante indagar sobre la presencia de lesiones cutneas anteriores que puedan haber sido catalogadas como leishmaniasis o no, y que, con el antecedente de haber permanecido en un rea endmica, demoraron en la cicatrizacin. 2) Cuadro clnico sugestivo de leishmaniasis Las manifestaciones clnicas son variables y estn relacionadas en parte a la especie de Leishmania, al medio ambiente y a la respuesta inmune del hospedero. Las formas clnicas ya descritas corresponden a: leishmaniasis cutnea, mucocutnea y visceral. La localizacin y el diagnstico clnico precoz previenen la aparicin de complicaciones y secuelas destructivas. -Definicin de casos de leishmaniasis: Caso probable. Caso de leishmaniasis diagnosticado bajo criterio clnico- epidemiolgico, sin confirmacin por exmenes de laboratorio. Caso confirmado. Caso probable que sometido a exmenes parasitolgico, inmunolgico e histopatolgico o cultivo demuestra positividad a la infeccin por leishmania. 3) Exmenes de laboratorio: mtodos directos e indirectos Siempre se debe tener en cuenta que los procedimientos empleados en el diagnstico de leishmaniasis tegumentaria americana (LTA) dependen, en gran parte, de la finalidad e infraestructura del laboratorio en que se trabaja. Por otro lado, se sabe que, debido al polimorfismo clnico de la LTA, la obtencin de las muestras variar segn los mtodos de demostracin y aislamiento de los parsitos. Los exmenes de laboratorio se agrupan en directos o parasitolgicos e indirectos o inmunolgicos.
Mtodos directos o parasitolgicos En el diagnstico parasitolgico hay dos alternativas. La primera es demostrar que el paciente est albergando la leishmania, mediante la visualizacin, en el frotis o 11
en la histopatologa, de amastigotes en tejidos infectados. La segunda opcin es intentar el aislamiento directo de los promastigotes en cultivos in vitro de las lesiones sospechosas. Otro mtodo empleado es la inoculacin de animales de laboratorio (hmster dorado) y ratones isognicos y no isognicos, a partir de los que se puede aislar y caracterizar a la Leishmania a travs de PCR (reaccin en cadena de la polimerasa), anticuerpos monoclonales y/o electroforesis de isoenzimas.
INVESTIGACIN DE AMASTIGOTES
En las lesiones cutneas
La lcera es la ms frecuente presentacin clnica de la LTA. Independientemente de la especie de leishmania causante, las lesiones, por lo general, se encuentran contaminadas por hongos, bacterias o mico bacterias. Por ello, se debe realizar una buena asepsia, previa a la toma de muestra. Cuando los parsitos circulantes en el rea endmica pertenecen al subgnero Viannia, la eficiencia de visualizacin y aislamiento es menor en los frotises si se compara con las leishmanias del subgnero Leishmania, debido a las densidades parasitarias de 18 a 52% y de 30 a 40%, respectivamente. La positividad de la histopatologa con hematoxilina-eosina est alrededor del 48% en el Per; sin embargo, existen reportes de que en Brasil solo se alcanza entre 18 y 28% en leishmaniasis cutnea. La tcnica de inmunoperoxidasa indirecta (IMPI) es muy eficiente en la observacin y localizacin del parsito, con 61% de positividad, y si la lesin tiene menos de 3 meses de evolucin, puede alcanzar el 75%.
En las lesiones mucosas
En relacin con las formas mucosas nicas o mltiples, los procedimientos generalmente utilizados son la biopsia con ayuda de pinzas cortantes especiales (cutting biopsy punch) y los frotises de las biopsias. La L. (V) brasiliensis es difcil de diagnosticar en los granulomas mucosos. Llanos-Cuentas en Per, reporta 48% de positividad en lesiones mucosas nicas y 72,7% en lesiones mltiples, 12
mientras que Cuba, en Brasil, halla 27,4% en los frotises de las biopsias y 16% en la histopatologa. Estos resultados son opuestos a los de Dimier-David, en Bolivia, que public una positividad de 17,7% para los frotises y 28,4%, para la histopatologa. Marsden llama la atencin que es ms fcil detectar los parsitos en lesiones mucosas mltiples, que en lesiones nicas de L. (V) brasiliensis, lo cual tambin fue reportado por Dimier-David.
Investigacin de promastigotes De las fases evolutivas de Leishmania, la forma promastigote es la ms fcil de ser cultivada in vitro, en ella se hacen la mayora de las investigaciones parasitolgicas. Ya en la dcada del 70, era opinin generalizada que los parsitos pertenecientes al hoy, subgnero Viannia (complejo brasiliensis), eran difciles de cultivar. Este hecho era completamente opuesto a la facilidad con que se cultivaban las leishmanias del subgnero Leishmania (complejo mexicana) en cualquier medio agar sangre. Hoy sabemos que no existe un nico medio de cultivo artificial capaz de reunir caractersticas tales que consiga cumplir los objetivos enunciados. Por tanto, es recomendable que cada rea endmica de LTA, ensaye primero algunos medios conocidos por su sensibilidad. Esto permitir una mayor eficiencia futura en el aislamiento de los parsitos que circulan en el foco de transmisin. Los medios de cultivo empleados pueden ser monofsicos (Eagle, MEM, 19TC, el medio RPMI 1640 y el Schneider), o bifsicos (Agar sangre-NNN, Agar sangre USAMRU, medio de Senekjie).
MTODOS DE CULTIVO
Aislamiento primario de las lesiones cutneas
La sensibilidad del mtodo est directamente relacionada con la correcta seleccin que hagamos del medio ms apropiado y con la habilidad del investigador para escoger el lugar de la lesin que sea la de mayor actividad parasitaria (la que slo surge despus de aos de experiencia y prctica). Para la recoleccin de la muestra para el cultivo, podemos usar la tcnica de aspiracin de las lesiones por el procedimiento descrito por Hendricks o a travs de una biopsia punch y 13
posterior triturado en una solucin de suero fisiolgico y antibiticos. Es importante sealar que la excesiva presencia de sangre en las muestras colectadas es perjudicial para el desarrollo del parsito. Segn Evans, la sangre contiene protenas sricas altamente inhibitorias para el crecimiento de los promastigotes de leishmania.
Aislamiento primario de las lesiones mucosas.
Es bastante difcil aislar Leishmania de los granulomas mucosos, en medios de cultivo, tanto por la contaminacin de bacterias y hongos ambientales como del husped. Por ello los cultivos deben contener antifngicos (5-fluorocitosina) y antibiticos (gentamicina y estreptomicina) a 4C durante 24 horas. Esto se realiza previo a la inoculacin de los tubos de cultivo. Sin embargo, la eficacia es poco significativa. El mejor hallazgo lo reporta Cuba en Brasil con 30%, mientras que Dimier-David, en Bolivia, consigui 23% de positividad en medio NNN complementado con Schneider y antibiticos.
Uso de la inoculacin en hmsters en el diagnstico de LTA
Con el empleo de este mtodo, Cuba reporta 60% de positividad en animales inoculados con la suspensin de la biopsia triturada, y de solo aproximadamente 35%, cuando proceden a aspirar con aguja y jeringa las lesiones e inmediatamente inoculan los animales. En Per, Llanos-Cuentas reporta 69,9% de positividad. Para comprobar el parasitismo del hmster inoculado no basta hacer un simple frotis del lugar clnicamente positivo, es necesario cultivar, ello porque el frotis apenas demostrar 25% de animales con amastigotes. En la leishmaniasis, tanto cutnea como mucosa, el xito en el aislamiento es inversamente proporcional al tiempo de duracin de la enfermedad. Se debe admitir que no existe una tcnica de aislamiento que rena todas las caractersticas necesarias a fin de diagnosticar parasitolgicamente el 100% de los pacientes con LTA. La opinin generalizada es que el mximo rendimiento se consigue con la combinacin de 2 o 3 de ellas. Si a esto se asocian la prueba de Montenegro y la serologa por Elisa, el diagnstico laboratorial de LTA puede llegar al 90,0%. 14
Mtodos inmunolgicos Se basan en la deteccin de la enfermedad a travs de la respuesta inmune celular (intradermorreaccin de Montenegro o leishmanina) y/o respuesta inmune humoral a travs de anticuerpos especficos desarrollados como consecuencia de la enfermedad (Elisa/DOT Elisa, inmunofluorescencia indirecta (IFI). Intradermorreaccin de Montenegro Es una reaccin de hipersensibilidad tarda que evala la inmunidad mediada por clulas. Consiste en la aplicacin de un antgeno extracto soluble preparado a partir de promastigotes procedentes de cultivo. Se aplica intradrmicamente en la cara anterior del antebrazo izquierdo del paciente y se hace la lectura a las 48 a 72 horas. Se considera positiva si es mayor de 10 mm. La prueba aparece positiva 1 a 3 meses despus de haber adquirido la infeccin y permanece positiva de por vida en pacientes con LCL y LCM, y es negativa en los pacientes con LCD, forma visceral y en inmunosuprimidos. Tiene un 96% de positividad en los tres primeros aos de iniciada la enfermedad.
Inmunofluorescencia indirecta (IFI) y pruebas enzimticas Elisa Estas pruebas detectan anticuerpos antileishmania circulantes en el suero del paciente a ttulos bajos. En las lesiones ulceradas por L. (V) brasiliensis la sensibilidad a la IFI est en torno del 70% dentro del primer ao de iniciada la enfermedad. Algunos pacientes son persistentemente negativos. Las lesiones mltiples, tanto cutneas como mucosas, estn asociadas a ttulos ms altos. De otro lado, las lesiones mucosas presentan ttulos ms altos que las lesiones cutneas y muestran ttulos elevados persistentemente. Despus del tratamiento y la cura clnica en ambas formas de la enfermedad, los ttulos caen o desaparecen completamente. Un tercio de los pacientes permanecen seropositivos despus de los 30 aos de enfermedad. La primera muestra debe recolectarse en el primer contacto con el paciente, la segunda al mes, la tercera a los 3 meses, otra a los 6 y la ltima al ao de la cicatrizacin de la lesin. Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) 15
Es un mtodo que se est usando rutinariamente para confirmar el diagnstico de leishmaniasis. La identificacin puede ser hecha de una biopsia sin requerir necesariamente un cultivo. Los resultados comparativos entre la PCR y los mtodos de deteccin parasitolgicos muestran una mejor sensibilidad del primero para fines de diagnstico.
DIAGNOSTICO DIFERENCIAL
Es importante realizar un diagnstico diferencial cuidadoso con otras entidades que pueden producir lesiones semejantes. Se debe considerar el medio geogrfico donde se encuentra trabajando el paciente y cules son las patologas ms frecuentes en esa zona, que podran confundirnos con leishmaniasis. Leishmaniasis cutnea andina: infecciones de piel ocasionadas por bacterias pigenas, lceras por vasculopata, lepra lepromatosa, tuberculosis, sfilis secundaria o terciaria, micosis superficiales, sarcoidosis y carcinomas de piel. Leishmaniasis mucocutnea: infecciones de mucosas ocasionadas por paracoccidioidomicosis, histoplasmosis, tuberculosis nasal, sfilis terciaria, granuloma letal de la lnea media, pian, hanseniasis y neoplasias. Leishmaniasis visceral: infecciones infantiles como malaria crnica, linfomas, esprue tropical y leucemias. En Per no ha sido reportada esta forma clnica, pero existen en pases limtrofes como Brasil, Bolivia y Colombia.
DISTRIBUCION Y BIOLOGIA DE LOS VECTORES:
CICLO BIOLOGICO DE LA LEISHMANIA: Todas las leishmanias presentan un ciclo de vida similar y es importante conocer cada una de las etapas para poder entender y aplicar ciertas medidas de control. La leishmania es heterognea y completa su ciclo biolgico usando dos huspedes. Se pueden producir diferentes ciclos: Uno, principalmente silvestre, en el que la leishmania circula entre los reservorios naturales, y mantiene el ciclo con la participacin de los vectores propios de la zona endmica. En un segundo ciclo, 16
los vectores infectados pueden atacar al hombre y a los animales domsticos o peri domsticos. Se puede producir un tercer ciclo, en el que el propio enfermo con leishmaniasis se constituye en reservorio.
Estado humano 1. El mosquito toma la sangre (inyecta el promastigote en la piel). 2. Promastigote es fagocitado por el macrfago. 3. El promastigote se transforma a amastigote en el interior del macrfago. 4. El amastigote se multiplica en las clulas de diversos tejidos (incluyendo los macrfagos).
Estado mosquito 5. El mosquito toma la sangre (ingiere macrfagos infectados con amastigotes). 6. Ingestin de la clula infectada. 7. El amastigote se transforma a estado promastigote en el intestino del mosquito 17
8. Se divide en el intestina y migra hacia la proboscis.
i: estado infeccioso d: estado diagnostico
El ciclo empieza cuando el vector toma sangre de un vertebrado infectado, para alimentarse, e ingiere macrfagos infectados con amastigotes presentes dentro de la piel. La transformacin del amastigote a promastigote ocurre dentro de las siguientes 24 a 48 horas. Los promastigotes se multiplican activamente por divisin binaria longitudinal. Algunos quedan libres desde el inicio en el lumen intestinal; otros se adhieren a la pared por hemidesmosomas. La localizacin del parsito en el intestino vara de acuerdo a cada especie de vector y de leishmania. Despus de la replicacin en el intestino, los promastigotes migran al esfago y la faringe. En el tubo digestivo de la hembra del vector, los promastigotes son estructuras piriformes o fusiformes que presenta la extremidad posterior ms delgada que la anterior, su cuerpo es flexible y se mueve por la accin de un flagelo libre situado en la parte posterior que es casi de igual tamao que el cuerpo; el ncleo se localiza en el centro de la clula y el kinetoplasto entre el ncleo y la extremidad anterior somtica; el rizonema parte del kinetoplasto y se contina con el flagelo libre Cuando el vector infectado pica a un husped le inocula entre 10 y 100 promastigotes presentes en la proboscis y que penetran en la dermis. La saliva del mosquito tiene un rol en el establecimiento de la infeccin, debido a que reduce la produccin del xido nitroso por los macrfagos activados. En los vectores excesivamente infectados, la proboscis est congestionada, lo que hace difcil alimentarse, por lo que el mosquito realiza mltiples picaduras e inoculaciones. Los promastigotes no migran activamente hacia los macrfagos, permanecen en el espacio intercelular y activan el complemento por una va alternativa, que inicia la acumulacin de neutrfilos y macrfagos. Aunque muchos promastigotes son destruidos por los leucocitos polimorfos nucleares, unos pocos se transforman en amastigotes en las clulas del sistema reticuloendotelial, en un periodo de 3 a 4 horas en promedio, permanecen en estado estacionario por 36 horas aproximadamente y, luego, empiezan a reproducirse. La adhesin entre el parsito y los macrfagos es una etapa fundamental para la invasin de las clulas del husped. Sobre la superficie de la Leishmania han sido identificados numerosos receptores, entre los ms importantes la glicoprotena 63 (gp63) y el lipofosfoglicano (LPG), que son usados por los parsitos para adherirse 18
a los macrfagos. Las especies de Leishmania han desarrollado varios mecanismos para resistir la actividad digestiva y antimicrobiana de las clulas fagocticas. Los amastigotes son ms resistentes que los promastigotes a los mecanismos antimicrobianos inducidos por citoquinas dependientes del oxgeno, lo que refleja una adaptacin al crecimiento intracelular. Los amastigotes se multiplican por fisin binaria dentro de vacuolas parasitforas de los macrfagos. Primero, inician la divisin del kinetoplasto, uno de los fragmentos conserva el rizonema, mientras que el otro forma su propia estructura flagelar. Luego, sigue la divisin del ncleo por mitosis y concluye con la del citoplasma, en sentido anteroposterior. La cantidad de amastigotes puede llegar hasta 200, lo que ocasiona la distensin y ruptura del macrfago. Los amastigotes libres entran en nuevas clulas del sistema fagocitario mononuclear, donde se multiplican de nuevo. El ciclo se reanuda cuando el flebtomo pica a un husped para alimentarse de sangre.
EL VECTOR:
Los vectores de Leishmania pertenecen a la familia Psychodidae, subfamilia Phlebotominae, gneros Phlebotomus (vectores en el Viejo Mundo) y Lutzomyia (vectores en Amrica). Son insectos pequeos, de 3 a 5 mm de longitud, y de hbitos nocturnos; en el da permanecen en reposo en madrigueras, cavernas y huecos de rboles. Slo la hembra es hematfaga, necesita la sangre para el desarrollo de los huevos. La hembra coloca los huevos en madrigueras, hojarasca y huecos de rboles. Los ebotomneos tienen un aparato picador muy corto y por ello solo pican en reas descubiertas de la piel y para alcanzar el capilar deben macerar la dermis e inocular con la saliva enzimas proteolticas, lo que hace que la picadura sea dolorosa y que se forme en el sitio una mcula rosada de halo ms claro, que persiste durante uno o dos das. Los ebotomneos son atrados por la luz y las preferencias alimenticias varan de una especie a otra. En Amrica se conocen cerca de 400 especies de Lutzomyia de las cuales 22 han sido implicadas como vectores. En Colombia, de las 128 especies de Lutzomyia informadas se han encontrado naturalmente infectadas con Leishmania e incriminadas como vectores las siguientes especies: Lu. Trapidoi con L. (V.) panamensis), Lu. Gomezi con L. (V.) panamensis y L. (V.) braziliensis, Lu. Spinicrassa con L. (V.) braziliensis, Lu. Umbratilis con L. (V.) guyanensis, 19
Lutzomyia columbiana con. (L.) mexicana, Lu. Longipalpis y Lu. Evansi con L. (L.) infantum.
FACTORES DE RIESGO:
Condiciones socioeconmicas La pobreza aumenta el riesgo de leishmaniasis. Las malas condiciones de vivienda y las deficiencias de saneamiento de los hogares (por ejemplo, la ausencia de sistemas de gestin de residuos, alcantarillado abierto) pueden promover el desarrollo de los lugares de cra y reposo de los flebtomos y aumentar su acceso a la poblacin humana. Los flebtomos se ven atrados por el hacinamiento, ya que constituye una buena fuente de ingesta de sangre. Las pautas de comportamiento humano (por ejemplo, dormir a la intemperie o en el suelo) tambin es probable que aumenten el riesgo. El uso de mosquiteros tratados con insecticida reduce el riesgo.
Malnutricin Las dietas bajas en protenas, hierro, vitamina A y cinc aumentan el riesgo de que la infeccin progrese hacia el kala-azar (LEISHMANIASIS). 20
Movilidad de la poblacin Las epidemias de las dos formas principales de leishmaniasis a menudo se asocian con la migracin y el desplazamiento de personas no inmunizadas a zonas donde ya existen ciclos de transmisin. La exposicin en el trabajo y el aumento de la deforestacin siguen siendo factores importantes. Por ejemplo, asentarse en zonas previamente boscosas significa acercarse al hbitat del flebtomo, lo que puede llevar a un aumento rpido del nmero de casos. Cambios ambientales Los cambios ambientales que pueden influir en la incidencia de la leishmaniasis son, entre otros, la urbanizacin, la integracin del ciclo de transmisin en el hbitat humano y la incursin de las explotaciones agrcolas y los asentamientos en las zonas boscosas. Cambio climtico La leishmaniasis es sensible a las condiciones climticas, y los cambios en las precipitaciones, la temperatura y la humedad influyen en gran medida en la enfermedad. El calentamiento de la Tierra y la degradacin del suelo afectan en muchos aspectos a la epidemiologa de la leishmaniasis: - Los cambios de temperatura, precipitaciones y humedad pueden tener efectos importantes en los vectores y los reservorios animales, al alterar su distribucin e influir en las tasas de supervivencia y el tamao de la poblacin; - pequeas fluctuaciones en la temperatura pueden tener un acusado efecto en el ciclo de desarrollo de los promastigotes de Leishmania en los flebtomos, y permitir que el parsito se transmita en zonas donde la enfermedad no era previamente endmica; - Las sequas, las hambrunas y las inundaciones que se producen como consecuencia del cambio climtico pueden llevar a desplazamientos masivos y la migracin de personas hacia zonas de transmisin de la leishmaniasis, y la desnutricin puede debilitar la inmunidad de las poblaciones afectadas.
Estrategias de prevencin y control Segn la Organizacin Mundial de la salud (OMS, Control de las Leishmaniasis: informe de una reunin del Comit de Expertos de la OMS sobre el Control de las 21
Leishmaniasis, 2012) el desarrollo de nuevos medicamentos y vacunas para las diferentes formas de Leishmaniasis plantea dificultades debido a la variedad de especies del parasito, de mecanismos patolgicos y de respuestas inmunitarias1 Aunque actualmente no se cuenta con un mecanismo que nos garantice una proteccin a dicha enfermedad, si contamos con diversas formas de disminuir el aumento progresivo de ella. As entonces tenemos como mtodos de prevencin los siguientes: el control de vectores ya que este disminuye la probabilidad de que la enfermedad se propague; tambin tenemos como mtodo el cuidado del medio ambiente y personal; los programas de control qumico han sido implementados en el primero, en ellos comprende el uso de insecticidas (fumigar el contexto donde habita y el uso toldillos cubiertos con insecticida) ha trado buenos resultados 1-2. Los programas de proteccin personal se centran en el uso de ropa adecuada que disminuya el contacto y evite las picaduras de mosquitos y tambin el uso de repelentes para insectos es de vital importancia. Para el control de la enfermedad se debe en primer lugar realizar el diagnstico y en seguida practicar el respectivo tratamiento a las personas infectadas, para cada caso de Leishmaniasis existen diversas manifestaciones clnicas y diagnsticos (vase en la pgina 5).En seguida es importante aplicar los mtodos de prevencin que ms se adecuen a su contexto. La educacin y la informacin de la poblacin en riesgo acerca de la enfermedad son de suma importancia, ya que aumentara la poblacin informada y educada y as entonces disminuiran los casos de ella. Una herramienta que actualmente tenemos son las tecnologas de informacin y comunicacin (TIC), el implemento de las TIC son de gran ayuda, ya que uno de sus objetivos permite que la informacin pueda llegar a todos o en su mayora a los lugares ms alejados, el buen uso de estas herramientas contribuira a aumentar la poblacin informada acerca de los mtodos de prevencin y control de la Leishmaniasis y por ende disminuiran los casos de esta. Los programas de estrategias de prevencin que a continuacin se presentan forman parte del informe de una reunin del comit de expertos de la OMS sobre el control de las Leishmaniasis, se presentan de manera similar a lo expuesto en el informe y en algunos casos se realiza una breve modificacin en la escritura. http://www.who.int/iris/handle/10665/82766 (26/04/2014)
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- Leishmaniasis visceral por L. donovani y L. infantum en frica Oriental y en el suroeste de la pennsula Arbiga.
Predominan: - focos de transmisin antropontica relacionados con L.donovani. - focos de transmisin zoontica en los que el reservorio domstico es el perro relacionados con L. infantum. Vectores: - Phlebotomus Martini y orientalis, son sinantrpicos. Se identificaron brotes relacionados con el desplazamiento masivo de personas no inmunes hacia zonas endmicas, la malnutricin, la agitacin social y las enfermedades conexas. Medidas mnimas - deteccin pasiva de los casos y tratamiento - confirmar mediante pruebas serolgicas (rK39) los casos sospechosos.
Control de reservorios - deteccin activa de los casos y su tratamiento Control de los vectores - Fumigar los termiteros - uso de mosquiteros de cama tratados con insecticidas
- Leishmaniasis cutnea antropontica por L. trpica
Pases involucrados: Afganistn, Azerbaiyn, India, Iraq, Israel, Marruecos, Pakistn, Repblica rabe Siria, Repblica Islmica de Irn, Turqua y Uzbekistn. 23
Predomina en asentamientos con gran densidad de poblacin, la transmisin de persona a persona es por P. sergenti. - Medidas mnimas Son de gran importancia debido a que resultan eficaces y positivas sus aplicaciones. - deteccin pasiva y tratamiento oportuno en los periodos de baja transmisin. - mejora en las viviendas y saneamiento ambiental. Control de reservorios - deteccin activa de los casos en especial entre los nios y los migrantes. - Buscar casos de Leishmaniasis recidivante sobre todo durante periodos de baja transmisin. Control de vectores - Fumigacin con insecticidas de accin residual dentro y fuera de las casas donde se ha detectado casos de la enfermedad y tambin en sus alrededores. - Eliminacin de basuras y materiales de las casas, calles y solares. - Realizar comprobaciones peridicas de los mtodos aplicados. - Fomentar los mosquiteros tratados con insecticida de accin prolongada.
- Leishmaniasis cutnea por L. guyanesis
Presente en algunos pases Sur Americanos La transmisin est asociada a las actividades llevadas a cabo cerca a lugares de donde hay mayor exposicin a la naturaleza. Medidas Mnimas - Deteccin pasiva y activa de los casos. - notificacin y el tratamiento de todos los casos. Control de reservorios 24
- No se ha implementado Control de vectores - Fumigacin en lugares de reposo - en la Guayana Francesa se ha implementado la tala forestal en un radio de 300 m alrededor de las aldeas, acompaadas de aplicacin de insecticidas.
PROGRAMAS SOSTENIBLES DE PREVENCIN Y CONTROL
Segn la OMS en solo un tercio de los pases donde la leishmania es endmica (85 de los 98) se debe notificar de manera obligatoria los casos de Leishmaniasis. (OMS, informe de una reunin del comit de expertos de la OMS sobre el control de las Leishmaniasis). Con respecto a los programas de control, la OMS ha propuesto una gua para realizarlo, as entonces el programa debe satisfacer cuatro fases, que son: 1. Evaluacin de la situacin 2. Preparacin del programa nacional 3. Aplicacin 4. Monitorizacin Cada fase comprende diferentes subtemas. A continuacin se presenta la gua. FASES DE LA ELABORACIN DE UN PROGRAMA NACIONAL DE CONTROL DE LA LEISHMANIASIS
1. Evaluacin de la situacin Realizar una evaluacin terica de los informes publicados y no publicados para examinar los tipos de enfermedad, la distribucin geogrfica aproximada, las estimaciones de la poblacin expuesta y los posibles vectores y huspedes reservorios animales y su distribucin. Analizar la rentabilidad y la viabilidad de diversas estrategias de control. Evaluar la gestin de los datos y el sistema de notificacin. Realizar una vigilancia puntual (prevalencia local, presuntos vectores y huspedes reservorios animales). 25
2. Preparacin del programa nacional identificar los requisitos para el control; definir estrategias de control vlidas, de acuerdo con los datos disponibles. Establecer una coordinacin intersectorial y un cuerpo consultivo tcnico. Hacer un inventario de personal e instalaciones; calcular las necesidades de capacitacin y equipos, identificar los centros teraputicos y calcular las necesidades de medicamentos. Introducir la vigilancia pasiva en los centros sanitarios de las zonas endmicas para obtener estimaciones aproximadas de la prevalencia y mejorar las probabilidades individuales de curacin. Hacer obligatoria la notificacin de la Leishmaniasis. Establecer la viabilidad del programa en relacin con otras necesidades sanitarias. Elaborar una estrategia y un plan nacional de control. Solicitar fondos a fuentes nacionales e internacionales, y movilizar recursos. 3. Aplicacin Seguir movilizando recursos para apoyar las actividades de control. Establecer un sistema de gestin de los medicamentos y de otros suministros mdicos. Llevar a cabo las actividades de capacitacin; distribuir circulares, publicaciones de referencia y manuales; organizar un laboratorio nacional de referencia. Llevar a cabo las actividades educativas y de movilizacin social, incluidas las de comunicacin para lograr cambios de conducta; informar a la poblacin y preparar materiales visuales de ayuda. Reforzar los servicios de laboratorio y establecer vnculos con el laboratorio nacional de referencia. Reforzar el sistema de vigilancia de la enfermedad; recopilar, analizar y difundir la informacin obtenida. Establecer relaciones con los laboratorios internacionales parasitolgicos, entomolgicos y zoolgicos de referencia. Aplicar, si procede, medidas de control contra los vectores o los reservorios animales. 4. Monitorizacin y evaluacin Evaluar los progresos del programa: prevalencia e incidencia, lmites geogrficos, densidad de reservorios animales y densidad de flebtomos. Ajustar el programa y el plan en funcin de los resultados.
- Protocolo para la vigilancia en salud pblica de Leishmaniasis en Colombia
Su objetivo principal es identificar la totalidad de los casos de Leishmaniasis en Colombia, aumentar la deteccin y el tratamiento oportuno de esta y disminuir la 26
morbilidad, las complicaciones y mortalidad a causa de los diferentes tipos de Leishmaniasis. La estrategia presentada tiene dos puntos de partida, vigilancia pasiva y activa. V. Pasiva: Comprende la respectiva notificacin de todos los casos confirmados de Leishmaniasis, la investigacin de los casos de muerte por Leishmaniasis Visceral despus de la notificacin, adems el diagnstico oportuno y orientacin de las medidas de control acerca de dicha enfermedad. V. activa: Comprende las situaciones de transmisin epidmica de Leishmaniosis Cutnea y Visceral Se debe realizar la bsqueda activa de casos, el uso de las manifestaciones clnicas de los casos de Leishmaniosis Cutnea y Visceral permiten identificar especficamente que exmenes utilizar. Se recomienda utilizar el examen directo para Leishmaniosis cutnea y la toma de muestra de suero para inmunofluorescencia indirecta. Instituto Nacional de Salud Colombia.(2012). Protocolo para la vigilancia en salud pblica de Leishmaniasis. Recuperado de http://www.ins.gov.co/temas-de- interes/Leishmaniasis%20viceral/01%20protocolo%20Leishmaniasis.pdf (visto por ltima vez 26/04/2014) Evaluacin El Programa anteriormente mencionado comprende en su mayora las pautas que propone la OMS para el control de Leishmaniasis por eso podemos dar un visto bueno de este; sin embargo se debera implementar y aumentar los mtodos de difusin de la informacin acerca de la enfermedad para tener mayor cobertura, ya que hoy en da an existen personas que no estn al tanto de todos los beneficios y ayudas que se les otorga. - Toman acciones frente a la Leishmaniasis cutnea en el Tolima
La Gobernacin del Tolima, a travs de la Secretara de Salud Departamental, adelanta acciones en los municipios que hoy reportan al Sistema de Vigilancia Epidemiolgica casos positivos de Leishmaniasis Cutnea, enfermedad que se caracteriza por erupciones en la piel que no sanan rpidamente.
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Debido a los reportes de casos de Leishmaniasis (77) en diferentes municipios del Tolima los cuales son: Armero Guayabal (2), Chaparral (17), Falan (2), Ortega (1), Planadas (4), San Antonio (4), Rioblanco 44 y Rovira (3). Segn el reporte solo en el municipio de Rovira se ha implementado la fumigacin de 450 viviendas rurales donde se reportaron los casos de dicha enfermedad, ya que este presenta antecedentes de mayor incidencia de la enfermedad.
(04/03/2014). Toman acciones frente a la Leishmaniasis cutnea en el Tolima. Peridico el Nuevo da. Recuperado de http://www.elnuevodia.com.co/nuevodia/tolima/regional/211850-toman-acciones- frente-a-la-leishmaniasis-cutanea-en-el-tolima
Evaluacin
Se debera implementar y aumentar la vigilancia pasiva y activa, as como el control de reservorio y vectores para el caso de la Leishmaniasis cutnea; ya que as se lograra mayor eficacia en el programa y por ende la disminucin de la enfermedad en la zona.
- KALA AZAR: INDIA Y BANGLADESH
La real academia Nacional de Farmacia, publica el da 7 de noviembre de 2011 un artculo donde las organizaciones Drugs for Neglected Diseases initiative (DNDi), junto con OneWorld Health (OWH) y el Programa Especial para Investigar y Formar en Enfermedades Tropicales (TDR) anuncian el plan de estudios clnicos de diagnstico, tratamiento y frmaco vigilancia de la LeishmaniasisVisceral.
El plan se desarrollar hasta 2015, donde tendr la participacin de estudios clnicos y frmaco vigilancia de un total de 10.000 pacientes de tres pases del sur de Asia, Nepal INDIA Y BANGLADESH. Adoptar mejores estrategias de control y eliminacin de la enfermedad son objetivos primordiales del proyecto.
Se implementara y ser mejorada la atencin en nivel primario y secundario, para obtener mejoras en la deteccin y aplicacin de nuevos tratamientos. El uso de AmBisome (anfotericina B liposomal) en monoterapia y varias terapias de combinacin, con AmBisome, miltefosina y paromomicina, sern los pilares. Se realizara un estudio transversal mediante muestreo de distritos endmicos.
Este es el resumen que nos presenta la Real Academia Nacional de Farmacia, en el siguiente enlace se podr encontrar el artculo completo del proyecto Visceral Leishmaniasis Elimination Programme in India, Bangladesh, and Nepal: Reshaping the Case Finding/Case Management Strategy http://www.plosntds.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pntd.0000355 (visto por ltima vez 27/04/2014) 28
EMERGENCIAS:
Se da a conocer algunos casos de emergencia a raz de Leishmaniasis.
- Declaran emergencia sanitaria en Pando por Leishmaniasis (Bolivia)
Se declar debido al alto ndice de pacientes infectados con Leishmaniasis; las autoridades reportaron que en lo corrido de su gestin se han registrado 300 casos como mnimo en 3 municipios de Pando. Hiptesis planteadas revelan el incremento se debe a los altos ndices de crecimiento poblacional presentado en las reas rurales de dicho departamento. La finalidad de la declaratoria es el desembolso de recursos econmicos para comprar las respectivas ampollas y combatir la enfermedad.
(10/15/2013).Declaran emergencia sanitaria en Pando por Leishmaniasis. Peridico digital ERBOL. Recuperado de www.erbol.com.bo
LEISHMANIASIS EN PACIENTES CON SIDA
Se conoce como la confeccin leishmaniasis visceral-sida, su manifestacin clnica se relaciona con las lesiones cutneas similares a la leishmaniasis cutnea difusa, puede afectar algunas localizaciones anatmicas por ejemplo: laringe, pulmn, pleura, tubo digestivo peritoneo que generalmente no se asocian a las manifestaciones de la LV. La deteccin de anticuerpos especficos es negativa y son frecuentes las recidivas posteraputicas en la mayora de los casos (3)
-Caso de Leishmaniasis visceral en un paciente con infeccin por VIH
Se reporta el caso de un paciente con infeccin por VIH con leishmaniosis visceral, present sndrome febril prolongado con hepato-esplenomegalia, linfadenopatas y pancitopenia. Se plantearon los diagnsticos diferenciales de linfoma y otras infecciones oportunistas, como mico bacteriosis. Se confirm el diagnstico con la demostracin de amastigotes del parsito en el aspirado de la mdula sea. Se llev a cabo un tratamiento con anfotericina B deoxicolato por 14 das y a los 2 meses present una recada por lo cual recibi un segundo curso con el mismo medicamento por 21 das y se mantuvo posteriormente con profilaxis secundaria. Adems se realiz cambio de la terapia antirretroviral por fracaso 29
virolgico e inmunolgico. Ha continuado controlndose en forma ambulatoria por 29 meses presentando evolucin satisfactoria, sin nuevas recadas. (4)
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CONCLUSIONES
La falta de un control especfico para la leishmaniasis ha hecho que el diagnstico oportuno sea de gran ayuda y el principal pilar para disminuir y controlar la misma. No podemos dejar a un lado ningn mtodo que por experiencia o de acuerdo a las condiciones del contexto ha hecho un aporte til de informacin para la toma de decisiones en el respectivo tratamiento clnico, debido a la inexistencia de uno especfico. La leishmaniasis es endmica en nuestro pas, por esto es de gran importancia incentivar y aumentar los mtodos que ayuden a difundir las formas de control y prevencin de dicha enfermedad en toda la poblacin en especial en las zonas con mayor presencia de casos. Es primordial resaltar y dar a conocer que el principal reservorio lo constituyen los mamferos, entre ellos el perro, ya que al ser un animal domstico con el cual el ser humano tiene un gran contacto, el cuidado inadecuado del animal en zonas de riesgo aumentara la presencia de Leishmaniasis, as entonces el implemento de campaas para el cuidado animal es una buena salida para disminuir las probabilidades de contraer dicha enfermedad. La vigilancia continua de los mtodos de prevencin hacen sean ms eficaces y que por consiguiente se disminuya la probabilidad de la enfermedad. Debido a las manifestaciones clnicas caractersticas ulcerativas hacen que se facilite la identificacin de casos de Leishmaniasis Cutnea. Es importante resaltar que las condiciones socio econmicas de vida aumentan el riesgo, ya que a diario vemos como en los pases principalmente en los que estn en va de desarrollo presentan un dficit de socio econmico en la mayora de su poblacin y en busca de mejorar esto se generan las migraciones excesivas hacia las ciudades en busca de mejoras para su vida, hoy en da conocemos a este evento como proceso de urbanizacin que ha aumentado la poblacin en el rea urbana generando as los llamados asentamientos subnormales (condiciones insanas para vivir) y que por la falta de planificaciones gubernamentales a futuro ha generado una destruccin eco-urbanstica, as vemos que las condiciones insanas y la destruccin de las reas naturales o rurales generan un aumento en el riesgo de contraer enfermedades y en nuestro caso la Leishmaniasis. 31
BIBLIOGRAFIA
1. Organizacin mundial de la salud y Comit de Expertos de la OMS sobre el Control de las Leishmaniasis. (2012). Control de las Leishmaniasis: informe de una reunin del Comit de Expertos de la OMS sobre el Control de las Leishmaniasis. Recuperado de http://www.who.int/iris/handle/10665/82766
2. Ministerio de la proteccin social Colombia y Organizacin Panamericana de la salud. Gua de vigilancia entomolgica y control de la transmisin de Leishmaniasis. Recuperado de http://www.ins.gov.co/temas-de- interes/Leishmaniasis%20viceral/03%20Vigilancia%20Entomo%20Leishma niasis.pdf
4. Olea, Pilar. (2013). Leishmaniosis visceral en un paciente con infeccin por VIH. Revista chilena de infectologa, 30(2), 216-220. Recuperado en 27 de abril de 2014, de www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716- 10182013000200013&lng=es&tlng=es. 10.4067/S0716- 10182013000200013.